Name: Quantificazione del comportamento del grooming di Drosophila (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-07-19T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 18 s
Description: Scopri come quantificare il comportamento di grooming in Drosophila utilizzando un saggio con colorante giallo brillante. Questo metodo rapido e robusto fornisce dati quantitativi per studi di neurobiologia e genetica comportamentale.

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Desideriamo ringraziare Brian Shepherd, Tat Udomritthiruj, Aaron Willey, Ruby Froom, Elise Pitmon e Rose Hedreen per iniziare a sperimentare e stabilire questa metodologia e progetti di camera. Ringraziamo Kelly Tellez e Graham Buchan per la lettura e la modifica del manoscritto. Ringraziamo Andrew Seeds e Julie Simpson per il loro lavoro pionieristico e il loro consiglio e supporto per suggerire l&#39;uso di Brilliant Yellow Dye (Sigma). Questo lavoro è sostenuto in parte da Mary E. Groff Chirurgia e Ricerca Medica e Educazione Charitable Trust, il Bronfman Science Center, e Hellman Fellows Program.

1. Preparazione <ol><li> Preparare un aspiratore per spostare Drosophila vivo da un flaconcino di cultura alla camera di cura. Gli aspirazione consentono il trasferimento di animali coscienti alle camere comportamentali per assicurare che l&#39;anestesia non pregiudichi l&#39;osservazione comportamentale successiva. <ol><li> Usando le forbici tagliate 1,5 piedi di tubo TYGON ID ⅛ &quot;, OD ¼&quot;. Cucito almeno 1 pollice fuori dalla punta di una punta da 1 ml di micropipetta usa e getta. Tenere un pezzo di maglia quadrata di 1 cm (apertura 0,196 pollici) sopra la punta tagliata. NOTA: La maggior parte dei suggerimenti da 1 mL ha una linea di gradazione dove la punta si trova nella confezione, in genere tagliata a quella riga. </li><li> Posizionare rigidamente una punta di micropipetta da 1 ml fresca sopra la punta della maglia / taglio. Osservare che la maglia costituisce una barriera tra le due punte. L&#39;interno della nuova punta crea una camera di tenuta per le mosche. </li><li> Tagliare la punta estrema della nuova punta della micropipetta per allargare l&#39;apertura abbastanza per consentire il passaggio di una singola mosca. L&#39;oroE corrisponde approssimativamente all&#39;apertura della camera di grooming (circa 1,5-2 mm di diametro). </li><li> Inserire a fondo le punte nidificate alla fine del tubo di tygon. Spingere le punte nel tubo per assicurare una tenuta stretta per consentire la pressione del vuoto. </li><li> Dall&#39;altra estremità del tubo, tagliare la punta di una punta di micropipetta da 200 μL e montare l&#39;estremità del taglio stretto nel tubo. Questo è il lato &quot;bocca&quot; dell&#39;aspirapolvere. </li></ol></li><li> Preparare i tubi di aliquota della polvere. Pesa circa 5 mg di colorante giallo brillante su carta pesata tarata. Versare la polvere in un tubo da microcentrifuga da 0,6 ml e chiudere bene il tappo. NOTA: Consigliamo l&#39;uso di guanti di nitrile durante la preparazione di aliquote, poiché alcuni guanti in lattice sono permeabili al colorante. </li><li> Ripetere la fase 1.2) per tutti i campioni nell&#39;esperimento (uno per ogni mosca in ciascuna camera). </li><li> Preparare tubi di etanolo (EtOH): Pipettare 1 mL di 100% EtOH in 1,5 mL di microcentrifuga. Tubetti di etichetta per genotipi o condizioni/ Li&gt; <li> Ripetere il passo 1.4) per tutti i campioni nell&#39;esperimento (uno per ogni mosca in ogni camera). Coprire e salvare i tubi EtOH per completare il test di cura. Includere anche almeno un campione &quot;vuoto&quot; che sarà solo 1 mL di EtOH senza una mosca per controlli negativi. </li><li> Assemblare ogni camera di manipolazione avvitando la piastra superiore scorrevole (con i fori più piccoli) ma lasciando la piastra inferiore (con i fori più grandi) rimossi per l&#39;aggiunta della polvere. </li><li> Posizionare ogni camera di grooming necessaria su un tavolo con il lato superiore rivolto verso il basso. Il lato di ingresso della mosca è rivolto verso il basso. </li><li> Caricare 5 ml di aliquota brillante di tintura gialla in ciascuna camera toccando il tubo contro la superficie della camera sopra il pozzo desiderato. Toccare la camera contro il tavolo per assicurare che tutta la polvere cada attraverso la maglia alla piastra superiore. </li><li> Avvitare la piastra inferiore su ciascuna camera in modo che le estremità più ampie delle aperture coniche si rivolgano verso l&#39;esterno ei fori non si riposino sui pozzetti. Protegga il botTom piastra in modo che non scivoli e rilasci la tintura. </li><li> Spostare la camera sopra e batterlo piatta su un tavolo poche volte in modo che la polvere cada attraverso la maglia per riposare sulla piastra inferiore. </li><li> Far scorrere la piastra superiore della camera nella &quot;posizione aperta&quot; in modo che i piccoli fori si allineino con i quindici pozzetti, consentendo l&#39;introduzione di mosche in singoli