Name: Murino discendente anteriore sinistra (LAD) Coronary legatura dellarteria: una migliore e semplificata del modello di infarto miocardico (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-04-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 39 s
Description: Impara la legatura dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra (LAD) nel topo per studiare l'infarto miocardico. Questa tecnica chirurgica minimamente invasiva consente di analizzare i meccanismi di recupero cardiaco post-infartuale.

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Questo modello è stato sviluppato con il supporto del National Institute of General Medical Sciences (NIGMS)/del National Institute of Health (NIH) grant 1P20GM103652 (Project# 3) (a MRA) e dell'American Heart Association (AHA) Grant-in-Aid 14GRNT20460291 (a MRA); del governo brasiliano che concede CAPES (a KR e FR); e di un premio LINK della Brown University (a IM). Riconosciamo anche l'eccezionale supporto tecnico dei nostri veterinari e del personale della struttura per animali.

Questo protocollo animale è stato esaminato e approvato dal Comitato Istituzionale cura degli animali ed uso (IACUC) a Rhode Island Hospital. 1. Anestesia e intubazione <ol><li> Pesare il mouse per calcolare il dosaggio del farmaco dolore post-operatorio. </li><li> Posizionare il mouse in una camera di induzione e fornire 4% isoflurano per 9-10 min, monitorando l&#39;animale in tutto. Attivare uno sterilizzatore a caldo tallone in modo che il dispositivo può preriscaldare a circa 250 ° C. Il preriscaldamento si 15 - 20 min. </li><li> Una volta che il mouse raggiunge un profondo piano di anestesia, con un tasso di respirazione di circa 32 respiri / min, posizionare il topo supina su un bordo polistirolo e utilizzare un elastico fissato sotto all&#39;inizio incisivi per tenere la bocca aperta. Confermare la sedazione eseguendo un pizzico dito del piede. Posizionare un illuminatore ad alta intensità sopra il mouse in modo che l&#39;orofaringe può essere visualizzato. </li><li> Utilizzare pinze curve per aprire la mascella e un&#39;altra coppiadi pinze per sollevare la linguetta fuori strada. Assicurati di intubare mentre posizionata in corrispondenza o leggermente al di sotto degli occhi a livello con il corpo del mouse. Si raccomanda l&#39;uso di occhialini chirurgici. </li><li> Visualizza l&#39;apertura e la chiusura delle corde vocali. Quando aperto, inserire un calibro 20, 1-a endovenosa (IV) catetere con un ago introduttore smussato-punta. Utilizzare l&#39;ago per guidare il catetere per l&#39;apertura tracheale, ma evitare di inserire l&#39;ago nella trachea. Verifica del corretto posizionamento può essere fatto utilizzando una pipetta di trasferimento di plastica. </li><li> Trasferire il mouse intubato ad una superficie operativo dotato di un dispositivo di riscaldamento. Collegare il mouse per un piccolo ventilatore roditore impostato su un volume di eiezione di 150 microlitri / ictus e una frequenza corsa di 130 colpi / min. </li><li> Consegnare 2,5% isoflurano. Verificare l&#39;intubazione controllando per sollevamento del torace bilaterale. Verificare anestesia eseguendo un pizzico punta. Il mouse può avere bisogno di 5 - 10 minuti sul ventilatore per diventare pienamente anestetizzati. </li></ol><ol><li> Nastro lungo il tubo di intubazione nel sito di collegamento tra il