Iniezione intrarenale di In un modello di ratto di pielonefriti

L'obiettivo generale di questo modello chirurgico di peylonephritis nel ratto è fornire un metodo che non richieda il reflusso renale, che viene utilizzato in altri modelli. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave in campo medico, come ad esempio come somministrare al meglio la terapia antibiotica, come possiamo monitorare gli effetti delle infezioni ricorrenti o delle infezioni residue dopo la terapia che possono portare a recidive. Il vantaggio principale di questa tecnica è che questo modello applica direttamente i batteri al rene in una quantità ragionevolmente affidabile senza la necessità di reflusso renale, che può aggiungere una certa variabilità in termini di infezione.

Prima di iniziare questa procedura, preparare il bolo di iniezione batterica contenente tra un milione e 10 milioni di cellule. Dopo aver anestetizzato il ratto e preparato la sua pelle per l'intervento chirurgico, applicare un unguento per gli occhi del veterinario sugli occhi per prevenire la secchezza. Posizionare il ratto su una piattaforma chirurgica riscaldata in posizione di decubito sinistro con il fianco destro rivolto verso l'alto.

Strofinare la pelle con un disinfettante. Ripetere tre volte e poi strofinare il sito chirurgico con alcool al 70% fino a quando la pelle non è chiara. Per iniziare l'intervento chirurgico, utilizzando un bisturi numero 10, praticare una piccola incisione retroperitoneale dorsale destra di due o tre centimetri che inizia nella parte inferiore della gabbia toracica.

Continua sezionando il tessuto sottocutaneo, il grasso e i muscoli per visualizzare e accedere alla cavità addominale. Una volta che il fegato è chiaramente visibile e accessibile, usa una pinza smussata per ritrarlo verso l'alto. Quindi, usando un secondo paio di pinze smussate, esporre il rene destro in modo che si trovi appena fuori dalla cavità addominale.

Ora, posizionare il rene per l'iniezione nella mano non dominante. Usando la mano dominante, puntare con precisione l'ago per iniezione sulla pelvi renale. Quindi, iniettare lentamente e costantemente 0,1 millilitri di soluzione batterica o salina.

Qui viene iniettata soluzione salina. Il bolo apparirà come una bolla bianca nel tessuto. Prima di ritrarre l'ago, posizionare una striscia di emostatico riassorbibile sul sito di iniezione per evitare il deflusso dell'inoculo nel peritoneo.

Quindi, estrarre lentamente l'ago. Ora, usando una siringa grande, sciacquare accuratamente il rene con soluzione fisiologica. Quindi, riportare il rene nella cavità addominale.

Per la chiusura del sito chirurgico, utilizzare suture riassorbibili o monofilamento nel tessuto corporeo e suture intrecciate 4-0 non assorbibili sulle superfici corporee. Per posizionare i punti di sutura, iniziare dal punto più lontano dall'operatore, utilizzando una pinza a denti fini per afferrare la pelle ed evitarla leggermente. Quindi, ruotare il supporto dell'ago in posizione pronata e supinare il polso per ruotare l'ago e guidarlo attraverso l'intero spessore della pelle.

Stringere la sutura quanto basta per esporre i bordi del tessuto. Qualsiasi tensione ostruirà l'afflusso di sangue e quindi rallenterà la guarigione della ferita e potrebbe provocare deiscenza. Quindi, lega la sutura usando un nodo quadrato, come se fosse un semplice punto interrotto, tranne per il fatto che viene tagliato solo il filo corto, lasciando una coda di tre o quattro millimetri.

Ora, posizionando ogni punto successivo a circa tre millimetri dal precedente, continuate la sutura in esecuzione. Una volta raggiunta la fine dell'incisione, non tirare completamente l'ultimo punto. Invece, usa l'anello tenuto dal supporto dell'ago come filo corto e lega l'estremità distale della chiusura della sutura.

Ora, usando le fascette per strumenti, lega la sutura usando nodi quadrati. Il risultato saranno tre fili che sporgono da un nodo completato. Dopo aver somministrato analgesici e un'iniezione peritoneale da 0,6 millilitri di soluzione fisiologica normale, osservare l'animale mentre si riprende dall'anestesia su un termoforo con lettiera morbida assorbente.

Durante le prime 24 ore di recupero, reidratare l'animale con liquidi orali o parenterali fino a quando non può tornare alla normale alimentazione. Successivamente, monitorare regolarmente l'incisione per gonfiore, essudato o deiscenza e fornire analgesici per il dolore, se necessario. Un'infezione acuta da peylonefrite è stata indotta mediante iniezione di un milione e 10 milioni di cellule UT189 di E.coli nel modello di roditore.

La risonanza magnetica del rene ha mostrato un aumento progressivo della regione di infezione da uno a quattro giorni dopo l'iniezione. Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere eseguita in 30 minuti se eseguita correttamente. Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordarsi di controllare gli animali dopo l'intervento chirurgico per osservare i segni di infezione da E.Coli al di fuori del rene, specialmente nei punti di incisione, per assicurarsi che gli animali non diventino eccessivamente settici.

Dopo questa procedura, è possibile eseguire altri metodi, come la risonanza magnetica, per rispondere a ulteriori domande come: l'infezione è vitale, quanto velocemente sta crescendo l'infezione e questa terapia è efficace?