Name: Metodo alternativo di rimozione otoliti da Sturgeon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 7 s
Description: Scopri un metodo alternativo per estrarre otoliti intatti da carcasse di storione, preservando le strutture anatomiche critiche. Questa tecnica facilita gli studi sull'età e la crescita delle specie minacciate.

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Un ringraziamento speciale a Divisione St. Regis Mohawk ambientale, Welaka Nazionale vivaio, US Fish and Wildlife Service Unità di Ricerca, Southern Illinois University, US Fish and Wildlife Service nord-est Centro per la pesca, Sterling caviale, University of California-Davis, Garrison Dam Pesce Nazionale Hatchery, Orsi Bluff National Fish Hatchery, e US Fish and Wildlife Service di Panama Office Resource Città della pesca per il loro aiuto la fornitura di storione per questo progetto. in questo articolo è il contributo 2013 del USGS Great Lakes Science center.

Nota importante: A causa della condizione protetta di tutte le specie di storione negli Stati Uniti, permette di acquisire e gestire pesci sono stati ottenuti prima procedura di laboratorio. Tutti i campioni sono stati acquisiti da fonti di incubazione post mortem dovute a cause naturali e smaltiti seguendo la procedura standard. 1. Preparazione del campione <ol><li> Prima eventuali incisioni giacevano storione carcassa su un lato e con un nastro di misurazione per misurare la lunghezza totale del muso alla punta della coda per l&#39;approssimazione di 1 mm. (Figura 1A) </li><li> Pesare storione carcassa su una scala tarato l&#39;approssimazione di 1 g. Valutare carcassa per eventuali variabili esterne o segni e record. </li></ol> 2. Estrazione Otolith <ol><li> Effettuare una incisione verticale con una lama del raccordo tra la base del cranio e il primo scute dorsali attraverso il corpo per separare la testa dal corpo (Figura 1B). Dopo aver rimosso la testa, turn la testa in modo che la bocca è rivolta verso l&#39;alto (Figura 1C). </li><li> Rimuovere tessuti molli della bocca e branchie utilizzando il coltello filetto per tagliare lungo la faccia ventrale del cranio (Figura 1D). Fare un&#39;incisione con una sega elettrica osso dalla punta del muso alla base del cranio alla bisettrice completamente la testa (Figura 1E). Separare le due metà manualmente per esporre la cavità cerebrale (Figura 2A). </li><li> Rimuovere e materia cerebrale (Red box a sinistra) con una pinza per visualizzare canali semicircolari (Red box a destra) all&#39;interno della cavità cerebrale (Figura 2B) scartare. </li><li> Rimuovere semicircolare cartilagine canale dalla cavità cerebrale con una pinza (Figura 2C). Forare con cautela semicircolare cartilagine canale con la punta della pinza e rimuovere otoliti (Figura 2D). Rimuovere il otoliti (struttura ossea duro dentro la cartilagine) con una pinza dalla cartilagine canale semicircolare (Figura 2E) </strong&gt;. </li><li> Ripetere i punti 2.3 - 2.4 a rimuovere otolite dall&#39;altra metà del cranio. </li><li> Immergere le otoliti in 92% di etanolo per 5 secondi per eliminare ogni cartilagine. Luogo otoliti in un 25 ml di scintillazione flacone aperto ad asciugare per 24 ore. </li></ol>