pozzetti. </li></ol> 2. Spruzzando le mosche e coltivando <ol><li> Caricare una mosca nell&#39;aspirazione della bocca aspirando delicatamente attraverso un&#39;estremità dell&#39;aspirazione come se si utilizza una paglia. Depositate le mosche colando leggermente e dirigendo l&#39;apertura verso l&#39;obiettivo. </li><li> Aspirare una mosca in ogni pozzo utilizzato per l&#39;esperimento. Dopo aver caricato un pozzo, far scorrere la piastra superiore in modo che la mosca sia intrappolata nella camera e posizionare il nastro sopra l&#39;apertura del pozzo durante il caricamento di tutta la camera per evitare che la mosca sfugga durante il caricamento di altri pozzetti. Se più mosche vengono aspirate in un singoloBene, lasci l&#39;apertura scoperta fino a quando rimane solo una mosca. </li><li> Dopo che tutti i pozzi necessari sono pieni di mosche, flip la camera in modo tale che la piastra inferiore sia in alto in modo che la polvere abbia il potenziale per ricoprire le mosche cadendo attraverso la maglia. </li><li> Serrare bene le piastre superiore e inferiore serrando le viti e vorticola la camera per spolverare le mosche per 4 s. </li><li> Bussare la camera (piastra superiore rivolta verso l&#39;alto) contro un tavolo due volte in modo che la tintura cada dall&#39;altra parte. Quindi, ruotare la camera sopra (piastra superiore rivolta verso l&#39;alto) e bussare due volte la camera per assicurare che il colorante si deposita sul pavimento della camera inferiore dalla mosca tenuta nella camera superiore. </li><li> Per le mosche di controllo che non sono autorizzate a sposo, procedere immediatamente al punto 3 del protocollo. Per le mosche che completeranno il test, procedere al punto 2.7. </li><li> Riposare la camera da letto su un tavolo o il piano di lavoro con la piastra superiore verso l&#39;alto per trenta minuti per permettere alle mosche di sposo. Mettere la cameraIn un ambiente di rumore e senza vibrazioni per mantenere costante l&#39;ambiente per tutti gli esperimenti di cura (livelli di illuminazione, umidità e temperatura). Un incubatore a tavoletta a RT oa 25 ° C con controlli di umidità è l&#39;ideale. </li></ol> 3. Preparazione dei campioni e analisi di assorbanza <ol><li> Tenendo il livello della camera con il piatto superiore verso l&#39;alto, svitate delicatamente la piastra inferiore e rimuovila dalla camera, facendo attenzione a non perdere la tintura. </li><li> Posizionare la camera su un cuscinetto Fly CO 2 con flusso d&#39;aria basso fino a quando le mosche sono anestetizzate. </li><li> Svitare la piastra superiore dalla camera. Utilizzare attentamente le pinze per afferrare una gamba e spostare una mosca spolverata da ogni camera e depositarla in un tubo da 1,5 ml di microcentrifuga contenente EtOH. Il tempo di trasferimento per 15 camere ciascuna contenente una mosca è di circa 3-5 minuti. I esperimenti dovrebbero fatturare i tempi di trasferimento se / quando esperimenti sconcertanti con più camere per assicurare una gestione efficiente degli esperimenti. </li&gt; <li> Una volta che ogni tubo di microcentrifuga contiene una mosca, chiudere il tappo e invertire il tubo tre volte per agitare e mescolare la soluzione di colorante e etanolo. </li><li> Incubare i tubi contenenti etanolo e volare per 5 ore a RT per garantire la completa rimozione del colorante dal fly in soluzione. Dopo i 5 h, brevemente vortexare ogni tubo (2 s) per garantire la distanza del colorante dalle mosche. </li><li> Aliquota 50 μL del tubo sperimentale da 1,5 ml in un pozzetto di una piastra a 96 pozzetti, se disponibile, prendendo atto della posizione di ciascun campione sulla piastra. Aggiungere 200 μL di EtOH per diluire il campione 5x. La diluizione evita gli effetti di soffitto di mosche pesanti o grossi difetti di grooming. </li><li> Utilizzare un lettore di piastre per analizzare ogni campione a 397 nm. In alternativa, misurare l&#39;assorbanza per i singoli campioni e gli spazi su uno spettrofotometro standard nello spettro visibile se non è disponibile un lettore di piastre. </li><li> Leggere e registrare il campione tramite il lettore di piastre e salvare il foglio di calcolo con il recordD sulla piastra. </li></ol> 4. Quantificazione dei risultati <ol><li> Compilare i risultati per tutti i campioni e misurare la varianza per ogni genotipo o condizione. NOTA: L&#39;accumulo di tintura a 0 min e in tempo 30 min viene considerato come condizione separata utilizzando analisi statistiche mediante correzione ANOVA e Bonferroni a senso unico e altre correzioni per più confronti paralleli. </li><li> Calcola la differenza percentuale di grooming per ciascun genotipo / condizione usando la seguente equazione: [(valore medio di accumulo di tintura al tempo 0 &#39;- valore medio di accumulo di tintura al tempo 30&#39;) / valore medio di accumulo di tintura al tempo 0] x 100. </li><li> Esprimere la percentuale per ogni genotipo e condizione nelle barre e confrontare tra genotipi e condizioni. </li></ol>

