Name: Misurazione Loops Volume Pressione nel mouse (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-05-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 15 s
Description: Impara a misurare i loop pressione-volume nel topo per valutare la funzione cardiaca. Questo metodo permette di caratterizzare gli effetti fisiologici di manipolazioni genetiche sul cuore.

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<ol><li>Mozaffarian, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2015+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2015 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 131 (4), e29-e322 (2015).</li>
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<li>Georgakopoulos, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+murine+left+ventricular+pressure-volume+relations+by+miniaturized+conductance+micromanometry%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">In vivo murine left ventricular pressure-volume relations by miniaturized conductance micromanometry.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 274 (4 Pt 2), H1416-H1422 (1998).</li>
<li>Kass, D. A., Hare, J. M., Georgakopoulos, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+cardiac+function%3A+a+cautionary+tail%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Murine cardiac function: a cautionary tail.</a> Circ Res. 82 (4), 519-522 (1998).</li>
<li>Feldman, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+a+mouse+conductance+system+to+determine+LV+volume%3A+comparison+to+echocardiography+and+crystals%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Validation of a mouse conductance system to determine LV volume: comparison to echocardiography and crystals.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 279 (4), H1698-H1707 (2000).</li>
<li>Baan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+measurement+of+left+ventricular+volume+in+animals+and+humans+by+conductance+catheter%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Continuous measurement of left ventricular volume in animals and humans by conductance catheter.</a> Circulation. 70 (5), 812-823 (1984).</li>
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<li>Wei, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Volume+catheter+parallel+conductance+varies+between+end-systole+and+end-diastole%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Volume catheter parallel conductance varies between end-systole and end-diastole.</a> IEEE Trans Biomed Eng. 54 (8), 1480-1489 (2007).</li>
<li>Kutty, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+admittance+computed+left+ventricular+volumes+against+real-time+three-dimensional+echocardiography+in+the+porcine+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Validation of admittance computed left ventricular volumes against real-time three-dimensional echocardiography in the porcine heart.</a> Exp Physiol. 98 (6), 1092-1101 (2013).</li>
<li>Kottam, A., Dubois, J., McElligott, A., Henderson, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+approach+to+admittance+to+volume+conversion+for+ventricular+volume+measurement%5BTitle%5D)+AND+%22Conf+Proc+IEEE+Eng+Med+Biol+Soc%22%5BJournal%5D)">Novel approach to admittance to volume conversion for ventricular volume measurement.</a> Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. , 2514-2517 (2011).</li>
<li>Meyers, T. A., Townsend, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+right+ventricular+fibrosis+and+reduction+in+biventricular+cardiac+reserve+in+the+dystrophin-deficient+mdx+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Early right ventricular fibrosis and reduction in biventricular cardiac reserve in the dystrophin-deficient mdx heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 308 (4), H303-H315 (2015).</li>
<li>Townsend, D., Yasuda, S., Li, S., Chamberlain, J. S., Metzger, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emergent+dilated+cardiomyopathy+caused+by+targeted+repair+of+dystrophic+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Emergent dilated cardiomyopathy caused by targeted repair of dystrophic skeletal muscle.</a> Mol Ther. 16 (5), 832-835 (2008).</li>
<li>Townsend, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+administration+of+micro-dystrophin+restores+cardiac+geometry+and+prevents+dobutamine-induced+cardiac+pump+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Systemic administration of micro-dystrophin restores cardiac geometry and prevents dobutamine-induced cardiac pump failure.</a> Mol Ther. 15 (6), 1086-1092 (2007).</li>
<li>Strakova, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dystrobrevin+increases+dystrophin%27s+binding+to+the+dystrophin-glycoprotein+complex+and+provides+protection+during+cardiac+stress%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Dystrobrevin increases dystrophin's binding to the dystrophin-glycoprotein complex and provides protection during cardiac stress.</a> J Mol Cell Cardiol. 76, 106-115 (2014).</li>
<li>Yasuda, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dystrophic+heart+failure+blocked+by+membrane+sealant+poloxamer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Dystrophic heart failure blocked by membrane sealant poloxamer.</a> Nature. 436 (7053), 1025-1029 (2005).</li>
<li>Townsend, D., Daly, M., Chamberlain, J. S., Metzger, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+dystrophin+loss+and+genetic+reconstitution+establish+a+molecular+link+between+dystrophin+and+heart+performance+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Age-dependent dystrophin loss and genetic reconstitution establish a molecular link between dystrophin and heart performance during aging.</a> Mol Ther. 19 (10), 1821-1825 (2011).</li>
