Name: Laterale cronica cranica finestra Preparazione Attiva In Vivo Condizioni seguito distale Medio occlusione dellarteria cerebrale nei topi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-12-29T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 41 s
Description: Impara a preparare una finestra cranica laterale cronica con occlusione permanente dell'arteria cerebrale media nei topi. Questa tecnica consente microscopia intravitale longitudinale per studiare i cambiamenti ischemici acuti e cronici dopo ictus.

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VP partecipa al Programma Charité Clinical Scientist, finanziato dalla Charité - Universitätsmedizin Berlin e dall'Istituto di Salute di Berlino. TB è un borsista di mobilità post-dottorato del FNS. Gli autori ricevono sovvenzioni da EinsteinStiftung/A-2012-153 a PV.

ETICA DICHIARAZIONE: Gli esperimenti che coinvolgono soggetti animali sono stati eseguiti in conformità con le linee guida e regolamenti stabiliti dalla Landesamt fuer Gesundheit und Soziales, Berlino, Germania (G0298 / 13) ei criteri arrivano, a seconda dei casi. Per questo studio, 10 a 12 settimane di età maschi C57Bl / 6J sono stati utilizzati. 1. laterale cronica cranica finestra Preparazione <ol><li> Eseguire anestesia con una iniezione sottocutanea di ketamina (90 mg / kg) e xilazina (10 mg / kg). Test per la sedazione adeguata con uno stimolo dolore. </li><li> Sterilizzare gli strumenti chirurgici e campo chirurgico con il 70% di etanolo. </li><li> Rimuovere il cuoio capelluto dal collo agli occhi con un rasoio roditore. </li><li> Fissare la testa in un frame stereotassico. </li><li> Utilizzare Dexpantenolo pomata occhio su entrambi gli occhi per evitare la disidratazione. </li><li> Pulire l&#39;area chirurgica per rimuovere tutti i peli e sterilizzare con 3 strati di 74,1% di etanolo e 10% 2-propanololo. </li><li> Eseguire un linea medianaincisione dal collo agli occhi utilizzando un bisturi. </li><li> Coprono l&#39;lembo cutaneo con 4 punti di sutura in tenda. </li><li> Rimuovere il periostio attentamente l&#39;emisfero sinistro raschiando via con un bisturi al punto in cui inizia il muscolo temporale. NOTA: Questa preparazione serve anche per creare una buona zona adesione per la colla dentale, che fissa il vetro di copertura. </li><li> Eseguire una craniotomia fronto-parietale con un diametro di 4 mm da diradamento cranio sul bordo del lembo osseo utilizzando un microtrapano. Applicare la soluzione salina durante la perforazione per evitare lesioni di calore. </li><li> Elevare il lembo osseo con cannule e rimuoverlo con microforceps. </li><li> Irrigare accuratamente e ampiamente con soluzione fisiologica. </li><li> Mescolare la colla dentale fino ha la consistenza adeguata e non è fluido (cioè, la colla deve produrre fili più). Posizionarlo sul tessuto osseo intorno alla craniotomia. </li><li> Posizionare un vetro di copertura con un diametro di 6 mm sulla colla preparata e fissarlo con the resto della colla dentale. Assicurarsi che sia a tenuta stagna. Attendere che la colla viene essiccato e duro provandola con una pinza. NOTA: L&#39;irrigazione ulteriore accelera il processo di polimerizzazione. </li><li> Rimuovere i punti di sutura in tenda e chiudere la ferita con punti di sutura della pelle. </li><li> Tirare la pelle del fianco del mouse. Inserire una via sottocutanea ago e sostituire delicatamente 0,5 ml di sterile per via sottocutanea salina per l&#39;equilibrio dei fluidi. </li><li> Dopo l&#39;intervento chirurgico, tenere gli animali in gabbia recupero riscaldato per 90 min. Attendere fino a quando gli animali sono completamente sveglio prima di lasciare incustoditi. Attendere fino a quando gli animali sono completamente recuperati prima di tornare in una gabbia con altri animali. </li><li> Ripetere la sostituzione del volume di soluzione salina per via sottocutanea dopo circa 12 ore, come descritto al punto 1.16. </li><li> Sempre applicare analgesia mediante sonda gastrica o direttamente nella cavità orale dopo l&#39;intervento (ad esempio, paracetamolo (10 mg / ml) o altri farmaci anti-infiammatori non steroidei). </li><li> Controlla il<html> condizioni degli animali ogni giorno dopo l&#39;intervento chirurgico, e sempre forniscono schiacciate cibo animale sul pavimento in una piastra di Petri per fare mangiare semplice e per evitare la perdita di peso dopo l&#39;intervento critico. NOTA: microscopia intravitale può essere effettuata sul primo giorno dopo la preparazione finestra del cranio. </li><li> Applicare isoflurano anestesia e fissare l&#39;animale in un supporto testa. Aprire la sutura della pelle e pulire la finestra con bastoncini di cotone e soluzione salina