Name: Nerve-sparing Mid-ostruzione uretrale (Nemo) nel femminile piccoli roditori (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-04-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: Scopri la tecnica chirurgica Nemo per creare ostruzione uretrale parziale nei roditori femmina, risparmiando l'innervazione vescicale con bassa morbilità e mortalità nulla. Questo metodo consente di studiare i meccanismi di rigenerazione tessutale.

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Il lavoro è stato finanziato da una sovvenzione operativa CHIR (DJB).

Il seguente protocollo sperimentale è stato approvato dal comitato di cura degli animali dell&#39;istituzione. 1. Nemo ratti femmina <ol><li> Preparazione <ol><li> Posizionare un ratto femmina Sprague-Dawley del peso di circa 200 g sotto il 3% isoflurano anestesia, pesare l&#39;animale, e la rasatura e disinfettare la zona prepubico 3 volte utilizzando uno scrub chirurgico iodio. </li><li> Su una piastra elettrica, nastro arti posteriori e la coda verso il basso e cateterizzarla la vescica con un&#39;angiocatheter calibro 20, che è anche leggermente nastro adesivo per impedire scorrimento. </li></ol></li><li> Dissezione <ol><li> Utilizzare un bisturi per eseguire Ø 8 mm un&#39;incisione cutanea longitudinale dalla sinfisi pubica palpabile verso il meato uretrale. Sollevare la pelle su entrambi i lati per facilitare la chiusura della ferita dopo. </li><li> Sezionare bruscamente per identificare l&#39;uretra stent da longitudinale diffondendo con forbici sottili. Bel posto ganci della pelle di auto-mantenendo per aumentare l&#39;esposizionedell&#39;uretra. </li><li> Eseguire alcune delicato longitudinale diffusione usando forbici curve dorsale dell&#39;uretra per sviluppare il piano tra uretra e la vagina. Poi, senza mezzi termini passare una sutura 4-0 di seta dietro l&#39;uretra e preparare il doppio tiro di nodo di un chirurgo. </li></ol></li><li> Parziale ostruzione uretrale <ol><li> Rimuovere l&#39;angiocatheter, posizionare una barra metallica 0,9 millimetri parallelo all&#39;uretra, e poi stringere il nodo intorno all&#39;uretra e metallo asta, in modo che quest&#39;ultimo scorre ancora fuori facilmente in seguito. </li><li> Fissare il nodo con altri 3 tiri usando delicata tensione prima di rimuovere l&#39;asta. Tagliare la sutura termina circa 3 mm, 4 mm o se successivo rilascio di ostruzione è parte dell&#39;esperimento. </li></ol></li><li> chiusura della ferita <ol><li> Ravvicinare le ghiandole parauretrali utilizzando un unico punto sepolta di intrecciato riassorbibile sutura 4-0. </li><li> Chiudere la pelle con un punto materasso orizzontale sepolto utilizzando lo stesso sut assorbibileUre. Nota: Anche se può sembrare non convenzionale di utilizzare una sutura assorbibile per un punto della pelle-penetrante, non abbiamo incontrato complicazioni come infezioni della ferita, e che la rimozione di sutura può essere evitato. </li></ol></li><li> dopo la cura <ol><li> Iniettare buprenorfina 0,1 mg / kg per via sottocutanea prima di posizionare il ratto in una gabbia di recupero. </li><li> Offrire qualche dieta ripristino software per le prime 24 ore al singolo ratto ospitate. Dopo questo periodo, gli animali casa ancora nelle stesse coppie come prima della procedura purché facendo bene e appartengono allo stesso gruppo di trattamento. </li><li> Controllare i ratti quotidiani per dimensioni della vescica e il benessere generale; registrare il loro peso almeno settimanalmente. </li></ol></li></ol> 2. Nemo topi femmina <ol><li> Preparazione <ol><li> Posizionare una femmina C57BL / 6 topo peso di circa 18 g e procedere come indicato al punto 1.1.1. </li><li> Procedere come descritto nella fase 1.1.2, ad eccezione di utilizzare un ang 24-gaugeiocatheter. </li></ol></li><li> Dissezione <ol><li> Utilizzare un bisturi per eseguire 6 mm incisione cutanea longitudinale dalla sinfisi pubica palpabile verso il meato uretrale. </li><li> Sezionare bruscamente per identificare l&#39;uretra stent da longitudinale diffondendo con forbici sottili. Sollevare il fascio neuro-vascolare esecuzione ventrale sull&#39;uretra da analogo dissezione. </li><li> Eseguire alcune delicato longitudinale diffusione usando forbici curve dorsale dell&#39;uretra per sviluppare il piano tra uretra e la vagina. Poi, bruscamente passare una sutura 5-0 intrecciata non riassorbibile dietro l&#39;uretra e preparare il doppio tiro di nodo di un chirurgo. </li></ol></li><li> Parziale ostruzione uretrale <ol><li> Collegare l&#39;angiocatheter con una siringa da 1 ml e iniettare 0,1 ml di soluzione fisiologica nella vescica. </li><li> Posizionare un 26-gauge cannula parallela alla uretra. Stringere il nodo intorno all&#39;uretra e la cannula mentre si tira indietro l&#39;angioca. </li><li> Fissare il nodo con altri 3 giri utilizzando una leggera tensione prima di rimuovere la cannula. </li><li> Prova per l&#39;urina che compare alla carne su una leggera pressione sulla vescica animale; Allentare il legame se non è in grado di esprimere l&#39;urina. In caso contrario, tagliare le estremità della sutura di circa 3 mm di lunghezza. </li></ol></li><li> Chiusura della ferita <ol><li> Chiudere la pelle con un punto di materasso orizzontale sepolto usando una sutura assorbibile intrecciata 5-0. </li></ol></li><li> Dopo la cura <ol><li> Iniettare 0.1 mg / kg di buprenorfina sottocutanea prima di posizionare il mouse in una gabbia di recupero. </li><li> Offrire una dieta morbida di recupero per i primi 48 h al mouse unico alloggiato. Dopo questo periodo, gli animali di casa nuovamente negli stessi gruppi come prima della procedura forniscono che stanno facendo bene e appartengono allo stesso gruppo di trattamento. NOTA: I topi con una vescica distesa palpabile 24 ore dopo che la procedura che non si svuota durante la manipolazione è over-obstructed e morirà entro il next 1 - 2 giorni a meno che non ripreso sotto anestesia per la rimozione della legatura ostruente. </li><li> Controllare i topi quotidiani per dimensioni della vescica e il benessere generale; registrare il loro peso almeno settimanalmente. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Storage+and+voiding+symptoms%3A+pathophysiologic+aspects%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects.</a> Urology. 62 (5), 3-10 (2003).</li>
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<li>Jin, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+detrusor+overactivity+in+rats+after+relief+of+partial+urethral+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Persistent detrusor overactivity in rats after relief of partial urethral obstruction.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 301 (4), R896-R904 (2011).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Mortalità animale è una delle principali preoccupazioni del modello tradizionale della pBOO presso l&#39;uretra prossimale, al 15% o più in molte relazioni 10, 11, 13. NeMO sembra avere la mortalità minima quando viene applicata nei ratti femmina. Prossimale ostruzione uretrale nei topi è tecnicamente più impegnativo rispetto nei ratti, e quindi anche più inclini a complicazioni. Utilizzando una cannula 26-gaug...