<li>Townsend, D., Yasuda, S., McNally, E., Metzger, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+pathophysiological+mechanisms+of+cardiomyopathy+in+hearts+lacking+dystrophin+or+the+sarcoglycan+complex%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Distinct pathophysiological mechanisms of cardiomyopathy in hearts lacking dystrophin or the sarcoglycan complex.</a> FASEB J. 25 (9), 3106-3114 (2011).</li>
<li>Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Bátkai, S., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+cardiac+function+using+pressure-volume+conductance+catheter+technique+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats.</a> Nat Protoc. 3 (9), 1422-1434 (2008).</li>
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<li>Palpant, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+disease+in+mucopolysaccharidosis+type+I+attributed+to+catecholaminergic+and+hemodynamic+deficiencies%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cardiac disease in mucopolysaccharidosis type I attributed to catecholaminergic and hemodynamic deficiencies.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 300 (1), H356-H365 (2011).</li>
<li>Townsend, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diastolic+dysfunction+precedes+hypoxia-induced+mortality+in+dystrophic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rep%22%5BJournal%5D)">Diastolic dysfunction precedes hypoxia-induced mortality in dystrophic mice.</a> Physiol Rep. 3 (8), e12513(2015).</li>
<li>Schmähl, D., Port, R., Wahrendorf, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+dose-response+study+on+urethane+carcinogenesis+in+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">A dose-response study on urethane carcinogenesis in rats and mice.</a> Int J Cancer. 19 (1), 77-80 (1977).</li>
<li>Freeman, G. L., Little, W. C., O'Rourke, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+vasoactive+agents+on+the+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relation+in+closed-chest+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">The effect of vasoactive agents on the left ventricular end-systolic pressure-volume relation in closed-chest dogs.</a> Circulation. 74 (5), 1107-1113 (1986).</li>
<li>Reyes, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancement+of+contractility+with+sustained+afterload+in+the+intact+murine+heart%3A+blunting+of+length-dependent+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Enhancement of contractility with sustained afterload in the intact murine heart: blunting of length-dependent activation.</a> Circulation. 107 (23), 2962-2968 (2003).</li>
<li>Segers, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conductance+catheter-based+assessment+of+arterial+input+impedance%2C+arterial+function%2C+and+ventricular-vascular+interaction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Conductance catheter-based assessment of arterial input impedance, arterial function, and ventricular-vascular interaction in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 288 (3), H1157-H1164 (2005).</li>
<li>Townsend, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+administration+of+membrane+sealant+prevents+severe+cardiac+injury+and+ventricular+dilatation+in+dystrophic+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Chronic administration of membrane sealant prevents severe cardiac injury and ventricular dilatation in dystrophic dogs.</a> J Clin Invest. 120 (4), 1140-1150 (2010).</li>
<li>Sato, T., Shishido, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ESPVR+of+in+situ+rat+left+ventricle+shows+contractility-dependent+curvilinearity%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">ESPVR of in situ rat left ventricle shows contractility-dependent curvilinearity.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 274 (5 Pt 2), H1429-H1434 (1998).</li>
<li>Sunagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+coronary+arterial+pressure+on+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relation+of+isolated+canine+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of coronary arterial pressure on left ventricular end-systolic pressure-volume relation of isolated canine heart.</a> Circ Res. 50 (5), 727-734 (1982).</li>
<li>Cingolani, H. E., Pérez, N. G., Cingolani, O. H., Ennis, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Anrep+effect%3A+100+years+later%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">The Anrep effect: 100 years later.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 304 (2), H175-H182 (2013).</li>
<li>Baan, J., van der Velde, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitivity+of+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relation+to+type+of+loading+intervention+in+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Sensitivity of left ventricular end-systolic pressure-volume relation to type of loading intervention in dogs.</a> Circ Res. 62 (6), 1247-1258 (1988).</li>
<li>Rankin, J. S., Olsen, C. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+airway+pressure+on+cardiac+function+in+intact+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">The effects of airway pressure on cardiac function in intact dogs.</a> Circulation. 66 (1), 108-120 (1982).</li>
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L'autore non ha nulla da rivelare.