sterile. Dopo 24 ore, la finestra del cranio deve essere riempito con liquido cerebrospinale da quel punto di tempo, che permette l&#39;imaging. Eseguire l&#39;imaging utilizzando protocolli di microscopia stabiliti 18. </li></ol> 2. distale MCAO NOTA: La procedura MCAO deve essere eseguita su 5 d dopo la preparazione CW. Ciò minimizza l&#39;interferenza dalla reazione immunitaria causata dalla preparazione CW con la reazione immunitaria ictus indotta. &quot;Src =&quot; / files / ftp_upload / 54701 / 54701fig1.jpg &quot;/&gt; Figura 1. Panoramica distale MCAO. R. Questa è una bella panoramica sui vasi prima della op. B. I vasi dopo il primo contatto bipolare. C. I vasi dopo secondo contatto bipolare. D. La panoramica sui vasi, che sono completamente chiuse oggi. E. panoramica finale con ingrandimento minore. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54701/54701fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.</a> <ol><li> Anestetizzare il topo, utilizzando una maschera di anestesia e un regime anestetico adeguato, in consultazione con il personale veterinario (ad esempio, induzione con 1,5-2% isoflurano e manutenzione con 1,0-1,5% isoflurano in 2/3 N 2 O e 1/3 O 2 via un vaporizzatore). </li><li> Shave e rimuovere i capelli e disinfettare la pelle e pelliccia circostante con un agente appropriato (ad esempio, il 70% di alcol etilico), e asciugare dopo. </li><li> Mantenere la temperatura corporea dei topi a 36,5 ° C ± 0,5 ° C durante l&#39;intervento chirurgico. Una piastra elettrica risposte controllato, riscaldato secondo la temperatura rettale del mouse, è altamente raccomandato. </li><li> Posto l&#39;animale in posizione laterale. Fissare il naso nella maschera anestesia e regolare la concentrazione isoflurano a 1,0 - 1,5%. </li><li> Applicare una pomata bagnato (Dexpantenolo) per entrambi gli occhi. </li><li> Utilizzare l&#39;incisione cutanea fatta per la preparazione CW. </li><li> Delicatamente separare la pelle e identificare il muscolo temporale sottostante. </li><li> Regolare l&#39;energia del generatore ad alta frequenza (5 - 7 W) e usare la modalità bipolare. </li><li> Utilizzare le pinze elettrocoagulazione e rimuovere con attenzione il muscolo temporale dal cranio, la creazione di un lembo di muscolo, senza rimuovere completamente il muscolo. </li><li> Identificare la MCA sotto il cranio trasparente nella parte rostrale della zona temporale, dorsale per la retro-orbital seno. Se la biforcazione MCA non può essere identificato, cercare di identificare la nave più rostrale. </li><li> Sottile il teschio sopra il ramo MCA con un microtrapano mentre continua irrigazione per evitare danni dovuti al calore. </li><li> Sollevare l&#39;osso con cannule e rimuoverlo con microforceps. </li><li> Diminuire l&#39;energia del generatore ad alta frequenza 3 - 5 W. </li><li> Avvicinatevi l&#39;arteria dall&#39;alto e toccare delicatamente con le pinze bipolari su entrambi i lati senza sollevare la nave. </li><li> Coagulare dell&#39;arteria prossimale e distale alla biforcazione nave. </li><li> Attendere 30 sec, quindi toccare delicatamente l&#39;arteria per garantire che il flusso di sangue è permanentemente interrotta. Ripetere l&#39;elettrocoagulazione, se si osserva una ricanalizzazione. </li><li> Fissare il muscolo temporale di 1 o 2 punti all&#39;inserzione muscolare per coprire il difetto osseo, se possibile. </li><li> Suturare la ferita e posizionare l&#39;animale nella casella di recupero riscaldato. In generale, il recupero animali subito dopo Anest volatilihesia. </li><li> Per la sostituzione del volume, applicano 0,5 ml di soluzione sterile salina per via sottocutanea, come descritto al punto 1.16. </li><li> Dopo l&#39;intervento chirurgico, consentono agli animali di rimanere nella gabbia di recupero riscaldato per 90 min. Attendere fino a quando gli animali sono coscienti prima di lasciare incustoditi. restituirli solo a una gabbia con altri animali quando sono completamente recuperati. </li><li> Ripetere la sostituzione del volume, come spiegato al punto 1.16, dopo 12 ore. </li><li> Applicare l&#39;analgesia postoperatoria con acqua potabile (ad esempio, il paracetamolo (10 mg / ml) o altri farmaci anti-infiammatori non steroidei). </li><li> Controllare la condizione medica degli animali ogni giorno dopo l&#39;intervento chirurgico. Fornire cibo animale schiacciato in una piastra di Petri sul pavimento per semplificare mangiare e per ridurre al minimo la perdita di peso post-operatorio. </li></ol> 3. Trattamento Sham <ol><li> Eseguire tutte le procedure in modo identico ai punti 1 e 2, sopra descritti, tra cui la preparazione CW, tranne non coagulare il ar cerebrale media espostobatteria. </li></ol>