Parziale di uscita della vescica ostruzione (pBOO) ha una elevata prevalenza e può causare grave disfunzione della vescica 1; lo spettro varia da malformazioni congenite come valvole uretrali posteriori o ipospadia, oltre stenosi uretrale acquisiti a iperplasia prostatica benigna. Quest&#39;ultima colpisce oltre il 30% degli uomini sessant&#39;anni e più 2. Grande peso del paziente e costi sanitari associati immensi pBOO garantiscono il notevole sforzo di ricerca messo in studiare il rimodellamento della vescica in risposta alla resistenza maggiore deflusso 3. Dal 2006 fino al 2015, oltre 220 PubMed indicizzato articoli sono stati pubblicati per quanto riguarda l&#39;effetto di pBOO sulla vescica urinaria. Sebbene modelli animali per pBOO sono stati concepiti in diverse specie 4, come il ratto 5, il coniglio 6, 7 maiale, e mouse 8, 9, probabilmente il modello animale più comunemente usati sono tuttavia ratti femmina sottoposti parziale ostruzione dell&#39;uretra prossimale; l&#39;accesso alle addome degli animali, esteriorizzante della vescica, e la dissezione attorno al collo della vescica sono inevitabili con questa tecnica tradizionale prossimale ostruzione uretrale. Variabilità nel grado di ostruzione e mortalità degli animali sono solo alcuni dei problemi associati a questa procedura 10, 11; abbiamo dimostrato che in sham operati animali, dissezione intorno all&#39;uretra prossimale provoca cambiamenti fisiologici che correlano con perdita delle fibre nervose al collo vescicale 12. Questa scoperta indica che il pBOO modello più comunemente utilizzati degli animali, che prevede l&#39;accesso alla uretra prossimale nei roditori di sesso femminile, porta ad un infortunio denervazione con i cambiamenti strutturali e funzionali associati della vescica, che colpiscesham e gli animali ostruite. Pertanto, è necessario un approccio evitare infortuni denervazione alternate. Il nostro laboratorio ha sviluppato e valutato un approccio nerve-sparing ostruzione Mid-uretrale (Nemo), efficace nell&#39;indurre cambiamenti ostruzione associate attesi nella vescica, come aumento della massa organo e urina residua, mentre gli animali sham-operati erano indistinguibili da animali di controllo non operati . Inoltre, lo sfintere uretrale striato rimasta intatta come si trova prossimale al livello di dissezione. Inoltre, la variabilità in aumento ostruzione indotta in massa vescica era significativamente inferiore a quello tradizionale ostruzione uretrale prossimale e la mortalità degli animali era zero. Abbiamo inoltre applicato con successo nemo in topi di sesso femminile con una mortalità inferiore al 10% negli animali ostruiti, mentre tutti i modelli pBOO per topi descritti fino ad oggi sono stati associati ad una mortalità intorno al 50%. Studiare rimodellamento della vescica nel contesto pBOO nei topi beneficerà di applicabilità di tutto lo spettro delle modificazioni transgeniche. Sezionare intorno alla metà uretra nei roditori femmina non induce cambiamenti strutturali o funzionali indesiderabili e di confusione nella vescica urinaria osservata nel modello ostruzione prossimale tradizionale. Tuttavia, inducendo una parziale ostruzione a livello intermedio uretrale induce ancora ipertrofia vescicale e aumentato urina residua, come previsto da un modello animale per pBOO. È importante sottolineare che l&#39;esecuzione di nemo in topi avvia un&#39;indagine di rimodellamento della vescica in pBOO ai metodi transgenici, che sono virtualmente disponibili nei roditori più grandi.

