Name: Modello murino di ischemia-riperfusione intestinale Injury (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-05-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 7 s
Description: Impara a indurre lesione da ischemia-riperfusione intestinale nel topo mediante occlusione temporanea dell'arteria mesenterica superiore. Questo metodo riproducibile consente di studiare i meccanismi cellulari e molecolari del danno e della rigenerazione tissutale in gastroenterologia e immunologia.

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Questo lavoro è stato sostenuto dal russo Science Foundation, concessione n. 14-50-00060 e LLC RUSCHEMBIO. Questo lavoro è stato sostenuto anche dal Crohn e Colite Foundation of America concedere 294.083 (a AVT), e dal NIH concedere RO1 DK47700 (CJ).

Gli studi sugli animali sono stati eseguiti in accordo con l&#39;Istituto Nazionale di Salute e linee guida sono state approvate dalla cura degli animali Istituzionale e utilizzare Comitato dell&#39;Istituto Trudeau. 8-12 settimane di età topi C57BL / 6 sono stati utilizzati per lo studio. 1. Preparazione per la chirurgia <ol><li> Preparare e sterilizzare gli strumenti chirurgici. </li><li> Preparare il sistema di anestesia isoflurano-based con cono, e pad riscaldata. Assicurarsi pad riscaldata non è surriscaldato (&lt;39 ° C). </li><li> Assicurarsi che il isoflurano evacuazione dei gas filtro viene posizionato correttamente a garantire le luci di scarico sul fondo del contenitore non sono bloccati o occlusa in alcun modo. Pesare gas scavenging bomboletta prima procedura e il peso documento sul contenitore. Eliminare il contenitore quando il peso contenitore supera i 50 g di peso accumulato (~ 12 ore). </li></ol> 2. Anestesia <ol><li> Anestetizzare mouse con 3% isoflurano in una camera di induzione (1 L / minO 2). <ol><li> Valutare profondità dell&#39;anestesia da una incapacità di rimanere in posizione verticale, perdita di movimento intenzionale volontaria, la perdita del riflesso corneale, rilassamento muscolare, e la perdita di risposta alla stimolazione reflex (punta o la coda pizzico con pressione costante). </li><li> Valutare la frequenza respiratoria e il modello osservando parete toracica e addominale movimenti. In anestesia ottimale, la frequenza respiratoria dovrebbe essere ~ 55-65 respiri al minuto. </li><li> Rimuovere mouse dalla camera di induzione e radere rapidamente l&#39;area addome del mouse. </li></ol></li><li> Per prevenire l&#39;essiccamento della cornea, posizionare blanda pomata oftalmica negli occhi. </li><li> Posizionare il mouse sul tappetino riscaldato e collegarlo tramite cono di sistema di anestesia. Assicurarsi membrana cono lattice naso si inserisce saldamente sopra la testa del mouse e non vi è alcuna perdita di isoflurano. </li><li> Ridurre tasso isoflurano al 1,5%, e iniettare buprenorfina (0,1 mg / kg) e ketamina (10 mg / kg) per via sottocutanea per impedire avvolgimento del dolore in cascata. </li><li> pulire °e pelle della zona operazione con un tampone di cotone sterile imbevuto di soluzione chirurgica Betadine seguita da etanolo al 70%. </li></ol> 3. Chirurgia <ol><li> Fare un cm laparotomia linea mediana 3-5 con le forbici di funzionamento. zona di operazione di copertura con tampone non aderente sterili inumidito con soluzione fisiologica. Isolare cieco e ileo ed esporre l&#39;arteria mesenterica superiore utilizzando tamponi di cotone inumidito con soluzione salina. </li><li> Per facilitare l&#39;applicazione di clip, fare piccole incisioni nel mesentere circostante l&#39;arteria mesenterica superiore con iris belle scissors.To fare questo, alzare delicatamente l&#39;intestino con una pinza medicazione e tagliare mesentery su entrambi i lati dell&#39;arteria mesenterica superiore alla posizione clip desiderata (Figura 1A). Quindi, aggiungere alcune gocce di soluzione salina sterile per l&#39;area di posizione della clip desiderata prima di applicare clip. Nota: per eseguire l&#39;intervento chirurgico farsa, seguire la procedura chirurgica fino al punto 3.2. Non applicare clip. Invece, mantenere il tessuto umido con aggiunta s caldoaline come descritto nel 3,6 per 1 ora. In seguito, passare al punto 4.1, </li><li> Occlude i primi rami ordine dell&#39;arteria mesenterica superiore con clip microvascolari (70 g forza) utilizzando una clip applicatore per creare una regione 5-7 cm dell&#39;ileo ischemico adiacente cieco (Figura 1B). Anche se la posizione dei vasi è conservatore, ci potrebbero essere lievi differenze tra i topi (vedere esempi nella Figura 1). Pertanto, 2 o 3 clip sono solitamente richiesti (vedi la posizione dei clip su figura 1A, D, E, frecce nere). Nota: utilizzare clip del vaso di alta qualità. clip ad alta pressione può danneggiare