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<li>Hampel, S., Franconville, R., Simpson, J. H., Seeds, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+neural+command+circuit+for+grooming+movement+control%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">A neural command circuit for grooming movement control.</a> Elife. 4, e08758(2015).</li>
<li>Kays, I., Cvetkovska, V., Chen, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+functional+analysis+of+single+neurons+to+correlate+synaptic+connectivity+with+grooming+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Structural and functional analysis of single neurons to correlate synaptic connectivity with grooming behavior.</a> Nature Protocols. 9 (1), 1-10 (2014).</li>
</ol>

Gli autori non dichiarano conflitti di interesse.

Il test di cura è relativamente semplice, ma avremmo cautela i sperimentatori a prestare particolare attenzione ai seguenti problemi. Il mantenimento di una guarnizione a tenuta stretta delle viti sulle piastre superiore e inferiore dopo l&#39;introduzione di mosche e tinture è essenziale per i risultati riproducibili. Il colorante giallo brillante è molto fine e le giunture sciolte consentiranno perdite di tintura dai bordi della camera. L&#39;irregolarità del contenuto di tinture per ciascun pozzetto potrebbe facilmen...

Il grooming in Drosophila melanogaster ( D. melanogaster ) è un comportamento robusto innato che coinvolge il coordinamento di più programmi motori indipendenti 1 . I frutti volano puliscono i loro corpi di polvere, microbi e altri agenti patogeni che potrebbero inibire la normale funzione fisiologica, come la vista e il volo, o portare a importanti sfide immunitarie. Nel rilevare e reagire sia all&#39;attivazione meccanica 2 che all&#39;immunizzazione 3 , le mosche si ripetono a strofinare le gambe insieme o su una regione corporea mirata fino a quando non è sufficientemente pulita e il grooming progredisce in un&#39;altra parte del corpo. Le mosche svolgono movimenti di governare in attacchi distinti che in gran parte si verificano nei modelli stereotipati 1 , 4 . Una gerarchia comportamentale diventa evidente come i segnali di governare sono prioritizzati. Circuiti e modelli di attività sono stati identificati in supporto oFa il modello che i programmi di grooming in cima alla gerarchia si verificano in primo luogo e sopprimono i segnali paralleli da aree del corpo che vengono curate in seguito 5 . La massima priorità è data alla testa, poi all&#39;addome, alle ali e infine al torace 5 . Il programma di grooming in D. melanogaster è un sistema ideale per studiare circuiti neurali, segnali molecolari modulatori e neurotrasmettitori. Ad esempio, il compromesso della funzione neurofibromina 6 , la perdita della proteina Drosophila fragile X retardazione mentale ( dfmr1 ) 7 e l&#39;esposizione a bisfenolo A (BPA) 8 provocano eccessivi trattamenti e altri comportamenti analoghi ai sintomi umani discreti di neurofibromatosi, fragili X Sindrome e aspetti dei disordini dello spettro autistico e disordine di iperattività (ADHD). Il comportamento di grooming può anche essere habituaTed differenzialmente attraverso i ceppi mutanti 2 , prestando questo programma motore a studi di plasticità comportamentale. L&#39;ampiezza dei fenomeni neurologici che può essere modellata da Drosophila richiede un