ventilatore e il catetere IV. Tape le estremità. Mettere gocce lubrificanti sterili sugli occhi. </li><li> Tagliare la parte ventrale sinistro del torace con un rasoio elettrico. Rispolverare il pelo rasato con panni asciutti e applicare un piccolo strato di crema depilatoria usando un tampone di cotone sterile. La crema deve rimanere in contatto con i follicoli dei capelli per circa 30 - 45 s. </li><li> Mentre i processi crema, posizionare tre tamponi di cotone sterile in tre provette da 1,5 mL riempito con Betadine ammollo. Utilizzando salviette inumidite con acqua distillata, delicatamente spazzare via la panna e pelliccia. </li><li> Pulire il campo chirurgico tre volte, alternando Betadine e sterili 70% pastiglie isopropanolo preparazione, pulizia in un movimento circolare dal centro alla periferia. Posizionare un telo sterile con un foro quarto imprese sopra il campo operatorio del mouse. </li><li> Pulire la zona circostante il mouse con il 70% di etanolo. Verificare l&#39;anestesia ancora una volta con un pizzico dito del piede. </li></ol> 3. LAD legatura <ol><li> Posizionare gli strumenti chirurgici sterilizzati in autoclave a caldo sterilizzatore tallone preriscaldato a 250 ° C per circa 20 s. Posizionare gli strumenti sterilizzati in autoclave sterile telo chirurgico. Munirsi di guanti chirurgici. </li><li> Utilizzare pinze fine-tip per sollevare delicatamente la pelle in un punto a circa 5 mm a sinistra della cartilagine xifoide prominente. Utilizzare un bisturi chirurgico con una lama n ° 10 per creare un&#39;incisione verticale nella pelle da questo punto in alto, al livello del manubrio. </li><li> Utilizzare pinze curve per separare delicatamente gli strati della pelle e dei muscoli. Aprire lo strato muscolare, dopo l&#39;incisione cutanea. Inserire due 5-0 suture in polipropilene attraverso lo strato muscolare, uno su ciascun lato dell&#39;incisione, e fissare i punti di sutura temporaneamente con morsetti per tenere lo strato muscolare aperta. </li><li> Identificare e fare un&#39;incisione nel terzo spazio intercostale, a seguito dellaAngolo naturale della gabbia toracica. Rimuovere il nastro dalle estremità sinistro del mouse e fissare il piede posteriore sinistro al suo piede posteriore destra con del nastro adesivo. Tagliare un pezzo di nastro più lungo e fissare il piede anteriore sinistro alla superficie operativa in una posizione leggermente elevata. Pulire i guanti con il 70% di etanolo. </li><li> Utilizzare un riavvolgitore per diffondere delicatamente a parte i 3 ° e 4 ° costole. Tagliare una piccola sezione di garza sterile, circa 1 x ½, ed immergerlo in soluzione fisiologica 0,9% sterile. Spremere il eccesso salina e utilizzare pinze per inserire delicatamente la garza contro polmone sinistro per evitare danni ai polmoni accidentali durante la procedura. </li><li> Rimuovere delicatamente il pericardio sottile con una pinza. </li><li> Strappare una piccola quantità di cotone fuori un tampone di cotone sterile e rotolare in una piccola sfera. Immergere il batuffolo di cotone sterile in soluzione fisiologica 0,9% e tamponare delicatamente sulla superficie del cuore di apprezzare le arterie. Spingere delicatamente il padiglione auricolare sinistro verso l&#39;alto e individuare le arterie coronarie sottoNeath. </li><li> Identificare il LAD e passare una sutura 8-0 nylon sotto il LAD; completa due