i vasi e prevenire la rigenerazione mentre clip a bassa pressione (&lt;30 g) non possono bloccare completamente il flusso di sangue. </li><li> Bloccare il flusso di sangue attraverso l&#39;intestino collaterale utilizzando due clip microvascolari tutti navi (40 g forza), demarking regione dell&#39;intestino ischemico (Figura 1). L&#39;occlusione dei vasi collaterali è necessario perevitare afflusso di sangue dai vasi sanguigni adiacenti (vedi la posizione dei clip su figura 1A, D, E, frecce verdi). </li><li> Opzionale: Aggiungere la soluzione di eparina (6 USP unità / ml), per prevenire la coagulazione del sangue. Gocciolata aggiungere 0,5 ml di soluzione di eparina per l&#39;intestino isolato. </li><li> Wet pad non aderente salviettine delicate sterili con soluzione salina pre-riscaldato a 37 ° C e si applicano a zona chirurgica. Assicurarsi che salviettine rimane umido durante l&#39;intera procedura. </li><li> Mantenere ischemia per 60 min usando 1-1,5% anestesia isoflurano in tutto. Se la procedura ischemia è eseguita correttamente, la regione ischemica cambia in vino rosso in colore in circa 30 min. Si noti che i vasi sanguigni distali alla posizione della clip sono ingrandite durante l&#39;ischemia (figura 1, pannelli di destra) che indica l&#39;occlusione di successo. </li><li> Seguire da vicino il mouse durante la fase di ischemia. Continuare ad applicare soluzione salina per il pad non aderente che copre il sito chirurgico. </li><li> marchioi bordi della zona ischemica pipettando 20 ml di Gill`s 3 ematossilina sul tessuto per agevolare la raccolta del tessuto ischemico e tessuto sano adiacente dal medesimo mouse per il confronto (Figura 1E, pannello di destra). </li></ol> 4. Fase riperfusione <ol><li> Alla fine della ischemia aggiungere qualche goccia di soluzione salina sull&#39;area fermaglio e rimuovere delicatamente clip microvascolari con clip applicatore. Poi, spingere delicatamente l&#39;intestino torna alla cavità addominale con punte di cotone inumidito saline. Rimuovere pad non aderente e chiudere la parete addominale e la pelle con 9 mm in acciaio inox clip ferita. Se riperfusione viene eseguita più di 3 ore, utilizzare una sutura Vicryl assorbibile per chiudere la parete addominale prima di applicare clip ferita sulla pelle. </li><li> Mantenere topi in una gabbia pulita riscaldata per tempo desiderato (30 min, 60 min, 120 min, o 180 min) per la fase di riperfusione. </li><li> Controllare gli animali, almeno ogni 30 min per assicurare la stabilità. </li></ol><pclass = &quot;jove_title&quot;&gt; 5. Necroscopia e raccolta dell&#39;intestino tenue <ol><li> Euthanize topi da CO 2 overdose seguita da dislocazione cervicale al momento desiderato seguendo riperfusione. </li><li> Aprire cavità addominale e raccogliere il tessuto intestinale ischemico per ulteriori analisi. Harvest sano tessuto normale adiacente al tessuto danneggiato come controllo interno per tenere conto di qualsiasi reazione sistemica di un infortunio. Nota: Questo controllo è più appropriato rispetto alla farsa topi di controllo operato perché i topi sham operato non subiscono una reazione sistemica al danno IR-indotta. </li><li> Lavare contenuto intestinale con 30 ml siringa con l&#39;ago collegato sonda gastrica riempito di soluzione salina e poi tagliare l&#39;intestino in senso longitudinale. Se è richiesto un campione di intestino per l&#39;analisi di espressione genica, tagliare un frammento di 1,5 millimetri longitudinalmente, e utilizzare il pezzo rimanente per l&#39;analisi istologica. </li><li> Per l&#39;analisi istologica, preparare un rotolo svizzero con un paio di pinze a rotolare la intestine. </li><li> Per mantenere la forma arrotolata, posizionare i pezzi di intestino tra imbottiture biopsia in cassette di tessuto (Figura 2). Mettere le cassette in 10% formalina tamponata. </li><li> Fix tessuto in formalina per almeno 24 ore. Sostituire formalina con il 70% di etanolo per altre 24 ore. Conservare tessuto in 70% di etanolo indefinitamente a temperatura ambiente. </li><li> Incorporare in paraffina, taglio 5 sezioni micron e macchia con ematossilina ed eosina utilizzando un protocollo standard (Figura 3). </li></ol> 6. punteggio <ol><li> Punteggio ottenuto il murino danno da ischemia-riperfusione come riassunto nella tabella 2. Scegliere un metodo di punteggio appropriato. </li><li> Opzionale: Dividere il campo visivo in quattro sezioni poiché la gravità del danno varia in tutta la sezione. </li><li> Calcolare la media di ogni sezione da punteggi ottenuti alla cieca. </li><li> Confrontare il grado del tessuto danneggiato tra casi e di controllo nonché di the indenne tessuto utilizzando un test di Kruskal-Wallis, seguito dal test di confronto multiplo di un Dunn. </li></ol>

