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DOI: 10.3791/54345-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol provides step-by-step guidelines for setting up competitive mouse bone marrow transplant experiments to study hematopoietic stem/progenitor cell function without prior purification of stem cells by cell sorting. The method aims to determine the fitness of bone marrow hematopoietic stem cells in vivo using a competitive transplant assay.
Questo protocollo fornisce linee guida passo dopo passo per l'impostazione di esperimenti competitivi di trapianto di midollo osseo di topo per studiare la funzione delle cellule staminali/progenitrici ematopoietiche senza previa purificazione delle cellule staminali mediante selezione cellulare.
L'obiettivo generale di questo esperimento è determinare l'idoneità delle cellule staminali ematopoietiche del midollo osseo in vivo utilizzando un test di trapianto competitivo. Quindi questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della biologia delle cellule staminali e del trapianto di cellule ematopoietiche sull'impatto di varie manipolazioni sull'autorinnovamento delle cellule staminali dopo il trapianto. I principali vantaggi di questa tecnica sono che richiede un numero limitato di animali e che non comporta lo smistamento cellulare.
Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sulla funzione delle cellule staminali, può essere utile anche in altri campi come l'immunologia, attraverso l'uso di chimere miste di midollo osseo. Lo sviluppo iniziale di questa tecnica negli anni '60 ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della biologia delle cellule staminali per esplorare l'identità e la funzione delle cellule staminali ematopoietiche nell'uomo e nei topi. A dimostrare la procedura saranno Roxanne Hetu-Arbour, una studentessa del Master in laboratorio, e Edward Owusu Kwarteng, uno studente di dottorato.
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