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</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

L&#39;ictus è tra le principali cause di disabilità a lungo termine e morte nel mondo 1. Al di là di trattamento acuto, indagare nuovi approcci e meccanismi per accelerare e migliorare il recupero dopo l&#39;ictus rimane un obiettivo medica primaria 7. ricercatori ictus sperimentali utilizzano spesso modelli di roditori di ischemia cerebrale focale. Infatti, modelli inducono transitoria o permanente MCAO imitano uno dei tipi più comuni di ischemia cerebrale focale in pazienti 4. Oltre l&...

L'ictus è tra le principali cause di disabilità e morte a lungo termine in tutto il mondo1, al secondo posto dopo la malattia coronarica. Inoltre, l'ictus è la causa principale della disabilità a lungo termine, sottolineando il suo enorme impatto socioeconomico6-8. Al di là del trattamento acuto, lo studio di nuovi approcci e meccanismi per accelerare e migliorare il recupero dopo l'ictus rimane un obiettivo medico primario7. 
Negli ultimi decenni, i dati della ricerca sperimentale sull'ictus hanno contribuito in modo sostanziale alla comprensione delle complesse cascate fisiopatologiche innescate dall'ischemia9,10. L'eccitotossicità, l'apoptosi, la depolarizzazione peri-infartuale e l'infiammazione sono stati identificati come i mediatori più rilevanti della morte cellulare a seguito di ischemia cerebrale focale. Inoltre, utilizzando modelli animali di ischemia cerebrale, sono stati sviluppati e validati importanti concetti, modalità diagnostiche e approcci terapeutici (ad esempio, "penombra" e trombolisi)11.
La disponibilità di modelli sperimentali di ictus, combinata con modalità di imaging non invasive (ad esempio, risonanza magnetica (MRI), tomografia computerizzata o analisi laser speckle contrast analysis), consente al ricercatore di indagare i cambiamenti fisiopatologici iperacuti e cronici indotti dall'insulto ischemico in modo longitudinale12. Oltre a studiare il profilo spazio-temporale della lesione in evoluzione, è possibile studiare i cambiamenti che assomigliano alla plasticità neuronale e correlarli agli esiti funzionali e ai risultati istologici. Negli ultimi anni, sono stati compiuti ulteriori progressi metodologici utilizzando la combinazione di modelli di ischemia cerebrale e microscopia in vivo tramite finestre craniche13. Queste nuove tecniche consentono ai ricercatori di analizzare l'unità neurovascolare a livello cellulare e molecolare, con grande potenza analitica nelle fasi acuta, subacuta e cronica successive all'ischemia cerebrale focale14. Inoltre, l'imaging al microscopio in vivo della dinamica microcircolatoria ha rivelato nuovi aspetti della funzione microvascolare cerebrale e dell'angioarchitettura, con una significativa rilevanza fisiopatologica15-17. 
In questo protocollo, presentiamo come eseguire una preparazione cronica di CW lateralmente al seno sagittale e come indurre chirurgicamente un ictus distale sotto la finestra. Questo modello murino può essere applicato all'imaging sequenziale di cambiamenti acuti, subacuti e cronici a seguito di ischemia cerebrale focale tramite epi-illuminazione, scansione laser confocale e microscopia intravitale a due fotoni.