Ci sono tre passaggi critici di questa procedura: 1) il posizionamento del tubo endotracheale e ventilazione appropriata, 2) posizionamento del catetere IV giugulare, e 3) il corretto posizionamento del catetere PV nel ventricolo sinistro. Determinare la frequenza respiratoria appropriata è una parte importante di fornire un supporto ventilatorio. topi coscienti generalmente mantengono ventilazione alveolare con rapidi respiri. In generale, i topi ventilati avranno volumi correnti molto più grandi. Pertanto è richiesto ...

Le malattie cardiovascolari continua ad essere una causa importante di mortalità e morbilità in tutto il mondo 1. Malattie del cuore rappresentano sfide particolarmente difficili per lo sviluppo di nuove terapie. I progressi della genetica prevedono la possibilità di identificare una moltitudine di potenziali contributori genetici allo sviluppo di malattie cardiache. La natura integrativa del sistema cardiovascolare richiede che tali obiettivi genetici essere convalidati in modelli animali intatti. I costi genetici flessibilità e bassa abitative del mouse hanno portato alla ribalta per la valutazione del ruolo fisiologico di un dato gene. Le piccole dimensioni del mouse presenta alcune sfide uniche per la valutazione della funzione cardiaca. Ci sono diverse modalità che possono fornire informazioni sulla funzione cardiaca, ma solo la misurazione simultanea della pressione ventricolare e del volume consente pressione-volume (PV) analisi di circuiti della funzione ventricolare. PV loop tuttofunzione cardiaca ow da analizzare indipendente dalla sua connessione al sistema vascolare; un fattore importante nel determinare il ruolo funzionale di un particolare elemento genetico. La valutazione di loop pressione-volume è stato utilizzato sia sperimentalmente e clinicamente per molti anni e vasta letteratura esiste per quanto riguarda l&#39;analisi di questi insiemi di dati 2,3. L&#39;adattamento della tecnologia a circuito FV al mouse è un avanzamento importante per la comprensione della fisiologia cardiaca murino 4-6. Catetere basato tecniche dei circuiti PV coppia un trasduttore di pressione e l&#39;uso di conduttanza di stimare il volume ventricolare. Il volume ventricolare viene determinata esaminando le variazioni di un campo elettrico generato dal catetere. Questo metodo modelli ventricolo come un cilindro, la cui altezza è definita dalla distanza tra gli elettrodi sul catetere e il raggio è calcolato per conduzione di un campo elettrico attraverso il sangueil ventricolo 7-9. Il segnale conduttanza misurata dal catetere presenta due componenti. La prima è la conduzione attraverso il sangue; questo varia con il volume del ventricolo e costituisce il segnale principale utilizzato per determinare il volume ventricolare. Il secondo componente risulta dalla conduzione attraverso e lungo la parete del ventricolo. Questo è chiamato conduttanza parallelo e deve essere rimosso al fine di determinare il volume ventricolare assoluto. Ci sono due sistemi commercialmente disponibili per la raccolta di dati pressione-volume nel laboratorio di ricerca e il metodo utilizzato per calcolare e rimuovere la conduttanza parallelo è la differenza principale tra loro 6,10,11. cateteri conduttanza richiedono l&#39;iniezione di soluzione salina ipertonica per il calcolo della conduttanza parallelo. Questa iniezione cambia transitoriamente la conducibilità del sangue nel ventricolo, mentre la conducibilità della parete rimane costante. Da questi dati è possibile determinare lacomponente del segnale conduttanza che proviene dal sangue e ciò deriva dalla parete ventricolare. Questo approccio presuppone che conduttanza parallelo non varia durante il ciclo cardiaco. Il metodo ammissione si basa su cambiamenti di fase nel campo elettrico di valutare il contributo della parete ventricolare al segnale complessivo volume. Questo metodo si basa su una serie di costanti predeterminate per la conducibilità del sangue e miocardio per determinare il volume finale, ma rende misure continue di conduttanza parallelo durante il ciclo cardiaco. Entrambi questi sistemi forniscono buone stime del volume ventricolare sinistro e le differenze tra loro non sono suscettibili di essere fisiologicamente significativo. Il modello cilindrico del ventricolo e altre ipotesi rendono questi approcci catetere a base non è accurato come altre modalità, ma questa tecnica è fornita su base battito-per-battito che è essenziale per la valutazione del carico misure indipendenti della funzione cardiaca. La procedura descritta qui è usato nel mio laboratorio e ha fornito dati per un gran numero di studi che esaminano i meccanismi fisiopatologici fondamentali di distrofica cardiomiopatia 12-18. La procedura descritta di seguito è uno dei due che può essere utilizzato per ottenere dati di loop PV. Mentre molti dei principi sono applicabili per entrambi gli approcci, questo protocollo si concentrerà su un approccio apicale open-petto; un protocollo torace chiuso è stato dettagliato altrove 19,20. Mentre la procedura verrà descritta in dettaglio, gli importanti principi generali sono per esporre il cuore con danneggiamento minimo sia il cuore o polmoni. Durante il protocollo è importante ricordare che questa è una procedura non-sopravvivenza e che avere una buona esposizione del cuore è criticamente importante per il corretto posizionamento del catetere.