<table><tbody><tr><td>Femmina di ratto</td><td>Charles-River Canada</td><td>Sprague Dawley Rat (Crl:SD); Codice ceppo: 400</td><td>circa 200 g</td></tr><tr><td>Vaporizzatore Isoflorane</td><td>Benson medical industries inc.</td><td>TEC III Isoflurano; codice prodotto: 53-T3ISO&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Isoflorane</td><td>Fresenius Kabi Salute Animale</td><td>Isoflorane; codice prodotto CP0406V2</td><td>&nbsp; Flacone da 250 ml</td></tr><tr><td>Bisturi monouso</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>#15 Bisturi sterili in acciaio inossidabile; numero di catalogo 549-9-15S</td><td></td></tr><tr><td>Pinza per microscopia</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Pinze per microscopia Aesculap, Finepoint, 115mm; codice prodotto 5443</td><td></td></tr><tr><td>Pinze Adson</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Pinza per dissezione Aesculap Adson, curva, 120mm; codice prodotto 5002-9</td><td></td></tr><tr><td>Forbici chirurgiche curve</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Forbici chirurgiche, curve, acciaio inox, 105mm; numero di catalogo 1376</td><td></td></tr><tr><td>Asta in metallo inox da 0,9 mm</td><td>goodfellow.com</td><td>acciaio inox - AISI 316L Diametro filo: 0,9 mm; codice d'ordine 911-684-65</td><td></td></tr><tr><td>Ganci per pelle - autocostruiti in acciaio inox</td><td>goodfellow.com</td><td>acciaio inox - AISI 316L Diametro filo: 0,9 mm; codice d'ordine 911-684-65</td><td></td></tr><tr><td>4-0 Sutura in</td><td>seta esutures.com</td><td>4-0 Filo di seta nero 98"; codice prodotto LS640</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Sutura</td><td>Vicry esutures.com</td><td>5-0 Vicryl non tinto 27" cono RB-1; codice prodotto J213H</td><td></td></tr><tr><td>Porta ago</td><td>Medsupplier.com</td><td>Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Porta aghi - 5 1/2"; codice prodotto SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Temgesic (Buprenorfina)</td> <td>prima fornitura veterinaria</td><td>Buprenex 0.3MG/ml inj amps; articolo #075701</td><td></td></tr><tr><td>siringa da 1 ml con ago da 27 G</td><td>Fisher Scientific</td><td>BD&nbsp; Siringa per tubercolina, BD 309623</td><td></td></tr><tr><td>20 g Angiocath</td><td>Fisher Scientific</td><td>Andwin Scientific&nbsp; ANGIOCATH 20 GA; N. catalogo </td><td></td>NC9561906</tr><tr><td>Dieta di recupero</td><td>clearh2o</td><td>DietGel 31M; 72-08-5022</td><td></td></tr><tr><td>C57Bl/6 topi femmina</td><td>Charles-River Canada</td><td>C57BL/6 Topo (C57BL/6NCrI); Codice ceppo: 027</td><td>circa 18 g</td></tr><tr><td>24 G angiocath</td><td>Fisher Scientific</td><td>Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc.&nbsp;IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; N. catalogo </td><td></td>NC9814340</tr><tr><td>5-0 Ethibond</td><td>esutures.com</td><td>5-0 Ethibond verde 30" cono RB-1; codice prodotto X550H</td><td></td></tr><tr><td>Ago per siringa da 26 G</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>BD Precisionglide, calibro 26; z192392</td><td></td></tr> Soluzione <tr><td>salina normale</td><td>Baxter</td><td>per iniezione di cloruro di sodio allo 0,9%, USP, mini-bag da 100 ml; codice prodotto 2B0043</td><td></td></tr></tbody></table>