<ol><li>Auer, N. A. Conservation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAuer%2C+NA+%22Sturgeons+and+Paddlefish+of+North+America%22">Sturgeons and Paddlefish of North America</a>. LeBreton, G. T. O., Beamish, F. W. H., McKinley, R. S. 27, Kluwer Academic Publishers. 252-276 (2004).</li>
<li>Sturgeon Specialists Group, sturgeon conservation. IUCN (International Union for the Conservation of Nature). , Source: 
 <a target="_blank" href="www.iucn.org">www.iucn.org</a> (2008).</li>
<li>Campana, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy%2C+precision+and+quality+control+in+age+determination%2C+including+a+review+of+the+use+and+abuse+of+age+validation+methods%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Fish+Biology%22%5BJournal%5D)">Accuracy, precision and quality control in age determination, including a review of the use and abuse of age validation methods).</a> Journal of Fish Biology. 59, 197-242 (2001).</li>
<li>Bruch, R. M., Campana, S. E., Davis-Foust, S. L., Hansen, M. J., Janssen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lake+Sturgeon+age+validation+using+bomb+radiocarbon+and+known-age+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Lake Sturgeon age validation using bomb radiocarbon and known-age fish.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 138, 361-372 (2009).</li>
<li>Baremore, I. E., Rosati, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+validated%2C+minimally+deleterious+method+for+ageing+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">A validated, minimally deleterious method for ageing sturgeon.</a> Fishery Bulletin. 112, 274-282 (2014).</li>
<li>Stevensen, J. T., Secor, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age+determination+and+growth+of+Hudson+River+Atlantic+sturgeon%2C+Acipenser+oxyrhynchus%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Age determination and growth of Hudson River Atlantic sturgeon, Acipenser oxyrhynchus.</a> Fishery Bulletin. 97, 153-166 (1999).</li>
<li>Brennan, J. S., Cailliet, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+age-determination+techniques+for+white+sturgeon+in+California%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fishery+Society%22%5BJournal%5D)">Comparative age-determination techniques for white sturgeon in California.</a> Transactions of the American Fishery Society. 118, 296-310 (1989).</li>
<li>Rossiter, A., Noakes, D. L. G., Beamish, F. W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+age+estimation+for+the+lake+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Validation of age estimation for the lake sturgeon.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 124, 777-781 (1995).</li>
<li>Chalupnicki, M. A., Dittman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((North+American+Sturgeon+Otolith+Morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Copeia%22%5BJournal%5D)">North American Sturgeon Otolith Morphology.</a> Copeia. , 260-266 (2016).</li>
<li>Secor, D. H., Dean, J. M., Laban, E. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSecor%2C+DH+%22Manual+for+otolith+removal+and+preparation+for+microstructural+examination%22">Manual for otolith removal and preparation for microstructural examination</a>. , Barach Press. Columbia, South Carolina. (1991).</li>
</ol>

Qualsiasi uso di nomi commerciali, di prodotti o di aziende è solo a scopo descrittivo e non implica l'approvazione da parte del governo degli Stati Uniti.

La panoramica di un metodo alternativo di estrazione di otoliti dalle carcasse di storione è stato dettagliato. È importante notare che una particolare attenzione è necessaria per il posizionamento incisione laterale sulla linea mediana del cranio per bisettrice cranio uniformemente per garantire nessun danno agli otoliti durante la dissezione. Se l&#39;incisione non è abbastanza profonda per bisettrice completamente cranio sarà molto difficile da esporre la cavità cerebrale dove la posizione delle otoliti è chiaramente...

Sturgeon (Acipenseridae) le popolazioni di tutto il mondo sono in calo da oltre un secolo a causa di impatti, tra cui la perdita di habitat, la frammentazione della popolazione, e la pesca eccessiva in modo tale che molte popolazioni sono protetti da leggi statali e federali 1,2. Agenzie di gestione in tutti gli USA e il mondo hanno identificato lo storione come specie bersaglio per il restauro e il recupero 1. Caratteristiche della popolazione (la crescita, il reclutamento, la dieta) della maggior parte delle popolazioni di storione sono stati studiati per comprendere meglio le caratteristiche di biologia e storia di vita di base 1. A causa della condizione protetta della maggior parte delle popolazioni di storione, la valutazione di età è difficile in piccole popolazioni minacciate Se concede nessun sacrificio o danni alle persone. L&#39;estrazione delle strutture ossee ai fini della stima dell&#39;età e analisi crescita è stata una tecnica comune 3 uso .Il delle sezioni raggi pinna per determinare l&#39;età di Sturgesu è diventato un metodo pratico non letale, ma la verifica della tecnica è stata limitata e l&#39;età può essere molto difficile da decifrare nei soggetti anziani (&gt; 15 anni) 4. I ricercatori hanno valutato l&#39;uso di più strutture ossee in storione per il loro uso nel convalidare l&#39;età di Golfo storione (Acipenser oxyrinchus desoti) 5, Atlantic Sturgeon (A. o. Oxyrinchus) 6, Storione Bianco (A. transmontanus) 7, e il Lago di Sturgeon (A. fluvescens) 8 ha concluso che il primo raggio della pinna pettorale marginale fornito l&#39;età più accurata, ma ha concluso la procedura invasiva per essere deleterio per gli individui più grandi. Attualmente, vi è lo sviluppo di utilizzare metriche forma otoliti di distinguere tra le specie di storione del Nord America, con un altissimo tasso di successo 9. Dettagli sulla processo di rimozione del otoliti con una incisione trasversale dorsale alla base del cranio è un comune otolite supplementareMetodo ction trovato tutta la letteratura e chiaramente dettagliato per Secor et al. (1991) 10. Tuttavia, questo metodo è difficile da implementare sulla storione che hanno crani molto spesse con otoliti che sono piccole e delicate e tenderebbero a rompersi. Un ulteriore revisione della letteratura mostra nessuna altra metodologia dettagliata del processo di rimozione otoliti per storione. L&#39;obiettivo di questo lavoro è stato quello di dettaglio un metodo alternativo di estrazione di otoliti da Sturgeon inserendo nella cavità del cervello dal lato ventrale.