<table><tbody><tr><td>Dumont 5/45 (2)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-33</td><td></td></tr><tr><td>Pinze dilatatrici per vasi Strumenti per</td> scienze <td>fini</td><td>18153-11</td><td></td></tr><tr><td>Forbice a molla per micro dissezione Castroviejo</td><td>Roboz Instruments</td><td>RS-5668</td><td></td></tr><tr><td>Pinze ottagonali - Seghettate/curve</td><td>Strumenti per le scienze fini</td><td>11041-08</td><td></td></tr><tr><td>Pinze ottagonali - Seghettate/Dritte</td><td>Fine Strumenti scientifici</td><td>11040-08</td><td></td></tr><tr><td>Forbici per dissettore - Lama pesante</td><td>Strumenti per la scienza fine</td><td>14082-09</td><td></td></tr><tr><td>Nastro chirurgico per traspore</td><td>3M</td><td>1527-1</td><td></td></tr><tr><td>3-0 Sutura in seta</td><td>Strumenti per la scienza fine</td><td>18020-30</td><td></td></tr><tr><td>Ventilatore TOPO</td><td>Kent Scientific</td><td>TOPO</td><td></td></tr><tr><td>Martin ME 102 Unità elettrochirurgica</td><td>Apparecchio</td> <td>HarvardPY2 72-2484</td><td></td></tr><tr><td>Pompa a siringa</td><td>Lucca Technologies</td><td>Stereomicroscopio GenieTouch</td><td></td></tr><tr><td>con supporto a braccio</td><td>Nikon</td><td>SMZ-800N</td><td></td></tr><tr><td>Termometro a termocoppia</td><td>Cole Parmer</td><td>EW-91100-40</td><td></td></tr><tr><td>T/Pump Ricircolatore d'acqua calda</td><td>Kent Scientific</td><td>TP-700</td><td></td></tr><tr><td>ADVantage Sistema pressione-volume</td><td>Transonic</td><td>ADV500</td><td></td></tr><tr><td>Acquisizione e Analisi Dati</td><td>DSI</td><td>Ponemah ACQ-16</td><td></td></tr></tbody></table>

misurazione loops volume pressione nel mouse

Measuring Pressure Volume Loops in the Mouse

Comprendere le cause e la progressione della malattia di cuore rappresenta una sfida significativa per la comunità biomedica. La flessibilità genetica del mouse fornisce un grande potenziale per esplorare funzione cardiaca a livello molecolare. Le ridotte dimensioni del mouse non presentare alcune sfide per quanto riguarda l&#39;esecuzione di fenotipizzazione cardiaca dettagliata. La miniaturizzazione e altri avanzamenti nella tecnologia hanno fatto molti metodi di valutazione cardiaca possibile nel topo. Di questi, la raccolta simultanea di dati di pressione e di volume fornisce un quadro dettagliato della funzione cardiaca che non è disponibile attraverso qualsiasi altra modalità. Qui una procedura dettagliata per la raccolta di pressione-volume di dati loop è descritto. Incluso è una discussione dei principi alla base delle misure e le potenziali fonti di errore. anestesiologico e approcci chirurgici sono discusse in dettaglio in quanto sono entrambi fondamentali per ottenere la misura emodinamica di alta qualitàS. I principi dello sviluppo protocollo emodinamica e gli aspetti rilevanti di analisi dei dati sono anche indirizzati.

