27 giugno 2016
L'obiettivo del protocollo è mostrare un metodo efficace per estrarre gli otoliti dalle carcasse di storione.
L'obiettivo generale di questo metodo è fornire una tecnica alternativa efficace per l'estrazione di otoliti intatti da pesci minacciati, come lo Storione del Lago. Questo metodo di estrazione degli otoliti può contribuire a rispondere a domande fondamentali sull'età e la crescita dei pesci, sulla posizione degli ossicini rispetto alla morfologia cerebrale e sulla microchimica associata all'ambiente. Il vantaggio di questa tecnica consiste nel fatto che, nei pesci con cranio spesso e otoliti fragili, l'apertura della cavità cerebrale non danneggia gli otoliti né altera altre strutture critiche.
L'idea per questo metodo è stata sviluppata durante la ricerca sull'ecologia del ripristino dell'Acipenser minacciato. In popolazioni residue, raramente si ottengono esemplari per la necroscopia e l'analisi di laboratorio. Pertanto, raccogliere con successo informazioni sull'età e altre informazioni da singoli animali è fondamentale per colmare le lacune nei dati della specie.
Mark eseguirà la procedura di rimozione degli otoliti dallo Storione del Lago. Per estrarre gli otoliti, posizionare innanzitutto lo Storione ventralmente e utilizzare un metro a nastro per determinare la lunghezza totale, dalla punta del muso all'estremità della coda, arrotondando al millimetro più vicino. Successivamente, pesare l'animale su una bilancia tarata al grammo più vicino e valutare il corpo alla ricerca di eventuali marchi o tag esterni.
Dopo aver registrato questi dati, utilizzare un coltello da filetto grande per effettuare un'incisione verticale attraverso il corpo tra la base del cranio e la prima scaglia dorsale per staccare la testa. Dopo averla rimossa, ruotare la testa in modo che la bocca sia rivolta verso l'alto. Quindi utilizzare il coltello da filetto per tagliare lungo il lato ventrale del cranio ed eliminare il tessuto molle.
Successivamente effettuare un'incisione con un taglierino elettrico dalla punta del muso fino alla base del cranio per dividere completamente il cranio in due parti. Separare manualmente le due metà per esporre la cavità cerebrale. Quindi utilizzare una pinzetta per rimuovere e scartare il tessuto cerebrale, esponendo i canali semicircolari all'interno della cavità cerebrale.
Rimuovere la cartilagine del canale semicircolare dalla cavità cerebrale. Quindi utilizzare la punta della pinzetta per forare con attenzione la cartilagine del canale semicircolare. Dopo aver identificato la struttura ossea rigida all'interno della cartilagine, estrarre l'otolite e immergere l'osso dell'orecchio in etanolo al 92% per quattro secondi per rimuovere qualsiasi residuo di cartilagine.
Infine, asciugare l'otolite in un vial da 25 millilitri aperto per 24 ore. La taglia adulta dell'Acipenser sturio in tutto il mondo varia notevolmente, ma la posizione degli otoliti è costante. Come dimostrato, un coltello affilato per filettare rimuove facilmente i tessuti molli della bocca.
Un taglierino elettrico è lo strumento preferito per l'incisione laterale necessaria a esporre la cavità cerebrale. È tuttavia necessario prestare particolare attenzione a effettuare il taglio lungo la linea mediana del cranio. In caso contrario, gli otoliti potrebbero essere schiacciati durante l'operazione.
Le pinze facilitano la rimozione semplice del tessuto cerebrale, consentendo l'accesso alla cartilagine del canale semicircolare che contiene l'otolite alla base della cavità cerebrale. La cartilagine presente nel canale semicircolare può quindi essere rimossa dall'otolite con poca difficoltà utilizzando le pinze, per ulteriori analisi dell'osso auricolare. Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere completata in meno di cinque minuti se eseguita correttamente.
Quando si esegue questa procedura, è importante ricordare di procedere con calma durante i tagli. Non dimenticare che lavorare con strumenti da dissezione e pesci morti può essere pericoloso e maleodorante. Pertanto, è sempre necessario adottare precauzioni come l'uso corretto degli strumenti chirurgici e l'impiego di dispositivi di protezione individuale adeguati durante l'esecuzione di questa procedura.
Dopo aver visto questo video, si dovrebbe avere una buona comprensione di come aprire il cranio dello Storione dal lato ventrale e rimuovere gli otoliti senza danneggiare le ossa dell'orecchio. Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della scienza della pesca per esplorare metodi alternativi per rimuovere con successo gli otoliti in specie di pesci in cui le tecniche standard si sono rivelate difficili.
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Questo protocollo illustra un metodo efficace per estrarre gli otoliti da carcasse di storione, in particolare da specie minacciate come lo Storione del lago. La tecnica è stata progettata per preservare l'integrità degli otoliti riducendo al minimo i danni alle strutture circostanti.
Questo metodo fornisce un approccio affidabile per l'estrazione di otoliti integri da pesci con cranio spesso, consentendo un'analisi precisa dell'età e della crescita, fondamentale per la gestione delle risorse ittiche e la ricerca sulla conservazione. Preservando l'integrità degli otoliti, la tecnica permette la raccolta di dati ad alta fedeltà da esemplari rari o minacciati, riducendo l'incertezza biologica negli studi ecologici. La strategia di accesso ventrale minimizza il danno strutturale, migliorando la riproducibilità e i tassi di successo in contesti di laboratorio dove la conservazione del campione è fondamentale.
Il metodo si inserisce nel flusso di lavoro della biologia della scoperta fornendo una fase affidabile di preparazione del campione per analisi basate sugli otoliti, consentendo applicazioni successive nella validazione dell'età, nella valutazione del tasso di crescita e nel tracciamento dell'esposizione ambientale.