<table><tbody><tr><td>Tavola</td><td></td><td></td> di misurazione <td>Il metro metrico è preferito</td></tr><tr><td>Bilancia</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Coltello</td><td></td><td></td><td></td>per sfilettare</tr><tr><td>Bisturi</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pinze</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fiale per campioni Fiale</td><td></td><td></td> a <td>scintillazione da 25 ml funzionano bene</td></tr></tbody></table>

metodo alternativo di rimozione otoliti da sturgeon

Alternative Method of Removing Otoliths from Sturgeon

Estrazione dei otoliti (ossa dell&#39;orecchio) da pesci che hanno i crani molto spesse può essere difficile e richiede molto tempo. La pratica comune di fare una incisione trasversale verticale sulla parte superiore del cranio con una mano o sega elettrica possono danneggiare la dell&#39;otolite se non eseguite correttamente. Storioni (Acipenseridae) sono una famiglia, in particolare, che hanno un grande e grosso cranio. Un nuovo metodo di laboratorio che entra nella cavità cervello dal lato ventrale del pesce per esporre otoliti era più facile che altri metodi di estrazione otoliti in letteratura. Metodi recensiti in letteratura sono progettati per il campo e sono più efficienti a trattare grandi quantità di pesce rapidamente. Tuttavia, questa nuova tecnica è stato progettato per essere più adatto per un ambiente di laboratorio, quando il tempo non è pressante ed estrazione di successo di ciascun campione è critica. Il successo di trovare e rimuovere otoliti utilizzando questa tecnica è molto elevato e non compromette le struttura in qualsiasi modo. Questa tecnica alternativa è applicabile ad altre specie di pesci simili per l&#39;estrazione dei otoliti.

La dimensione adulta di storioni in tutto il mondo varia notevolmente ma la posizione degli otoliti è coerente. L&#39;uso di un coltello filetto tagliente è stato trovato per rimuovere il tessuto molle della bocca facilmente mostrato nella Figura 1D. Una sega elettrica osso è lo strumento preferito per l&#39;incisione laterale per esporre la cavità cerebrale in figura 1E. Tuttavia, l&#39;attenzione per bisettrice la linea mediana del cranio, serve una al...

L'obiettivo del protocollo è mostrare un metodo efficace per estrarre gli otoliti dalle carcasse di storione.

Metodo alternativo di rimozione otoliti da Sturgeon

Extracting the otoliths (ear bones) from fish that have very thick skulls can be difficult and very time consuming. The common practice of making a ...