<table><tbody><tr><td>Microscopio chirurgico binoculare</td><td>Zeiss</td><td>Stemi 2000 C</td><td></td></tr><tr><td>Sorgente luminosa per microscopio</td><td>Zeiss</td><td>CL 6000 LED</td><td></td></tr><tr><td>Piastra riscaldante con sonda rettale</td><td>FST</td><td>21061-10</td><td></td></tr><tr><td>Telaio stereotassico</td><td>Kopf</td><td>Modello 930</td><td></td></tr><tr><td>Sistema di anestesia per isoflurano</td><td>Draeger</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Pinza Abott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5</td><td>FST</td><td>11251-10</td><td></td></tr><tr><td>Pinza Dumont #7</td><td>FST</td><td>11271-30</td><td></td></tr><tr><td>Pinza bipolare</td><td>Erbe</td><td>20195-501</td><td></td></tr><tr><td>Pinza bipolare&nbsp;</td><td>Erbe&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 20195-022</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microtrapano</td><td>FST&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 18000-17&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Porta aghi</td><td>FST</td><td>12010-14</td><td></td></tr><tr><td>5-0 sutura di seta</td><td>Feuerstein,</td> sutura di seta Suprama <td></td><td></td></tr><tr><td>7-0</td><td>Feuerstein,</td> sutura di seta Suprama <td></td><td></td></tr><tr><td>8-0</td><td>Feuerstein, Suprama</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Camera di recupero veterinaria</td><td>Peco Services</td><td>V1200</td><td></td></tr></tbody></table>

laterale cronica cranica finestra preparazione attiva in vivo condizioni seguito distale medio occlusione dell'arteria cerebrale nei topi

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Ischemia cerebrale focale (cioè, ictus ischemico) può causare gravi lesioni cerebrali, portando ad una grave perdita della funzione neuronale e di conseguenza ad una serie di motore e disabilità cognitive. La sua alta prevalenza pone un grave onere di salute, come l&#39;ictus è tra le principali cause di disabilità a lungo termine e morte nel mondo 1. Recupero della funzione neuronale è, nella maggior parte dei casi, solo parziale. Finora, le opzioni di trattamento sono molto limitate, in particolare a causa della finestra temporale ristretta per la trombolisi 2,3. Che determina i metodi per accelerare il recupero da ictus rimane un obiettivo medico prime; tuttavia, questo è stato ostacolato dalla insufficienti intuizioni meccanicistici nel processo di recupero. ricercatori ictus sperimentali utilizzano spesso modelli di roditori di ischemia cerebrale focale. Al di là della fase acuta, la ricerca corsa è sempre più focalizzata sulla fase sub-acuta e cronica dopo ischemia cerebrale. applicare la maggior parte dei ricercatori ictus permanente o tranl&#39;occlusione sient del MCA nei topi o ratti. Nei pazienti, occlusioni di MCA sono tra le più frequenti cause di ictus ischemico 4. Oltre l&#39;occlusione prossimale del MCA utilizzando il modello filamento, l&#39;occlusione chirurgica del distale MCA è probabilmente il modello più utilizzato nella ricerca ictus sperimentale 5. L&#39;occlusione di un distale (la ramificazione delle arterie lenticulo-striate) ramo MCA risparmia tipicamente striato e colpisce soprattutto la neocorteccia. Vessel l&#39;occlusione può essere permanente o transitorio. Alta ripetibilità volume lesione e mortalità molto bassi rispetto al risultato a lungo termine sono i principali vantaggi di questo modello. Qui, dimostriamo come eseguire una cronica finestra del cranio (CW) la preparazione lateralmente al seno sagittale, e poi come chirurgicamente indurre un ictus distale sotto la finestra utilizzando un approccio craniotomia. Questo approccio può essere applicato per l&#39;imaging sequenziale di alterazioni acute e croniche seguente ischemia viaepi-illuminante, confocale a scansione laser, e due fotoni microscopia intravitale.