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</ol>

Gli autori dichiarano di non avere conflitti di interesse

Lo sviluppo di modelli murini di intestinale lesioni IR hanno notevolmente migliorato la comprensione dei meccanismi di danno tissutale e aiutato nello sviluppo di potenziali strategie terapeutiche per ridurre al minimo i danni ai tessuti 7,9,11,34. I passaggi critici di questo protocollo sono il corretto posizionamento delle clip microvascolari, corretta tempistica della valutazione ischemia e propria istologica di lesioni IR. La durata di ischemia è fondamentale per la successiv...

L&#39;intestino è molto sensibile alla interruzione del flusso di sangue che provoca ischemia e epiteliale danni. Riperfusione dopo ischemia fornisce ri-ossigenazione dei tessuti, e può promuovere ulteriormente la patologia. Pertanto, intestinale danno da ischemia e riperfusione è associata ad una vasta gamma di patologie, tra cui enterocolite necrotizzante, il rigetto nel trapianto di intestino tenue, complicanze della chirurgia addominale aneurisma aortico, bypass cardiopolmonare, e infiammatoria cronica dell&#39;intestino 1,2. Lesioni intestinali IR, ischemia mesenterica particolarmente acuta, è una condizione di pericolo di vita con conseguente morbilità e mortalità 3. Anche se poco conosciuta, intestinale ischemia-riperfusione (IR) danno è pensato per essere associate a cambiamenti nella flora intestinale, nonché la produzione di specie reattive dell&#39;ossigeno e citochine infiammatorie e chemochine 1,4-6. Questo porta alla attivazione sia inNate e meccanismi immunitari adattivi che promuovono l&#39;infiammazione dei tessuti e lesioni 1,7,8. I modelli animali sono fondamentali per la comprensione dei meccanismi di danno IR, in quanto consentono un facile guadagno-e la perdita-di-funzione di esperimenti genetici. Diversi modelli animali di IR sono state sviluppate che includono occlusione vascolare completo, a basso flusso ischemia, e segmentato occlusione vascolare (riassunto in una recente revisione globale 9). Ischemia intestinale causata da occlusione vascolare completa di mesenterica superiore (SMA) è un modello semplice e comunemente usato di IR in grandi animali e roditori 9-11. Tuttavia, diverse aree del intestino hanno diversa suscettibilità al danno. Inoltre, la vasta gamma di anestetici, analgesici, tecniche di occlusione, così come incoerenza nella durata del danno ischemico e risultato del recupero in gradi variabili di danno confondendo la nostra comprensione della biologia di IR attraverso Studie multiplas. La tabella 1 mostra queste incongruenze negli studi IR murini. Il più grande svantaggio di utilizzare i tempi d&#39;ischemia più brevi (30-45 minuti) si rivolge la finestra di recupero su cui possono essere osservate differenze discernibili tra casi e controlli. lieve lesione all&#39;epitelio può essere risolto un&#39;ora dopo riperfusione, quindi specializzata metriche patologiche possono essere necessari per trovare le differenze di restituzione epiteliale. Al contrario, danni eccessivi, come visto da 100 min di lesione ischemica può comportare la denudement completa dell&#39;epitelio, qualora la restituzione non è più possibile, aumentare il tasso di mortalità, e tempo di recupero. Pertanto, qui si descrive la procedura dettagliata di IR intestinale nei topi che causa ferite riproducibili senza la mortalità per favorire la standardizzazione di questa tecnica in tutto il nostro campo. Questo modello di lesione intestinale IR può essere utilizzato per studiare i meccanismi cellulari e molecolari di lesioni e di rigenerazione.