nuovo approccio comparativo per misurare la capacità delle mosche di sposarsi. Si è dimostrato che l&#39;azione combinata di trasportatori di monoammina vescicolare e la relativa abbondanza di dopamina e di altre ammine biogene nel corpo sono in grado di mediare il comportamento della volatili da frutta 9 , 10 . L&#39;ottopamina e la dopamina stimolano un&#39;attività comparativa di regolazione del collo posteriore nelle mosche decapitate, mentre la tiramina, precursore della ottopamina, innesca anche un grooming in misura minore 7 . Quattro recettori della dopamina sono stati identificati in D. melanogaster 11 , 12 , 13 , 14 </sup&gt;. Utilizzando il metodo di analisi di grooming descritto in questo protocollo, abbiamo determinato un ruolo per il tipo D di Dopamine Receptor DopR ( DopR, dDA1, dumb ) nel comportamento pastorale 15 . Il grooming può essere quantificato indirettamente guardando l&#39;estensione della pulizia con cui un animale può spogliarsi completamente dopo aver spolverato tutto il corpo con un colorante marcatore o una polvere fluorescente 5 , 16 . Il resto della polvere lasciato sul corpo può essere utilizzato come marcatore relativo per il comportamento complessivo. Dusty vola dopo essere stato dato tempo sufficiente per lo sposo può manifestare un deficit specifico nel comportamento grooming. Mentre le indagini di cura sono diventate più estese, i protocolli hanno incorporato tali pratiche come la decapitazione per aggiungere trattamenti farmacologici sui nervi connettivi del collo 10 , stimolazione tattile delle setole per ottenere la risposta di grooming 2 ,E la registrazione video del comportamento 15 . L&#39;osservazione diretta del grooming può essere facilmente studiata utilizzando l&#39;osservazione visiva e registrando manualmente la frequenza e la durata di eventi specifici di grooming 4 . Abbiamo progettato una camera da 15 grosse dimensioni che può essere costruita con una stampante 3D o una taglierina laser e i disegni dei modelli sono disponibili per la riproduzione 15 . Il disegno utilizza due piastre centrali unite con aperture abbinate e separate da maglie e due piastre superiore e inferiore di scorrimento aggiuntive, da cui sono caricate rispettivamente mosche e / o tinture. Dopo aver lasciato alle spalle le mosche spolverate, lo depositi in etanolo per solubilizzare il colorante e misurare l&#39;assorbanza di questa soluzione alla lunghezza d&#39;onda del colorante. Un lettore di piastre può essere utilizzato per campioni multipli paralleli o uno spettrofotometro a singolo lettura può essere utilizzato per campioni individuali. Questo metodo minimizza l&#39;errore indotto dalla manipolazione e alI bassi per i test di cura da eseguire su una scala più economica ed economica. Questo metodo è derivato e modificato dai metodi precedenti da Julie Simpson e Andrew Seeds, che utilizzano camere di grooming più grandi con elementi di riscaldamento per manipolazioni di circuiti sensibili alle temperature 5 . Il seguente protocollo mostra la quantificazione della cura di tutto il corpo e mostra metodi alternativi per la quantificazione dell&#39;accumulazione di coloranti sulle singole parti del corpo. Inoltre presentiamo i dati di confronto campione tra i mutanti WT e DopR , nonché i metodi per calcolare un indice di performance semplice per il comportamento di grooming.