Per convenzione, volume viene tracciata sull&#39;asse X e la pressione sul l&#39;asse Y come in Figura 1. I cicli di pressione-volume risultanti dalla pressione tramato contro di volume deve essere simile a un rettangolo, i bordi verticali rappresentano variazioni isovolumic di pressione (vale a dire, quando entrambi valvole mitrale e aortica sono chiusi). Il orizzontale inferiore rappresenta riempimento ventricolare attraverso la valvola mitrale e la p...

Questo manoscritto descrive un protocollo dettagliato per la raccolta di dati pressione-volume dal mouse.

Misurazione Loops Volume Pressione nel mouse

Understanding the causes and progression of heart disease presents a significant challenge to the biomedical community. The genetic flexibility of the ...

L'obiettivo generale della misurazione dei loop pressione-volume nel topo è ottenere una valutazione dettagliata della funzione cardiaca. Questo metodo è utile per la caratterizzazione fisiologica di topi portatori di specifiche manipolazioni genetiche, che a loro volta possono fornire informazioni sul ruolo di proteine specifiche nella funzione cardiaca. Il principale vantaggio di questa tecnica è che fornisce una valutazione dettagliata della funzione contrattile non disponibile attraverso altre metodologie.Una volta preparato il topo per l'intervento chirurgico, iniziare praticando un'incisione alla fossetta sternale, estendendola da circa cinque millimetri a destra della linea mediana fino a circa cinque millimetri a sinistra della linea mediana. Eseguire una seconda incisione lungo il margine destro della prima, in senso rostrale, fino a circa due millimetri sotto l'estremità della mandibola. Procedere quindi con una terza incisione, estendendola dall'estremità rostrale della seconda incisione fino a circa cinque millimetri a destra della linea mediana.E ritrarre il lembo cutaneo risultante verso destra per esporre i tessuti sottostanti. Successivamente, sotto un microscopio stereoscopico, dissezionare in modo ottuso le ghiandole salivari parotidee e sottomandibolari lungo la linea mediana per esporre la muscolatura sottostante che ricopre la trachea. Poi separare in modo ottuso i muscoli sternoioidei destro e sinistro.Quando la trachea è visibile, passare un pezzo di 10 cm di sutura in seta tre-zero sotto il tessuto della gola, avendo cura di non includere l'esofago. Utilizzando un ago da 20 gauge, praticare un'incisione ampia nell'intervallo appena caudale alla laringe, prima del primo anello tracheale. Rimuovere quindi immediatamente la maschera anestetica dall'animale ed inserire con attenzione il tubo endotracheale nella trachea.Dopo aver fissato il tubo, estendere il margine sinistro dell'incisione cutanea originale fino al processo xifoideo e attraverso la linea mediana a circa un punto cinque centimetri a destra della linea mediana. Successivamente, utilizzare una dissezione ottusa per retrarre lateralmente il lembo cutaneo, esponendo la muscolatura sottostante. Utilizzare quindi pinze dilatanti per vasi per isolare l'inserzione del gran pettorale sul lato destro, in prossimità dell'aspetto costale dello sterno.Cauteizzare e tagliare il muscolo. Quindi tagliare il muscolo gran pettorale lungo il suo inserimento sullo sterno. E dissezionare al di sotto il muscolo gran dorsale dallo stesso lato.Ritrarre la parte tagliata in direzione craniale per esporre le costole. Utilizzare una pinza affilata per dissezionare con attenzione attraverso i diversi strati muscolari intercostali fino a entrare nella cavità toracica. Una volta aperto lo spazio pleurico, inserire con cura i dilatatori vascolari a punta smussata e sollevare la parete toracica esercitando una leggera forza verso l'alto.Ora, effettuare un'incisione laterale lungo i muscoli intercostali avendo cura di non tagliare il lobo polmonare ed estendere l'incisione in direzione mediale, mantenendosi a tre o quattro millimetri lateralmente rispetto alla linea mediana per evitare l'arteria mammaria interna che corre parallela allo sterno. Quindi inserire attraverso l'incisione verso la linea mediana un piccolo applicatore di cotone imbevuto di soluzione salina ed esercitare una leggera trazione verso l'alto per sollevare la parete toracica dalle