Isolamento e caratterizzazione di singole cellule da embrioni di zebrafish

L'obiettivo generale di questo esperimento è isolare singole cellule da embrioni di zebrafish in fase iniziale per la loro cattura in un sistema multiplex a singola cellula basato su microfluidica per valutare l'espressione genica delle singole cellule. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della biologia dello sviluppo, come ad esempio quali cambiamenti trascrizionali subiscono le cellule durante la specificazione e la differenziazione. Il vantaggio principale di questa tecnica è che si tratta di un approccio imparziale per rivelare l'eterogeneità che viene mascherata nelle tecniche convenzionali basate sulla popolazione.

In generale, gli individui che non conoscono questa tecnica avranno difficoltà perché generare le preparazioni vitali di singole cellule è tecnicamente impegnativo ma essenziale per l'analisi a valle. Una volta padroneggiato, l'elaborazione dei campioni di embrione intero in singole cellule lisate su un chip microfluidico integrato può essere completata in sei ore se i passaggi vengono eseguiti correttamente. Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordare di assicurarsi che solo le singole cellule vengano catturate sul dispositivo microfluidico.