<table><tbody><tr><td>Tubo trasparente in PVC Tygon ad alta flessibilità</td><td>McMaster-Carr</td><td>5229K54</td><td>ID 1/8", OD 1/4", utilizzato con puntali per micropipettor e rete per costruire aspiratori orali</td></tr><tr><td>Puntali per micropipette (1 mL e 200 &#956; L)</td><td>Genesee Scientific</td><td>24-165, 24-150R</td><td></td></tr><tr><td>Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6"</td><td>McMaster-Carr</td><td>9318T44</td><td>Utilizzato per costruire la camera di toelettatura e gli aspiratori per la bocca</td></tr><tr><td>Dumont #5 Pinze</td><td>Roboz Strumento chirurgico</td><td>RS-5050</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Yellow Dye</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>201375-25G</td><td>si consiglia l'uso di guanti in nitrile durante la manipolazione di questo prodotto</td></tr><tr><td>Vortexer</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-812</td><td>impostato per "toccare"</td></tr><tr><td>Etanolo</td><td>Carolina Biological Supply</td><td>86-1282</td><td></td></tr><tr><td>Provette per microcentrifuga da 1,5 mL</td><td>VWR International</td><td>10025-726</td><td></td></tr><tr><td>Provette per microcentrifuga da 0,65 mL</td> Le provette <td>VWR International</td><td>20170-293</td><td>possono essere riutilizzate con saggi successivi</td></tr><tr><td>Piastra UV a 96 pozzetti</td><td>Corning</td><td></td><td></td>26014017</tr><tr><td>BioTek Synergy HTX Platereader</td><td>BioTek</td><td>è necessario scaricare il catalogo per accedere al numero</td><td>di prodotto http://www.biotek.com/products/microplate_detection/synergy_htx_multimode_microplate_reader.html?tab=overview</td></tr><tr><td>Gen5 Software per lettore e imager per micropiastre</td><td>BioTek</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microsoft Excel</td><td>Microsoft</td><td></td><td>https://www.microsoftstore.com/store/msusa/en_US/pdp/Excel-2016/productID.323021400?tduid=(65d098c0e83b86c952bdff5b0719c83f)(256380)(2459594)(SRi0yYDlqd0-LI.. ql4M2LoZBEhcBljvIA)()</td></tr><tr><td>Drosophila Incubator</td><td>Tritech</td><td>DT2-CIRC-TK</td><td></td></tr><tr><td>1/4" plastica acrilica</td><td>McMaster-Carr</td><td>8473K341</td><td></td></tr><tr><td>8 - 32 dadi</td><td>McMaster-Carr</td><td>90257A009</td><td></td></tr><tr><td>8 - 32 x 1" viti a testa esagonale</td><td>McMaster-Carr</td><td>92185A199</td><td>la piastra inferiore deve essere filettata per questa vite</td></tr><tr><td>di dimensioni 8 - 32 x 1/2" viti a testa esagonale</td><td>McMaster-Carr</td><td>92185A194</td><td>la seconda piastra dall'alto deve essere filettata</td></tr><tr><td>2 - 56 3/8" viti a croce a testa piatta</td><td>McMaster-Carr</td><td>91500A088</td><td>queste tengono insieme le due piastre centrali</td></tr><tr><td>0,175" ID, 1/4" OD, 0,34" tubo in alluminio</td><td>McMaster-Carr</td><td>92510A044</td><td>Prodotto internamente; Il prodotto elencato ha all'incirca le stesse dimensioni e dovrebbe funzionare per viti di misura 8. Questi fungono da guaine per le viti da 1" e posizionano leggermente il cappuccio esagonale verso l'alto rispetto alla superficie della piastra superiore</td></tr></tbody></table>