<table><tbody><tr><td>Pad riscaldato</td><td>Sunbeam</td><td>E12107-819</td><td>Alternativa: Braintree Scientific Pad riscaldato</td></tr><tr><td>Macchina per anestesia da ricerca da tavolo</td><td>Vasco</td><td>UCAP 0001-0000171</td><td>Alternativa: Parkland Scientific, V3000PS</td></tr><tr><td>Nose Cone</td><td>Parkland Scientific</td><td>ARES500</td><td></td></tr><tr><td>Contenitore per scavenger e cartuccia di ricambio</td><td>Parkland Scientific</td><td>80000, 80120</td><td></td></tr><tr><td>Camera di induzione</td><td>Surgivet</td><td>V711802</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Piramal Healthcare</td><td>NDC 66794-013-10</td><td>Sostanza controllata, contattare IACUC</td></tr><tr><td>Animal clipper&nbsp;</td><td>Oster&nbsp;</td><td>Oster Golden A5 078005-050-003</td><td></td></tr><tr><td>Unguento oftalmico</td><td>Webster</td><td>8804604</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>McKesson</td><td>562766</td><td>Sostanza controllata, contattare IACUC</td></tr><tr><td>Ketaset (Ketamina HCl)</td> <td>Pfizer</td><td>NADA 45-290</td><td>Sostanza controllata, contattare IACUC</td></tr><tr><td>Cotton</td><td>tips Prodotti medici puritani</td><td>806-WC</td><td>Autoclave prima dell'uso</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Purdue Products</td><td>67618-150-17</td><td>10% Povidone-Iodio</td></tr><tr><td>Soluzione salina sterile</td><td>Aspen</td><td>46066-807-60</td><td>Regolare a temperatura ambiente prima dell'uso</td></tr><tr><td>Termometro IR per roditori</td><td>BIOSEB</td><td>BIO-IRB153</td><td></td></tr><tr><td>Micro clip vascolari, 70 g</td><td>Roboz Surgical&nbsp;</td><td>RS5424, RS5435</td><td>Alternativa: WPI 14121, per occlusione SMA</td></tr><tr><td>Clip micro vascolari, 40 g</td><td>Roboz Surgical</td><td>RS6472</td><td>Alternativa: WPI 14120, per occlusione di vasi collaterali</td></tr><tr><td>Clip applicazione pinza</td><td>World Precision Instruments</td><td>14189</td><td>Alternativa: Roboz #RS-5410 o #RS-5440</td></tr><tr><td>Gill's 3 ematossilina</td><td>Thermo Scientific</td><td>14-390-17</td><td></td></tr><tr><td>Graffe chirurgiche, Reflex 9 mm</td><td>Cell Point Scientific</td><td>201-1000</td><td></td></tr><tr><td>Applicatore</td><td>Autoclip Beckton Dickinson</td><td>427630</td><td></td></tr><tr><td>Tampone in schiuma Byopsy</td><td>Simport</td><td>M476-1</td><td></td></tr><tr><td>Cassetta per tessuti</td><td>Fisher Healthcare</td><td>15182701A</td><td>Histosette II combinazione di coperchio e base</td></tr><tr><td>10% formalina tamponata</td><td>Fisher Scientific</td><td>245-684</td><td></td></tr><tr><td>Forbici chirurgiche per iride</td><td>World Precision Instruments</td><td>501263-G SC</td><td>Alternativa: Roboz RS6816</td></tr><tr><td>Forbici operative</td><td>World Precision Instruments</td><td>501219-G</td><td>Alternativa: Roboz RS6814</td></tr><tr><td>Pinza per medicazione</td><td>Roboz Surgical</td><td>RS-5228, RS-8122</td><td>Alternativa: World Precision Instruments 1519-G</td></tr><tr><td>Eparina, senza endotossine, 300 unità USP/fiala, 50 mg</td><td>Sigma</td><td>2106</td><td></td></tr><tr><td>Clip per ferita riflessa per la rimozione delle pinze</td><td>Roboz Surgical</td><td>RS-9263</td><td>Alternativa: World Precision Instruments: 500347</td></tr><tr><td>Mice C57BL / 6J mouse</td><td>Jackson Laboratory</td><td>Codice 0664</td><td></td></tr><tr><td>Medicazioni non aderenti Telfa, 3 x 4, sterili</td><td>Coviden</td><td>1050</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand Pipette di trasferimento</td><td>Fischer Scientific</td><td>13-711-5AM</td><td>Utilizzare le pipette per aggiungere soluzione salina a goccia</td></tr></tbody></table>

