Utilizzando biologia sintetica per Ingegnere cellule viventi che si interfacciano con materiali programmabili

L'obiettivo generale di queste procedure è quello di utilizzare E.coli ingegnerizzato sinteticamente per controllare e manipolare le superfici dei materiali programmabili combinando la modificazione genetica e le strategie di funzionalizzazione delle superfici. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave in campi come la medicina molecolare e il monitoraggio ambientale. Utilizzando cellule geneticamente programmate per interpretare un ambiente locale e modificare di conseguenza un materiale funzionalizzato, stiamo fornendo uno strumento modulare per un'ampia varietà di applicazioni.

Il vantaggio principale di questa tecnica è che le cellule viventi sono in grado di agire come sensori dinamici in grado di leggere, elaborare e registrare le condizioni che le circondano tramite interfacce funzionalizzate. Dopo aver preparato le soluzioni e raccolto il surnatante arricchito con biotina da E.coli produttore di biotina secondo il protocollo di testo, aggiungere 1,4 microlitri di soluzione SPDP a 20 microlitri di streptavidina o soluzione SA. Avvolgere la provetta in un foglio di alluminio e incubarla a temperatura ambiente per un'ora e mezza per consentire al reticolante SPDP di legarsi all'SA tramite un gruppo amminico, formando un SA piridilditio-attivato. Dopo l'incubazione, aggiungere 2,4 microlitri di soluzione DTT alla provetta e incubare il campione a temperatura ambiente per un'ora per consentire una scissione della piridina-2-tione con conseguente SA attivato dal sulfidrile. Quindi, aggiungere 7,5 microlitri di soluzione SCC a 72 microlitri di soluzione HRP, avvolgerla in un foglio di alluminio e incubarla a temperatura ambiente per un'ora e mezza.