L'obiettivo generale di questo metodo è fornire una tecnica alternativa efficace per l'estrazione di otoliti intatti da pesci minacciati, come lo Storione del Lago. Questo metodo di estrazione degli otoliti può contribuire a rispondere a domande fondamentali sull'età e la crescita dei pesci, sulla posizione degli ossicini rispetto alla morfologia cerebrale e sulla microchimica associata all'ambiente. Il vantaggio di questa tecnica consiste nel fatto che, nei pesci con cranio spesso e otoliti fragili, l'apertura della cavità cerebrale non danneggia gli otoliti né altera altre strutture critiche.L'idea per questo metodo è stata sviluppata durante la ricerca sull'ecologia del ripristino dell'Acipenser minacciato. In popolazioni residue, raramente si ottengono esemplari per la necroscopia e l'analisi di laboratorio. Pertanto, raccogliere con successo informazioni sull'età e altre informazioni da singoli animali è fondamentale per colmare le lacune nei dati della specie.Mark eseguirà la procedura di rimozione degli otoliti dallo Storione del Lago. Per estrarre gli otoliti, posizionare innanzitutto lo Storione ventralmente e utilizzare un metro a nastro per determinare la lunghezza totale, dalla punta del muso all'estremità della coda, arrotondando al millimetro più vicino. Successivamente, pesare l'animale su una bilancia tarata al grammo più vicino e valutare il corpo alla ricerca di eventuali marchi o tag esterni.Dopo aver registrato questi dati, utilizzare un coltello da filetto grande per effettuare un'incisione verticale attraverso il corpo tra la base del cranio e la prima scaglia dorsale per staccare la testa. Dopo averla rimossa, ruotare la testa in modo che la bocca sia rivolta verso l'alto. Quindi utilizzare il coltello da filetto per tagliare lungo il lato ventrale del cranio ed eliminare il tessuto molle.Successivamente effettuare un'incisione con un taglierino elettrico dalla punta del muso fino alla base del cranio per dividere completamente il cranio in due parti. Separare manualmente le due metà per esporre la cavità cerebrale. Quindi utilizzare una pinzetta per rimuovere e scartare il tessuto cerebrale, esponendo i canali semicircolari all'interno della cavità cerebrale.Rimuovere la cartilagine del canale semicircolare dalla cavità cerebrale. Quindi utilizzare la punta della pinzetta per forare con attenzione la cartilagine del canale semicircolare. Dopo aver identificato la struttura ossea rigida all'interno della cartilagine, estrarre l'otolite e immergere l'osso dell'orecchio in etanolo al 92% per quattro secondi per rimuovere qualsiasi residuo di cartilagine.Infine, asciugare l'otolite in un vial da 25 millilitri aperto per 24 ore. La taglia adulta dell'Acipenser sturio in tutto il mondo varia notevolmente, ma la posizione degli otoliti è costante. Come dimostrato, un coltello affilato per filettare rimuove facilmente i tessuti molli della bocca.Un taglierino elettrico è lo strumento preferito per l'incisione laterale necessaria a esporre la cavità cerebrale. È tuttavia necessario prestare particolare attenzione a effettuare il taglio lungo la linea mediana del cranio. In caso contrario, gli otoliti potrebbero essere schiacciati durante l'operazione.Le pinze facilitano la rimozione semplice del tessuto cerebrale, consentendo l'accesso alla cartilagine del canale semicircolare che contiene l'otolite alla base della cavità cerebrale. La cartilagine presente nel canale semicircolare può quindi essere rimossa dall'otolite con poca difficoltà utilizzando le pinze, per ulteriori analisi dell'osso auricolare. Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere completata in meno di cinque minuti se eseguita correttamente.Quando si esegue questa procedura, è importante ricordare di procedere con calma durante i tagli. Non dimenticare che lavorare con strumenti da dissezione e pesci morti può essere pericoloso e maleodorante. Pertanto, è sempre necessario adottare precauzioni come l'uso corretto degli strumenti chirurgici e l'impiego di dispositivi di protezione individuale adeguati durante l'esecuzione di questa procedura.Dopo aver visto questo video, si dovrebbe avere una buona comprensione di come aprire il cranio dello Storione dal lato ventrale e rimuovere gli otoliti senza danneggiare le ossa dell'orecchio. Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della scienza della pesca per esplorare metodi alternativi per rimuovere con successo gli otoliti in specie di pesci in cui le tecniche standard si sono rivelate difficili.

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