tiri per fissare la legatura. Se la legatura è successo, il ventricolo sinistro distale dalla volontà Blanch legatura. </li><li> Utilizzando pinze, rimuovere la garza inseriti in precedenza, e quindi rimuovere delicatamente il divaricatore. Inserire un 6-a, 25-gauge tubo flessibile collegato a un ago calibro 25 nella cavità toracica attraverso l&#39;apertura toracotomia. Anticipo di circa 1 - 2 in di tubo nello spazio sopra il polmone sinistro. Ritorna il mouse in una posizione supina e pulire i guanti con il 70% di etanolo. </li><li> Utilizzare 5-0 suture polipropilene in un semplice schema interrotto per chiudere la cassa toracica, mantenendo il tubo toracico in posizione. Rimuovere i due punti di sutura che tengono lo strato muscolare aperta. Utilizzare 5-0 punti di sutura in polipropilene in un semplice modello continuo di chiudere lo strato muscolare, mantenendo ancora una volta il tubo toracico al suo posto. </li><li> Attaccare una siringa da 1 ml al ago calibro 25 sul tubo toracico. Tirare delicatamente verso l&#39;alto il grande passor contemporaneamente gradualmente estrarre il tubo toracico dalla cavità toracica con una pinza. Estrarre il tubo lentamente, come questo passaggio rimuove l&#39;aria in eccesso e sangue, che altrimenti intrappolata nella cavità toracica e risultato in una pneumotorace. </li><li> Una volta che la siringa è pieno, staccare la siringa dal ago e smaltire i rifiuti in un bicchiere rifiuti o lavandino. Continuare questa procedura finché il tubo toracico è completamente estratto. Assicurarsi che il torace è chiuso. </li><li> Diminuire l&#39;isoflurano al 1,5%. Chiudere la pelle con 4-0 punti di sutura in polipropilene in un semplice schema interrotto. Girare il vaporizzatore isoflurano off. </li><li> Somministrare 0,1 mg di buprenorfina / ml in 0,9% di soluzione salina tramite un&#39;iniezione intraperitoneale (IP). applicare topicamente 2 mg / mL di lidocaina con 2 mg / ml in bupivacaina 0,9% soluzione salina per l&#39;incisione. Somministrare tra i 200 - 500 microlitri di soluzione salina allo 0,9% con un&#39;iniezione sottocutanea, scalando l&#39;importo salina al peso del mouse. </li><li> Attendere 5 minuti dopo administering i farmaci per il dolore per rimuovere il mouse dal tubo di intubazione. Questo aiuta nella transizione dal ventilatore. <ol><li> Se il mouse non dispone di un aumento del torace bilaterale volta fuori il ventilatore, eseguire la decompressione ago. Per fare questo, introdurre un ago sterile da 25 gauge e una siringa da 1 ml tra i 3 ° e 4 ° costole fino ad entrare nella cavità toracica, indicato con una diminuzione improvvisa della resistenza. Tirare verso l&#39;alto delicatamente lo stantuffo per eliminare l&#39;aria in eccesso. </li></ol></li><li> Quando il mouse dimostra un tasso di respirazione bilaterale adeguata e la profondità e risponde ad un pizzico dito del piede, posizionare il mouse in una gabbia di recupero pulito sotto una lampada di calore. Fornire il mouse con alimento umido e una bottiglia di acqua, controllando in una cappa a flusso laminare per 15 - 20 min. Monitor per uno sforzo esagerato respirazione, sanguinamento eccessivo, o altre complicazioni potenzialmente letali. </li><li> Per i prossimi tre giorni, somministrare 0,1 mg / ml di dolore buprenorfina farmaco tramite un IPjection due volte al giorno. Monitorare il mouse quotidiano. </li></ol>