quantificazione del comportamento del grooming di drosophila

Quantification of Drosophila Grooming Behavior

Il comportamento di grooming di Drosophila è un complesso programma locomotore multiplo che richiede un movimento coordinato di entrambi i lati e le zampe. Qui presentiamo un protocollo di dosaggio e un nuovo disegno a camera che è economicamente efficiente e scalabile per studi su piccola o larga scala di Drosophila . Le mosche vengono spolverate in tutto il corpo con la colorazione gialla brillante e hanno dato tempo per rimuovere il colorante dai loro corpi all&#39;interno della camera. Le mosche vengono quindi depositate in un determinato volume di etanolo per solubilizzare il colorante. Sono misurate e registrate l&#39;assorbanza spettrale relativa dei campioni di coloranti etanolo per animali da allevamento contro animali non macellati. Il protocollo fornisce dati quantitativi di accumulo di tinture per singole mosche, che possono essere facilmente mediate e confrontate tra campioni. Ciò consente ai disegni sperimentali di valutare facilmente le abilità di cura per gli studi sugli animali mutati o sulle manipolazioni dei circuiti. Questa procedura efficace è versatile e scalabile. Mostriamo wOrc-flow del protocollo e dati comparativi tra animali WT e animali mutanti per il Drosophila type I Dopamine Receptor ( DopR ).

Il dosaggio di cure rende dati quantitativi per valutare le prestazioni comportamentali basate sul residuo relativo della colorante accumulata lasciata sui corpi delle mosche dopo un tempo di misura impostato per la cura (30 min). Le figure di esempio del disegno della camera di scorrimento scorrevole e delle fasi principali del dosaggio sono evidenziate in figura 1 . Le mosche aggregano una quantità significativa di tintura dalla polverizzazione immedia...

Questo protocollo descrive una tecnica di dosaggio individuale scalabile di dosaggio in Drosophila che fornisce dati robusti e quantitativi per misurare il comportamento di manipolazione. Il metodo si basa sulla comparazione della differenza di accumulo di tinture nei corpi di animali non trattati e trattati in un determinato periodo di tempo.

Quantificazione del comportamento del grooming di Drosophila

Drosophila grooming behavior is a complex multi-step locomotor program that requires coordinated movement of both forelegs and hindlegs. Here we present a ...

L'obiettivo generale di questo metodo è misurare il comportamento di toeletta di Drosophila quantificando e confrontando il residuo di colorante giallo brillante colorato sul corpo degli animali in condizioni di toeletta e senza toeletta. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande fondamentali nel campo della neurobiologia e della genetica del comportamento, come la coordinazione delle abilità locomotorie fini e i relativi regolatori molecolari e circuiti associati. Il principale vantaggio di questa tecnica è che è rapida, robusta e facile da eseguire da parte di molti sperimentatori e studenti con diversi livelli di competenza.La dimostrazione di questa procedura sarà effettuata da Frankie Barradale, uno studente del mio laboratorio. Per iniziare l'esperimento, preparare un aspiratore per trasferire Drosophila vive da un vial di coltura alla camera per la toelettatura. Utilizzando delle forbici, tagliare 1,5 piedi di tubo in Tygon.Tagliare almeno un centimetro dalla punta di una punta monouso da un millilitro e tenere il pezzo quadrato di rete (di un centimetro per lato) sopra l'apertura da 196 pollici della punta tagliata. Posizionare saldamente una nuova punta da un millil

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Drosophila melanogaster è un sistema genetico e comportamentale del modello trattabile che è stato utilizzato per comprendere le basi molecolari e cellulari di molti importanti processi biologici per oltre un secolo 1. Drosophila è stata ben sfruttata per acquisire conoscenze in base genetica del comportamento mosca.