nerve-sparing mid-ostruzione uretrale (nemo) nel femminile piccoli roditori

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents

Parziale ostruzione della vescica (pBOO) ha una elevata prevalenza, provoca notevole onere del paziente, e costi sanitari enormi. Il modello animale più comune per indagare rimodellamento della vescica in pBOO sono roditori di sesso femminile sottoposte a parziale ostruzione al uretra prossimale. Variabilità nel grado di ostruzione e mortalità degli animali sono maggiori preoccupazioni con ostruzione prossimale. Inoltre, sezionare intorno al uretra e la vescica collo prossimale mette a repentaglio innervazione della vescica. Abbiamo sviluppato un modello un&#39;ostruzione uretrale metà nerve-sparing (Nemo) per pBOO evitando gli svantaggi del modello tradizionale. Ci siamo avvicinati l&#39;uretra appena inferiore alla sinfisi pubica, che ha ovviato alla necessità di laparotomia, nonché per la dissezione in questo settore; Inoltre, lo sfintere uretrale striato rimasta intatta. Abbiamo eseguito nemo in ratti femmina Sprague-Dawley (12 ostruzioni, 6 animali sham), così come nella femminili / topo BL6 C57 (20 ostruzioneS, 18 animali sham). Dopo due settimane abbiamo valutato la funzione della vescica, la massa della vescica e la massa corporea. Non avevamo alcuna mortalità tra i ratti femminili ostruiti o affamati; Come descritto per il tradizionale metodo pBOO prossimale, abbiamo legato la sutura attorno all&#39;uretra prossimale e un asta metallica temporaneamente posizionata di 0.9 mm. NeMO ha indotto un aumento dell&#39;85% della massa della vescica dopo due settimane, il volume medio di urina residuo è stato di 0,4 mL in ratti parzialmente ostruiti, mentre solo 0,03 mL negli animali affamati. Nei topi abbiamo testato 3 dimensioni di cannole che abbiamo posto lungo l&#39;uretra quando legano la sutura. Abbiamo scoperto che l&#39;utilizzo di una cannula da 27 gauge ha determinato una mortalità animale superiore al 50%; Posizionare la cannula a 25 gauge non ha dato la risposta desiderata in massa aumentante della vescica; Utilizzando una cannula a 26 gauge ha dato risultati favorevoli con una minima mortalità animale (1/8), ma un significativo aumento di massa della vescica di due volte.

