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DOI: 10.3791/54203-v
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Questo test di adesione flusso fornisce un semplice, modello alto impatto di cellule epiteliali interazioni delle cellule T. Una pompa siringa viene usato per generare forze di taglio, e la microscopia confocale cattura immagini per la quantificazione. L'obiettivo di questi studi è quello di quantificare in modo efficace l'adesione delle cellule T con condizioni di flusso.
L'obiettivo generale di questo test è determinare gli effetti dei trattamenti di interesse sull'adesione cellulare in condizioni di stress di taglio. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della segnalazione delle cellule immunitarie, come ad esempio quali fattori mediano l'attivazione delle integrine. Il vantaggio principale di questa tecnica è che le coppie di integrine di singole molecole di adesione possono essere studiate in un sistema di flusso facilmente replicabile.
Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sull'attivazione di LFA1, può anche essere applicato allo studio di altre integrine. In generale, le persone che non conoscono questo metodo possono avere difficoltà perché la configurazione tecnica deve essere eseguita con precisione. Per raccogliere le cellule CHO-ICAM, trattare la coltura con tripsina EDTA allo 0,5% per un minuto a temperatura ambiente con agitazione delicata.
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