L'isolamento, la differenziazione e quantificazione di Human anticorpo-secernenti cellule B da sanguigno: ELISpot come una lettura funzionale del umorale immunità

L'obiettivo generale di questa metodologia ELISpot è quello di consentire la quantificazione delle cellule B che secernono anticorpi umani dal sangue. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave in campo biomedico sull'immunologia delle cellule B e sulla ricerca sui vaccini. Il vantaggio principale di questa tecnica è che consente il rilevamento e la misurazione delle cellule B secernenti anticorpi a livello di singola cellula.

A dimostrare la procedura sarà Tsung-Chih Tseng, uno studente laureato del mio laboratorio. Immediatamente dopo aver prelevato un campione di sangue da 10 ml dalla vena cubitale mediana in una provetta da 15 ml contenente EDTA integrato con potassio, capovolgere la provetta più volte per prevenire la formazione di coaguli. Quindi aggiungere 35 ml di tampone di lisi dei globuli rossi autoclavato alle cellule per un'incubazione di cinque minuti a temperatura ambiente.