Nerve-sparing Mid-ostruzione uretrale (Nemo) nei ratti femmina Mortalità Abbiamo effettuato un mid-ostruzione uretrale su più di 40 ratti femmina finora e non ha avuto mortalità. massa della vescica massa vescica ...

modellazione tradizionale di parziale ostruzione della vescica nei roditori è carico di mortalità degli animali. Una lesione denervazione dalla dissezione attorno alla uretra e la vescica collo prossimale è anche di grande preoccupazione. Abbiamo sviluppato e valutato un modello mid-ostruzione uretrale sicuro ed affidabile, evitando le carenze del modello tradizionale.

Nerve-sparing Mid-ostruzione uretrale (Nemo) nel femminile piccoli roditori

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal ...

L'obiettivo generale di questa tecnica è creare chirurgicamente un'occlusione parziale dell'uscita della vescica in piccoli roditori femmina, preservando l'innervazione dell'uscita della vescica, con una bassa morbilità animale, praticamente nessuna mortalità e poca variabilità nel grado di ostruzione. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande fondamentali sul rimodellamento della vescica indotto dall'ostruzione, ad esempio: quali sono i profili di espressione genica e le modifiche epigenetiche associate all'ostruzione dell'uscita? I principali vantaggi di questa tecnica sono la sua affidabilità e il fatto che evita la necessità di dissezione intorno al collo della vescica, preservando così l'innervazione dell'uscita della vescica.Le implicazioni di questa tecnica riguardano la terapia dell'ostruzione vescicale, poiché la fase successiva alla rimozione dell'ostruzione e alla ripresa può essere valutata in modo riproducibile. La ripresa dall'ostruzione vescicale è imprevedibile negli esseri umani. Utilizzando questa tecnica, è possibile rimuovere l'ostruzione, consentendo la valutazione delle risposte cellulari e tessutali associate al recupero dall'ostruzione.Abbiamo elaborato questo metodo quando abbiamo notato che l'occlusione tradizionale, più prossimale, era associata a una significativa disfunzione e discinesia vescicale indesiderabili, dopo dissezioni fittizie senza effettiva ostruzione chirurgica. Iniziare posizionando un ratto femmina di 200 grammi su un tappetino riscaldante e fissando gli arti e la coda con del nastro adesivo. Quindi disinfettare e posizionare teli sterili senza coprire l'addome inferiore.Quindi utilizzare un angiocatetere da 20 gauge per cateterizzare la vescica e fissare il catetere con del nastro. Successivamente, sotto un microscopio stereoscopico, utilizzare un bisturi per praticare un'incisione cutanea longitudinale di otto millimetri a partire dalla sinfisi pubica palpabile in direzione del meato uretrale. Sollevare la cute su entrambi i lati dell'incisione per facilitarne la successiva chiusura ed utilizzare forbici fini per dissezionare in modo ottuso la separazione longitudinale al fine di identificare l'uretra atresica.Posizionare ganci cutanei fini auto-tenenti per migliorare l'esposizione dell'uretra e utilizzare un'analoga dissezione ottusa per sollevare il fascio neurovascolare che decorre in senso ventrale. Utilizzando forbici curve e una delicata apertura longitudinale, sviluppare il piano tra l'uretra e la vagina, dorsalmente all'uretra. Passare ora ottusamente un punto di sutura in seta 4-0 dietro l'uretra e preparare il doppio nodo del nodo chirurgico.Quindi rimuovere l'angiocatetere e posizionare un'asta metallica di 0,9 millimetri parallela all'uretra. Stringere il nodo intorno all'uretra e all'asta metallica, in modo che l'asta possa ancora scivolare facilmente, e fissare il nodo con altri tre giri delicati. Dopo l'ultimo giro, rimuovere l'asta e tagliare le estremit&agrave; del filo sutura a una lunghezza di circa tre-quattro millimetri, utilizzando un punto singolo variato di filo sutura assorbibile intrecciato 4-0, per avvicinare le ghiandole parauretrali.Quindi chiudere la cute con una sutura orizzontale a punto materasso variato, utilizzando lo stesso filo riassorbibile, e iniettare l'analgesia appropriata. Per l'ostruzione mid-uretrale con risparmio nervoso, o NeMO nei topi, posizionare un topo