<ol><li>Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+directions+for+protecting+the+heart+against+ischaemia-reperfusion+injury%3A+targeting+the+Reperfusion+Injury+Salvage+Kinase+%28RISK%29-pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">New directions for protecting the heart against ischaemia-reperfusion injury: targeting the Reperfusion Injury Salvage Kinase (RISK)-pathway.</a> Cardiovasc Res. 61 (3), 448-460 (2004).</li>
<li>Roffi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2015+ESC+Guidelines+for+the+management+of+acute+coronary+syndromes+in+patients+presenting+without+persistent+ST-segment+elevation%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">2015 ESC Guidelines for the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation.</a> Eur Heart J. 37 (3), 267-315 (2015).</li>
<li>Kumar, A., Cannon, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+Coronary+Syndromes%3A+Diagnosis+and+Management%2C+Part+I%5BTitle%5D)+AND+%22Mayo+Clin+Proc%22%5BJournal%5D)">Acute Coronary Syndromes: Diagnosis and Management, Part I.</a> Mayo Clin Proc. 84 (10), 917-938 (2009).</li>
<li>Eitan, A., Nikolsky, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antithrombotic+therapy+in+patients+with+acute+coronary+syndromes%3A+how+to+make+the+right+choice%5BTitle%5D)+AND+%22Minerva+Med%22%5BJournal%5D)">Antithrombotic therapy in patients with acute coronary syndromes: how to make the right choice.</a> Minerva Med. 104 (4), 357-381 (2013).</li>
<li>Abbate, A., Bussani, R., Amin, M. S., Vetrovec, G. W., Baldi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+myocardial+infarction+and+heart+failure%3A+role+of+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Acute myocardial infarction and heart failure: role of apoptosis.</a> Int J Biochem Cell Biol. 38 (11), 1834-1840 (2006).</li>
<li>Zheng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nebivolol+protects+against+myocardial+infarction+injury+via+stimulation+of+beta+3-adrenergic+receptors+and+nitric+oxide+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Nebivolol protects against myocardial infarction injury via stimulation of beta 3-adrenergic receptors and nitric oxide signaling.</a> PLOS ONE. 9 (5), 98179(2014).</li>
<li>Tarnavski, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+cardiac+surgery%3A+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiol Genomics. 16 (3), 349-360 (2004).</li>
<li>Buitrago, S., Martin, T. E., Tetens-Woodring, J., Belicha-Villanueva, A., Wilding, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+and+Efficacy+of+Various+Combinations+of+Injectable+Anesthetics+in+BALB%2Fc+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Assoc+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Safety and Efficacy of Various Combinations of Injectable Anesthetics in BALB/c Mice.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 47 (1), 11-17 (2008).</li>
<li>Kolk, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LAD-Ligation%3A+A+Murine+Model+of+Myocardial+Infarction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction.</a> J Vis Exp. (32), e1438(2009).</li>
<li>Wu, Y., Yin, X., Wijaya, C., Huang, M. H., McConnell, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+myocardial+infarction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments+%3A+J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Acute myocardial infarction in rats.</a> Journal of visualized experiments : J Vis Exp. (48), (2011).</li>
<li>Ferrera, R., Benhabbouche, S., Bopassa, J. C., Li, B., Ovize, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One+hour+reperfusion+is+enough+to+assess+function+and+infarct+size+with+TTC+staining+in+Langendorff+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Drugs+Ther%22%5BJournal%5D)">One hour reperfusion is enough to assess function and infarct size with TTC staining in Langendorff rat model.</a> Cardiovasc Drugs Ther. 23 (4), 327-331 (2009).</li>
<li>Zeng, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+5-ethynyl-2%27-deoxyuridine+staining+as+a+sensitive+and+reliable+method+for+studying+cell+proliferation+in+the+adult+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Evaluation of 5-ethynyl-2'-deoxyuridine staining as a sensitive and reliable method for studying cell proliferation in the adult nervous system.</a> Brain Res. 1319, 21-32 (2010).</li>
</ol>

Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.

Con un uso crescente del modello MI nei laboratori, la procedura descritta mira ad aumentare il tasso di efficienza e la sopravvivenza dei topi, riducendo al minimo il loro dolore post-operatorio e disagio. Questo protocollo è ridurre al minimo la mortalità facendo numerosi miglioramenti a vari aspetti della procedura LAD legatura. Ci sono alcune distinzioni. Alcuni studi di intubazione murini che utilizzano ketamina e xilazina con isoflurano per l&#39;induzione, grazie al vantaggio della loro durata de...

Malattia coronarica, o di ACS, è l&#39;evento cardiovascolare più diffusa e sarà considerato la principale causa di morbilità e mortalità in tutto il mondo nel 2020 1. La causa di ACS è la presenza di una trombosi infarto a causa della rottura di una placca aterosclerotica coronarica che blocca o riduce il flusso di sangue al tessuto cardiaco 2. Pertanto, ci sono segni clinici compatibili con la presenza di ischemia miocardica acuta, come infarto del miocardio (MI) 3, 4. MI porta ad una perdita di massa dei cardiomiociti e una progressione di rimodellamento ventricolare patologica, che può portare alla disfunzione ventricolare e di insufficienza cardiaca 5, 6. Uno dei modi più efficaci per lo studio IHD è stato quello di imitare l&#39;infarto del miocardio umano in un modello animale. Ciò si ottiene occludendo il LAD intopi. Utilizzando questo modello, studiamo come il cuore può essere protetto dai danni derivanti da IHD. Negli ultimi dieci anni, i ricercatori hanno spostato da utilizzando modelli animali più grandi per gli animali più piccoli, tra cui il passaggio da ratti ai topi. Il modello di topo più piccola sta cominciando a essere preferito per molte ragioni, tra le loro piccole dimensioni, di grandi dimensioni lettiera, a basso costo per mantenere, e di breve periodo di gestazione, nonché per la disponibilità espansiva di transgenici e knockout gene modelli 7. Anche se i topi sono di piccole dimensioni, nuovi strumenti chirurgici appositamente pensate per loro hanno aiutato in questo sviluppo. Il nostro metodo utilizza questi nuovi strumenti chirurgici. Mentre diversi metodi implementano una tracheotomia invasivo, usiamo un metodo meno invasivo di intubazione endotracheale. Utilizzando illuminazione zenitale dell&#39;orofaringe, abbiamo intubare senza creare incisioni, fornendo un&#39;esperienza più sicuro e meno traumatico per tegli animali. Il mouse viene poi posto su un ventilatore e continuò a isoflurano durante l&#39;intera procedura. A causa della breve durata dell&#39;anestesia prodotta dalla droga, ci vogliono solo pochi minuti per consentire all&#39;animale di riprendersi dall&#39;anestesia una volta che è interrotto. Il nostro modello chirurgico include anche una toracentesi minimamente invasiva. La facilità di rimozione del sangue e aria in eccesso dalla cavità toracica utilizzando toracentesi attraverso l&#39;incisione toracotomia originale ha inviato una complicanza postoperatoria comune dei legatura LAD: il pneumotorace. Questo metodo, che elimina la necessità per le due incisioni supplementari usati in altri metodi, uno per la tracheotomia e un altro per le toracentesi-ha prodotto un minor numero di complicanze post-chirurgiche e ha drasticamente ridotto la mortalità.

