Un modello murino di fatica indotta da irradiazione Peripheral

Descriviamo un metodo che utilizza irraggiamento periferico mirati per indurre comportamento a fatica, come nei topi. La dose di irradiazione non letale selezionati porta ad una riduzione di una settimana in attività di ruote in esecuzione volontaria.

L'obiettivo generale di questa procedura è misurare il comportamento simile alla fatica indotto dall'irradiazione periferica. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave sulla fatica e, in particolare, sulla fatica correlata all'irradiazione. Ad esempio, può essere utilizzato per esplorare i diversi ruoli del sistema immunitario e del sistema nervoso centrale nell'affaticamento dopo l'irradiazione.

Il vantaggio principale di questa tecnica è che utilizza specificamente l'irradiazione periferica per influenzare il comportamento di fatica essenzialmente guidato. Inizia randomizzando i topi in un finto controllo irradiato o in gruppi irradiati. Quindi, identifica i topi maschi di cinque settimane dal tatuaggio della coda e assegna ogni topo a una gabbia per topi ventilata standard.

Lasciare che i topi si acclimatino alle loro gabbie per almeno altri tre giorni, maneggiando delicatamente ogni topo per un periodo di tre minuti al giorno. Successivamente, introduci i topi all'attività di corsa individuale volontaria delle ruote, o gabbie VWRA, ciascuna dotata di una ruota da corsa collegata a un contatore elettronico per la registrazione continua. Avviare la registrazione di VWRA tramite l'interfaccia software del computer.

Impostare gli intervalli di registrazione su un'ora e la durata su almeno cinque giorni. Infine, dopo cinque giorni, interrompi la registrazione VWRA tramite l'interfaccia software e riporta i mouse nelle loro gabbie standard senza ruote in movimento. Dopo aver anestetizzato il topo, confermare che l'anestesia sia stata efficace con un pizzico di dita.

Usa un unguento sugli occhi per prevenire la secchezza. Quindi, trasferire il topo anestetizzato in un dispositivo di schermatura in piombo. Disporre il topo nella schermatura in modo che sia esposta solo la parte inferiore dell'addome e della regione pelvica.

Quindi, utilizzare del nastro adesivo per fissare la base della coda del mouse in posizione all'interno della schermatura per garantire che la posizione non cambi durante l'irradiazione. Se il topo fa parte del gruppo di irradiazione, somministrare 800 centigray a una dose di circa 110 centigray al minuto. Se il topo fa parte del gruppo di controllo dell'irradiazione fittizia, lasciarlo nell'irradiatore inattivo per il tempo equivalente.

Al termine dell'irradiazione, rimuovere il topo dall'irradiatore e dalla schermatura e rimetterlo nella sua gabbia standard originale. Monitorare continuamente il topo fino a quando non ha riacquistato sufficiente coscienza per mantenere la decubito sternale. Dopo tre giorni consecutivi di irradiazione, trasferire i topi nelle loro gabbie VWRA individuali.

Infine, per catturare l'affaticamento indotto dalle radiazioni, registrare il VWRA per 15 giorni. L'effetto è stato significativo per i primi sette giorni dopo la radiazione, con la distanza media VWRA più bassa che si è verificata il terzo giorno dopo la radiazione. Qui viene mostrata la distribuzione della variazione di VWRA da prima a dopo l'irradiazione.

Mentre la maggior parte dei topi testati ha mostrato sintomi simili all'affaticamento, c'è stato un piccolo numero di topi che ha mostrato pochi cambiamenti o addirittura un aumento del VWRA. Durante il tentativo di questa procedura, è importante assicurarsi che i topi siano completamente anestetizzati durante l'irradiazione poiché qualsiasi movimento può influenzare il targeting e il dosaggio dell'irradiazione. Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come utilizzare l'irradiazione mirata periferica per indurre un comportamento simile alla fatica nei topi.