femmina C-57 black-6 di 18 grammi su un tappetino riscaldante in posizione supina e fissare gli arti con del nastro adesivo. Quindi disinfettare e posizionare teli sterili senza coprire l'addome inferiore.Successivamente, sotto un microscopio stereoscopico, cateterizzare la vescica con un angiocatetere da 24 gauge e fissare il catetere con del nastro adesivo. Sotto un microscopio stereoscopico, utilizzare un bisturi per praticare un'incisione cutanea longitudinale di sei millimetri, dalla sinfisi pubica palpabile verso il meato uretrale. Quindi eseguire una dissezione ottusa con forbici fini per identificare l'uretra ristretta.Sviluppare delicatamente con un movimento longitudinale, in direzione dorsale rispetto all'uretra, il piano tra l'uretra e la vagina. Quindi passare ottusamente una sutura non riassorbibile intrecciata 5-0 dietro l'uretra e preparare il doppio nodo del nodo chirurgico. Collegare ora una siringa da un millilitro all'angiocatetere e iniettare 0,1 millilitri di soluzione fisiologica nella vescica.Una volta somministrato tutto il liquido fisiologico, utilizzare il nodo per fissare delicatamente una cannula da 26 gauge, parallela all'uretra, mentre si ritira l'angiocatetere. Fissare il nodo con altri tre giri delicati, quindi rimuovere la cannula e applicare una leggera pressione sulla vescica per verificare la fuoriuscita di urina dal meato. Tagliare i capi del filo sutura a circa tre millimetri.Quindi utilizzare un filo riassorbibile intrecciato 5-0 per chiudere la cute con punti a materasso orizzontale variato e iniettare l'analgesia appropriata prima di posizionare il topo in una gabbia di recupero. Il rapporto medio tra massa vescicale relativa e massa corporea nei ratti sottoposti a sham NeMO è dello 0,33% due settimane dopo l'intervento, mentre nei ratti con ostruzione è dello 0,6%, con un aumento dell'85% della massa vescicale relativa in questi animali. I ratti sottoposti a sham NeMO mostrano praticamente nessun residuo urinario aspirabile mediante puntura vescicale al momento del prelievo dell'organo.Gli animali ostruiti, al contrario, mostrano un volume medio significativamente maggiore di urina residua, pari a 0,42 millilitri. Nel complesso, la mortalità nei topi sottoposti a intervento fittizio e nei topi NeMO aumenta all'aumentare della riduzione delle dimensioni della cannula di sostegno. Inoltre, l'uso di una cannula da 25 gauge non aumenta in modo efficace il rapporto massa della vescica/massa corporea nei topi, mentre l'uso di una cannula da 26 gauge determina un aumento di oltre due volte della massa relativa della vescica.Quando viene applicato un placeholder da 27 gauge, si osserva un aumento superiore al 60% della massa vescicale relativa due settimane dopo l'intervento. Inoltre, l'ostruzione parziale dell'orifizio vescicale con una cannula da 25 o 26 gauge lungo l'uretra non incide sul volume residuo di urina durante il periodo sperimentale di due settimane. Sebbene gli animali con un placeholder da 27 gauge mostrino un aumento medio del volume urinario residuo pari a tre volte rispetto ai rispettivi controlli sottoposti a intervento fittizio.Dopo aver acquisito un po' di esperienza, sia la procedura NeMO che quella NeMO sham possono essere completate in 10-15 minuti. Quando si esegue NeMO nei topi, è importante ricordare di escludere la possibilità di un'occlusione completa, espellendo delicatamente una piccola quantità di urina prima di chiudere l'animale. Successivamente a questa procedura, altri metodi, come l'inclusione di animali sham prossimali, possono essere effettuati per rispondere ad ulteriori domande riguardo al contributo relativo o all'associazione di stimoli neurogeni locali a livello dell'orifizio nel determinare disfunzione vescicale, displasia e alterata regolazione genica.Ci si aspetta che questa tecnica apra la strada ai ricercatori nel campo della miopatia ostruttiva della vescica, permettendo di esplorare come le alterazioni anatomiche e neurogeniche dell'imbocco vescicale contribuiscano alla formazione e alla reversibilità dell'ostruzione del flusso in uscita.

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