modello murino di ischemia-riperfusione intestinale injury

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

ischemia intestinale è una condizione pericolosa per la vita associata con una vasta gamma di condizioni cliniche, tra cui l&#39;aterosclerosi, trombosi, ipotensione, enterocolite necrotizzante, il trapianto di intestino, traumi e l&#39;infiammazione cronica. Intestinal ischemia-riperfusione (IR) infortunio è una conseguenza di ischemia mesenterica acuta, causata dal flusso sanguigno insufficiente attraverso i vasi mesenterici, causando danni intestinali. Riperfusione dopo ischemia può esacerbare ulteriori danni dell&#39;intestino. I meccanismi di danno IR sono complessi e poco conosciuta. Pertanto, modelli sperimentali piccoli animali sono fondamentali per comprendere la fisiopatologia di lesioni IR e lo sviluppo di nuove terapie. Qui si descrive un modello murino di danno IR intestinale acuta che fornisce lesioni riproducibili del piccolo intestino, senza mortalità. Ciò si ottiene ischemia inducendo nella regione dell&#39;ileo distale temporalmente occludinag i rami collaterali periferici e terminali dell&#39;arteria mesenterica superiore per 60 minuti utilizzando clip microvascolari. Riperfusione per 1 ora, o 2 ore dopo i risultati di lesioni a danno riproducibile dell&#39;intestino esaminato da analisi istologica. La corretta posizione delle clip microvascolari è fondamentale per la procedura. Pertanto, il video clip fornisce una dettagliata descrizione visiva step-by-step di questa tecnica. Questo modello di lesione intestinale IR può essere utilizzato per studiare i meccanismi cellulari e molecolari di lesioni e di rigenerazione.

Abbiamo ottimizzato il protocollo sperimentale di chirurgia IR avere riproducibile lesioni IR indotta dell&#39;ileo nei topi. I risultati rappresentativi sono dimostrati in questa sezione. La Figura 1 mostra alcuni esempi di posizione clip microvascolari per indurre ischemia dell&#39;ileo. frecce nere indicano la posizione dei principali clip occlusione primi rami ordine di mesenterica superiore. Le frecce ver...

Qui si descrive la procedura dettagliata di intestinale ischemia-riperfusione nei topi che causa ferite riproducibili senza la mortalità per favorire la standardizzazione di questa tecnica in tutto il campo. Questo modello di intestinale danno da ischemia-riperfusione può essere utilizzato per studiare i meccanismi cellulari e molecolari di lesioni e di rigenerazione.

Modello murino di ischemia-riperfusione intestinale Injury

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

L'obiettivo generale di questa procedura è eseguire un danno da ischemia-riperfusione intestinale riproducibile nella regione dell'ileo distale del topo, occludendo temporaneamente i rami collaterali periferici e terminali dell'arteria mesenterica superiore. Questo metodo può contribuire a comprendere metodi di base nel campo della gastroenterologia e dell'immunologia, come ad esempio il meccanismo del danno e della rigenerazione della patella. Il vantaggio di questa tecnica è che può essere eseguita da qualsiasi persona opportunamente formata in laboratorio.Un altro vantaggio è che la procedura stessa non provoca mortalità nei topi. Preparare il sito chirurgico come specificato nel protocollo testuale. Successivamente, utilizzare forbici chirurgiche per eseguire una laparotomia mediana di tre a cinque centimetri.Quindi coprire l'area chirurgica con un cerotto sterile non aderente inumidito con soluzione fisiologica. Isolare il ceco e l'ilione, e utilizzare bastoncini di cotone inumiditi con soluzione fisiologica per esporre l'arteria mesenterica superiore. Successivamente, per facilitare l'applicazione della clip, utilizzare pinze da trazione per sollevare delicatamente l'intestin

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Trauma chirurgico induce una risposta infiammatoria. Citochine e ligandi endogeni sono noti per modulare dimensione miocardio a seguito di ischemia e riperfusione. Vi presentiamo una versione modificata del chiuso petto modello di ischemia e di riperfusione murino con pesi appesi per minimizzare gli effetti di toracotomia.