strutture sottostanti. Utilizzare con attenzione un bisturi elettrico per tagliare la parete toracica, partendo dal margine mediale dell'incisione e terminando circa un centimetro lateralmente rispetto alla linea mediana sul lato sinistro.Dopo aver cauterizzato accuratamente il tessuto, utilizzare le forbici per tagliare con attenzione lo sterno. L'apice del cuore dovrebbe essere chiaramente visibile. Successivamente, mediante dissezione ottusa, interrompere il pericardio e identificare la vena cava caudale.Per posizionare il catetere nella vena giugulare, orientare un catetere con ago da 30 gauge collegato a una siringa contenente albumina al dieci percento in modo che l'ago si appoggi da solo sulla vena giugulare, con la faccia smussata rivolta verso l'alto. Per visualizzare la vena giugulare, afferrare l'ago con pinze emostatiche in una mano e retrarre la ghiandola salivare con pinze per tessuti nell'altra. Applicare una trazione delicata ai tessuti circostanti la vena giugulare per creare tensione sulla parete del vaso.Quindi, utilizzando un angolo di inserzione basso, inserire con attenzione l'ago nella vena e avanzare la punta di tre o quattro millimetri all'interno del vaso. Quando il catetere è in posizione, fissare l'ago alle ghiandole salivari sottostanti utilizzando colla chirurgica e iniziare a infondere la soluzione di albumina. Per posizionare il catetere pressione-volume, posizionare innanzitutto una siringa contenente soluzione salina equilibrata e il catetere pressione-volume accanto al topo, con la punta del catetere all'incirca alla stessa altezza del cuore, quindi azzerare la lettura della pressione.Successivamente, utilizzando un piccolo applicatore di cotone imbevuto di soluzione salina, posizionare il cuore in modo da visualizzare l'apice ed eseguire un'incisione pungente con un ago da 25 gauge il più vicino possibile al centro dell'apice. Dopo aver rimosso l'ago, inserire rapidamente ma delicatamente il catetere attraverso l'incisione. A questo punto è possibile misurare i loop pressione-volume del ventricolo.Dopo il posizionamento del catetere, ridurre l'anestesia per evidenziare gli effetti cardio-depressivi che l'anestesia potrebbe avere. Se si è verificata una perdita ematica eccessiva durante la procedura, è possibile aumentare semplicemente il volume di albumina infusa. Per convenzione, il volume viene riportato sull'asse X e la pressione sull'asse y.I loop pressione-volume risultanti dalla rappresentazione della pressione in funzione del volume dovrebbero assomigliare a un rettangolo, con i bordi verticali che rappresentano le variazioni isovolumiche della pressione. Il lato orizzontale inferiore rappresenta il riempimento ventricolare attraverso la valvola mitrale, mentre il lato orizzontale superiore rappresenta lo svuotamento ventricolare attraverso la valvola aortica. In un topo sano di tipo selvatico, ci si aspetta pressioni del ventricolo sinistro comprese tra 90 e 110 millimetri di mercurio, con una velocità massima della derivata massima della pressione compresa tra 8000 e 12000 millimetri di mercurio al secondo.Inoltre, uno degli artefatti di misurazione più comuni che può complicare l'analisi dei dati di volume pressorio è l'incuneamento del catetere, evidente come un picco di pressione alla fine della sistole, probabilmente causato dalla compressione diretta del trasduttore di pressione da parte di un muscolo papillare o di un'altra struttura dinamica all'interno del ventricolo. Durante l'esecuzione di questa procedura, è importante ricordare di monitorare continuamente il topo per garantire un'adeguata profondità anestetica. Una volta acquisita padronanza, questa tecnica può essere completata in circa un'ora, a seconda del protocollo utilizzato, dopo il posizionamento del catetere.Al termine di questa procedura, le infusioni di composti sperimentali possono essere utilizzate per valutarne gli effetti sulla funzione cardiaca. Dopo aver visto questo video, si dovrebbe avere una buona comprensione di come posizionare chirurgicamente un catetere pressione-volume nel ventricolo sinistro del topo e ottenere tracciati pressione-volume di alta qualità per l'analisi cardiaca.

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