La linea temporale e risultati rappresentativi sono mostrati nelle figure 2 e 3. La preparazione finestra del cranio, con una piccola finestra laterale cranica al seno longitudinale superiore (Figura 2 B, C, D) comporta un basso tasso di mortalità e morbilità quando eseguita da un chirurgo esperto. Tutti i 10 animali sopravvissuti, e tutto CW cronico potrebbe essere utilizzato per l'imaging di alta qualità, anche 28 giorni dopo l'interve...

l&#39;occlusione chirurgica di un ramo distale dell&#39;arteria cerebrale media (MCAO) è un modello di uso frequente nella ricerca ictus sperimentale. Questo manoscritto descrive la tecnica base di MCAO permanente, combinata con l&#39;inserimento di una finestra cranica laterale, che offre la possibilità di longitudinale microscopia intravitale nei topi.

Laterale cronica cranica finestra Preparazione Attiva In Vivo Condizioni seguito distale Medio occlusione dell'arteria cerebrale nei topi

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of ...

L'obiettivo generale di questa procedura è la preparazione di una finestra cranica laterale combinata con l'occlusione permanente dell'arteria cerebrale media. Per facilitare la microscopia intravitale longitudinale nei topi. Questo metodo può aiutare a indagare e rispondere a domande chiave nel campo della ricerca sull'ischemia cerebellare.Il vantaggio principale di questa tecnica è che offre l'imaging in vivo dei cambiamenti acuti e cronici dopo l'ictus. Inizia somministrando l'anestesia secondo un protocollo animale approvato. Assicurarsi che sia stato raggiunto un piano chirurgico di anestesia somministrando uno stimolo doloroso, come un pizzico di dito del piede, e notando l'assenza di una reazione.Quindi, usa un rasoio per roditori per rimuovere la pelliccia dal collo agli occhi. Fissa la testa del mouse in un fotogramma stereotassico. Quindi coprire gli occhi con un unguento oftalmico per prevenire la disidratazione.Pulisci l'area rasata per rimuovere tutti i peli e sterilizza il cuoio capelluto con tre applicazioni di etanolo al 74,1% e propranololo in tubo al 10%. Usando un bisturi sterile, praticare un'incisione sulla linea mediana dal collo agli occhi. Quindi coprire il lembo cutaneo con quattro suture per tende.Quindi, raschiare con cura il periostio sul lato sinistro del cranio. E rimuovilo fino al punto in cui inizia il muscolo temporale. Ora usa un micro trapano per assottigliare il cranio sul bordo del lembo osseo.Per creare una craniotomia frontoparietale di quattro millimetri di diametro. Applicare una soluzione salina durante la perforazione per evitare lesioni da calore. Una volta forato, sollevare il lembo osseo con le cannule e rimuoverlo utilizzando una micro pinza.Irrigare l'area con cura e in modo estensivo con soluzione salina. Mescola la colla dentale fino a quando non ha la giusta consistenza. Quindi applicalo sull'osso intorno alla craniotomia.Posizionare un vetro di copertura di sei millimetri di diametro sulla colla preparata. E fissalo con il resto della colla dentale. L'irrigazione accelera il processo di polimerizzazione e garantisce la tenuta stagna della guarnizione.Sonda la colla dentale con una pinza per assicurarti che sia asciutta e dura. Dopo che la colla si è indurita, rimuovere i punti di sutura della tenda e chiudere la ferita con punti di sutura cutanei. Somministrare 0,5 millilitri di soluzione fisiologica sterile per via sottocutanea per l'equilibrio dei liquidi.Dopo l'intervento chirurgico, monitorare l'animale in una gabbia di recupero riscaldata fino a quando non si è ripreso dall'anestesia. Assicurarsi che l'animale sia completamente recuperato prima di rimetterlo in una gabbia con altri animali. Somministrare sempre analgesia dopo l'intervento chirurgico.Qui, 10 milligrammi per millilitro di paracetamolo vengono aggiunti all'acqua potabile. Fornire sempre purè di cibo animale in una capsula di Petri posta sul pavimento per rendere il mangiare semplice ed evitare una perdita di peso critica dopo l'intervento chirurgico. La microscopia intravitale può essere eseguita il primo giorno dopo la preparazione della finestra cranica.Applicare l'anestesia con isoflurano secondo un protocollo approvato. Fissare l'animale in un supporto per la testa e assicurarsi che l'ogiva sia montata correttamente. Aprire la sutura cutanea e pulire la finestra con cotton fioc e soluzione fisiologica sterile.Dopo 24 ore, la finestra cranica deve essere riempita con liquido cerebrospinale, che consente