A Murine chiuso del torace modello di ischemia miocardica e riperfusione

Si introduce un metodo chirurgico per indurre sperimentale ischemia / riperfusione (I / R) pregiudizio per simulare infarto del miocardio (MI) in modelli murini che consente una maggiore chiarezza posizionamento della legatura sulla discendente anteriore sinistra (LAD) per migliorare la riproducibilità di esperimenti MI nei topi.

Un modello murino di ischemia miocardica e riperfusione lesioni da legatura della arteria discendente anteriore sinistra

Questo protocollo consentirà ai lettori di stabilire con successo un modello porcino di ischemia intestinale segmentale e successivamente isolare e coltura di cellule staminali intestinali per lo studio della riparazione epiteliale dopo la lesione.

Isolamento delle cellule staminali intestinale e cultura in un modello porcino di segmentale piccola Ischemia intestinale

Un modello murino di ischemia-riperfusione cerebrale è istituito per studiare la patofisiologia del colpo. Abbiamo distalmente legare l'arteria cerebrale centrale di destra e l'arteria carotica comune di destra e ripristinare il flusso sanguigno dopo 10 o 40 min di ischemia.

Occlusione del vaso due Mouse modello di Ischemia-riperfusione cerebrale

Qui descriviamo una procedura chirurgica che mostra come ottenere una legatura permanente dell'arteria coronaria discendente sinistra-anteriore nei topi. Questo modello è di grande rilevanza per studiare la fisiofisiologia dell'infarto miocardico e i processi biologici concomitanti.

Modello di infarto miocardico Murine utilizzando la legatura permanente dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra

Descriviamo in dettaglio un modello tumorale del cancro colorettale clinicamente rilevante (CRLM) e l'influenza della reperfusione di ischemia epatica (I/R) nella crescita tumorale e nella metastasi. Questo modello può aiutare a comprendere meglio i meccanismi alla base della promozione metastatica del fegato indotta da un intervento chirurgico.

Modello Murine dei tumori metastatici del fegato nell'impostazione della lesione alla riperfusione dell'ischemia

La lesione da ischemia-riperfusione renale è associata ad alta morbilità e mortalità nei pazienti ospedalizzati. Qui, presentiamo un modello murino semplice ed efficace di danno unilaterale da ischemia-riperfusione renale e forniamo una panoramica sequenziale dei cambiamenti patologici rappresentativi osservati nel rene.

Un modello murino efficace di danno unilaterale da ischemia-riperfusione renale

Qui descriviamo un metodo semplice e riproducibile che può indurre infarto miocardico o danno da ischemia-riperfusione miocardica nei topi mediante legatura di precisione dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra attraverso la micromanipolazione.

Induzione di infarto miocardico e danno da ischemia-riperfusione miocardica nei topi

Descriviamo come generare un modello chirurgico ampiamente utilizzato di danno da ischemia-riperfusione intestinale (IRI) nei roditori. La procedura prevede l'occlusione dell'arteria mesenterica superiore seguita dal ripristino del flusso sanguigno. Questo modello è utile per gli studi che indagano le cause occlusive dell'IRI intestinale sia in medicina veterinaria che umana.

Modello di roditore di danno da ischemia-riperfusione intestinale attraverso l'occlusione dell'arteria mesenterica superiore

Il protocollo delinea un metodo fattibile, affidabile e riproducibile di clampaggio ilare polmonare sinistro che può essere utilizzato per studiare il danno da ischemia-riperfusione polmonare in modelli murini.

Modello murino di morsetto ilare polmonare sinistro di lesione da riperfusione da ischemia polmonare

Questo protocollo presenta un metodo per indurre il danno da ischemia-riperfusione mesenterica e visualizzare le trappole extracellulari dei neutrofili (NET) nelle venule mesenteriche utilizzando la microscopia intravitale. Il flusso sanguigno nell'arteria mesenterica superiore è stato limitato per 1 ora, seguito da riperfusione, consentendo la quantificazione diretta dell'adesione leucocitaria e della NETosi.

Visualizzazione delle trappole extracellulari dei neutrofili nelle venule mesenteriche dopo danno da ischemia-riperfusione mesenterica tramite microscopia intravitale

Impara a indurre lesione da ischemia-riperfusione intestinale nel topo mediante occlusione temporanea dell'arteria mesenterica superiore. Questo metodo riproducibile consente di studiare i meccanismi cellulari e molecolari del danno e della rigenerazione tissutale in gastroenterologia e immunologia.

Modello murino di ischemia-riperfusione intestinale Injury

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