Metodi per test Drosophila Comportamento

Questo video descrive un metodo per costruire un aspiratore di mosche, che può essere utilizzato per trasferire insetti tra recinti senza anestesia. L'aspiratore nel protocollo di esempio è stato preparato per un esperimento per quantificare i comportamenti individuali di...

Tubo aspiratore di mosche: un semplice strumento per trasferire la Drosophila viva

Il Flywalk sistema automatizzato di monitoraggio è utilizzato per ad alta risoluzione quantificazione del comportamento odore guidati in Drosophila melanogaster.

Ad alta risoluzione quantificazione del comportamento Odor-guidata<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Utilizzo della<em&gt; Flywalk</em&gt; Paradigm

Al fine di identificare nuove mutazioni che influenzano la meccanosensazione, abbiamo progettato un test che misura la risposta comportamentale alla stimolazione tattile delle setole di mosca nei cloni mutanti generati dal metodo MARCM. La combinazione di tecniche consente l'identificazione di mutazioni meccanosensibili che altrimenti sarebbero letali.

Un test comportamentale per Mechanosensation di cloni in marcm-based<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Questo articolo descrive un test comportamentale che utilizza unità di accoppiamento maschio in Drosophila melanogaste R per studiare la motivazione. Utilizzando questo metodo, i ricercatori possono utilizzare mosca avanzate tecniche neurogenetiche per scoprire i meccanismi genetici, molecolari e cellulari che sono alla base questa motivazione.

Misurazione e l&#39;alterazione di accoppiamento Drive a Maschio<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Questo protocollo descrive un apprendimento e memoria di Drosophila chiamato condizionamento di corteggiamento. Questo saggio classico si basa su una riduzione del comportamento maschile di corteggiamento dopo il rifiuto sessuale da parte di una femmina prematurata non ricettiva. Questa forma naturale di plasticità comportamentale può essere usata per testare l'apprendimento, la memoria a breve termine e la memoria a lungo termine.

Condizionamento del corteggiamento di Drosophila come misura dell&#39;apprendimento e della memoria

Questo lavoro descrive un semplice paradigma comportamentale che consente l'analisi dell'apprendimento associativo avversivo nei moscerini della frutta adulti. Il metodo si basa sulla soppressione del comportamento innato della geotaxi negativa a causa dell'associazione formata tra uno specifico contesto ambientale e una scossa elettrica.

Drosofila Comportamento di evitamento passivo come nuovo paradigma per studiare l'apprendimento avversivo associativo

Il disturbo dello spettro autistico (ASD) è associato a un comportamento sociale e comunicativo alterato e all'emergere di comportamenti ripetitivi. Per studiare l'interrelazione tra i geni ASD e i deficit comportamentali nel modello di Drosophila , in questo articolo vengono descritti cinque paradigmi comportamentali per valutare il distanziamento sociale, l'aggressività, il corteggiamento, l'adescamento e il comportamento di assuefazione.

Paradigmi per la valutazione comportamentale nel modello di Drosophila del disturbo dello spettro autistico

I modelli di roditori sono strumenti preziosi per studiare i comportamenti fondamentali legati al disturbo dello spettro autistico (ASD). In questo articolo, esponiamo due test comportamentali per modellare le caratteristiche principali dell'ASD nei topi: l'auto-toelettatura, che valuta il comportamento ripetitivo, e il test di interazione sociale a tre camere, che documenta le menomazioni sociali.

Strategie per valutare i comportamenti simil-autistici nei topi

Il metodo qui presentato prevede l'annotazione manuale dei filmati acquisiti di Drosophila melanogaster per specifici comportamenti di toelettatura. Consente di quantificare sia il numero di attacchi di toelettatura che il tempo complessivo trascorso a toelettatura per valutare i fenotipi di auto-toelettatura atipici.

Quantificazione del comportamento di toelettatura di Drosophila melanogaster per la valutazione di fenotipi di toelettatura eccessivi

Scopri come quantificare il comportamento di grooming in Drosophila utilizzando un saggio con colorante giallo brillante. Questo metodo rapido e robusto fornisce dati quantitativi per studi di neurobiologia e genetica comportamentale.

Quantificazione del comportamento del grooming di Drosophila

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