l'imaging. Eseguire la procedura di occlusione dell'arteria cerebrale media cinque giorni dopo la preparazione della finestra cranica, quando la risposta immunitaria alla procedura si è ritirata. Qui, viene mostrata una panoramica dopo la craniotomia per l'induzione MCAO.La foto intraoperatoria mostra i vasi dopo il primo e il secondo contatto bipolare. L'MCA distale appare completamente occluso. Questa immagine fornisce una panoramica finale utilizzando un ingrandimento inferiore.Dopo aver indotto l'anestesia chirurgica con isoflurano come prima, radere il pelo nell'area tra l'occhio e l'orecchio, applicare un unguento oftalmico su entrambi gli occhi e disinfettare la pelle e il pelo circostante con una soluzione alcolica, come prima. Posiziona il mouse su un termoforo controllato dal feedback per mantenere la temperatura corporea. Posizionare l'animale in posizione laterale e fissare il naso nella maschera per anestesia.Separare delicatamente la pelle dell'incisione praticata per la preparazione della finestra cranica e identificare il muscolo temporale sottostante. Quindi, regolare l'energia del generatore ad alta frequenza e utilizzare la modalità bipolare. Usa una pinza per elettrocoagulazione per sollevare con cura il muscolo temporale dal cranio, creando un lembo muscolare senza rimuovere completamente il muscolo.Quindi identificare l'arteria cerebrale media sotto il cranio trasparente nella parte rostrale dell'area temporale. Dorsale al seno retro-orbitale. Assottiglia il cranio sopra il ramo MCA con un micro trapano, mentre irriga continuamente per evitare danni da calore.Quindi sollevare l'osso e rimuoverlo con una micro pinza. Diminuire l'energia del generatore ad alta frequenza da tre a cinque watt. Quindi, avvicinati all'arteria dall'alto e toccala delicatamente con la pinza bipolare su entrambi i lati senza sollevare il vaso.Attendere trenta secondi, quindi toccare delicatamente l'arteria con la punta della pinza bipolare per assicurarsi che il flusso sanguigno venga interrotto in modo permanente. Dopo l'occlusione MCA, fissare il muscolo temporale con uno o due punti di sutura all'inserzione muscolare per coprire il difetto osseo. Quindi, sutura la ferita e metti l'animale nella gabbia riscaldata fino a quando non si riprende.Questa risonanza magnetica è stata eseguita 24 ore dopo l'intervento chirurgico fittizio e non mostra alcuna lesione del tessuto corticale. Mentre questa risonanza magnetica, eseguita 24 ore dopo l'ischemia, rappresenta chiaramente la lesione ischemica indicata da un asterisco, situata sotto la finestra cranica cronica. Questa immagine mostra l'imaging intravitale con epifluorescente e l'imaging a due fotoni del sistema vascolare corticale per monitorare i cambiamenti nella microcircolazione.Il volume dell'infarto valutato tramite risonanza magnetica a 24 e 96 ore dopo l'ischemia, mostra un volume medio della lesione di 13,16 millimetri cubi a 24 ore e di 12,2 millimetri cubi a 96 ore. Una volta padroneggiata, la preparazione della finestra cranica può essere eseguita in circa 30 minuti. E il MCAO in circa 15 minuti.Seguendo questa procedura, è possibile eseguire altri metodi, come la risonanza magnetica o la microscopia a doppio fotone per rispondere a ulteriori domande. Queste nuove tecniche consentono ai ricercatori di studiare un'unità neurovascolare a livello molecolare e cellulare. E più in particolare, nel cervello vivente.

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Protocollo chirurgico per una grande finestra cranica richiudibile che consente registrazioni elettrofisiologiche longitudinali e multimodali della rete in modalità predefinita del mouse

L'obiettivo di questo studio era stabilire un metodo riproducibile per eseguire una craniectomia seguita da un'occlusione permanente e selettiva dell'arteria cerebrale media nei ratti, da applicare in studi sperimentali sui deficit di memoria motoria e spaziale.

Occlusione selettiva e permanente dell'arteria cerebrale media nei ratti: un approccio sperimentale per studiare i deficit di memoria motoria e spaziale

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Laterale cronica cranica finestra Preparazione Attiva In Vivo Condizioni seguito distale Medio occlusione dellarteria cerebrale nei topi (Video) | JoVE Journal

Laterale cronica cranica finestra Preparazione Attiva In Vivo Condizioni seguito distale Medio occlusione dell'arteria cerebrale nei topi

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