<table><tbody><tr><td>Sorgente luminosa ad alta intensità</td><td>Apparecchio Harvard</td><td>72-0215</td><td></td></tr><tr><td>Piattaforma operativa SurgiSuite</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>SurgiSuite</td><td>Utilizza un cuscinetto riscaldante a infrarossi lontani ricaricabile e alimentato a batteria. Carica durante la notte prima dell'intervento chirurgico.</td></tr><tr><td>Kit di illuminazione a LED SurgiSuite</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>SURGI-5003</td><td></td></tr><tr><td>Sterilizzatore a perline calde</td><td>Strumenti per la scienza fine</td><td>18000-45</td><td>Il preriscaldamento richiede 15 - 20 minuti. Gli strumenti impiegano 20 secondi per sterilizzare.</td></tr><tr><td>Sistema di anestesia per piccoli roditori</td><td>VetEquip Inc.</td><td>901810</td><td></td></tr><tr><td>Isofluorane</td><td>Piramal Enterprises</td><td>66794-017-10</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>Rhode Island Hospital Pharmacy</td><td>NDC 12496-0757-1, 12496-0757-5</td><td></td></tr><tr><td>Lenti chirurgiche</td><td>Roboz</td><td>RS-6687</td><td></td></tr><tr><td>Piccolo ventilatore per roditori</td><td>Harvard Apparatus</td><td>73-0043</td><td></td></tr><tr><td>Gocce lubrificanti</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>19-898-350</td><td></td></tr><tr><td>Rasoio elettrico</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>CL 9990-1201</td><td></td></tr><tr><td>Crema depilatoria</td><td>Nair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Medical Tape</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>18-999-380</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>19-027136</td><td></td></tr><tr><td>Salviette isopropanolo al 70%</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>22-363-750</td><td></td></tr><tr><td>Teli chirurgici</td><td>Braintree</td><td>SP-TS</td><td></td></tr><tr><td>Guanti chirurgici</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>18999102D</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Suture in polipropilene&nbsp;</td><td>Ethicon</td><td>8630G</td><td></td></tr><tr><td>8-0 Suture in nylon Strumenti per la</td><td>scienza fine</td><td>12051-08</td><td></td></tr><tr><td>Tubo polimerizzato al platino</td><td>Apparecchio Harvard</td><td>72-1042&nbsp;</td><td>0,3 mm di diametro interno x 0,6 mm di diametro esterno</td></tr><tr><td>0,9% soluzione salina</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>19-310-207</td><td></td></tr><tr><td>4-0 suture in polipropilene</td><td>Ethicon</td><td>8631G</td><td></td></tr><tr><td>1 siringa CC con ago calibro 25</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14-826-100</td><td></td></tr><tr><td>Forbici</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INSS600225</td><td></td></tr><tr><td>Pinze</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS700100</td><td></td></tr><tr><td>Cotton Swab</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>23-400-118</td><td></td></tr><tr><td>Catetere IV, calibro 20</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>&nbsp; </td><td></td></tr><tr><td>Divaricatore</td> NC9892181 <td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS 750369</td><td></td></tr><tr><td>Forcipe</td><td>Fine Science Tools</td><td>11003-12</td><td></td></tr><tr><td>Pinze da dissezione, Dritto</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS 700101</td><td></td></tr><tr><td>Pinze da dissezione, Curvo</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS 700103</td><td></td></tr><tr><td>Pinze emostatiche, Dritto</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS 750451</td><td></td></tr><tr><td>Pinza emostatica,</td> curva <td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS 750452</td><td></td></tr><tr><td>Pinza per tessuti</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS 700131</td><td></td></tr><tr><td>Porta ago</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS 600109</td><td></td></tr><tr><td>Forbici&nbsp;</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS 600225</td><td></td></tr></tbody></table>

murino discendente anteriore sinistra (lad) coronary legatura dell&#39;arteria: una migliore e semplificata del modello di infarto miocardico

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

cardiopatia ischemica (IHD), o sindrome coronarica acuta (ACS), è una delle principali cause di morte negli Stati Uniti. IHD è caratterizzata da un ridotto apporto di sangue al cuore, con conseguente perdita di ossigeno e la necrosi conseguente del muscolo cardiaco. Il modello MI ha guadagnato popolarità per il suo uso come un modello di ischemia-riperfusione a breve termine e un modello di legatura permanente a lungo termine. Qui di seguito, si descrive un metodo affidabile per la legatura permanente della LAD. Con il mouse tecnologia di ingegneria genetica sempre più avanzati, e con una crescente disponibilità di strumenti chirurgici murini di qualità, il mouse è diventato un modello popolare per interventi chirurgici MI. Il nostro modello chirurgico incorpora l&#39;uso di un anestetico facilmente reversibile per il rapido recupero del mouse; un&#39;intubazione endotracheale minimamente invasivo senza coinvolgere una tracheotomia; ed una toracentesi attraverso il sito toracotomia originale senza creare un&#39;incisione supplementare nel petto, come èfatto in alcuni altri metodi, per rimuovere efficacemente sangue in eccesso e l&#39;aria dalla cavità toracica. Questo metodo è relativamente meno invasivo rispetto ad altri metodi, che riduce drasticamente le complicanze e mortalità chirurgiche e post-chirurgiche e migliora la riproducibilità.

I topi sono eutanasia ventotto giorni dopo l&#39;intervento, e il cuore vengono raccolti ed esaminati. I topi vengono anestetizzati con il 50 - 75 mg / kg di ketamina e 5 - 10 mg / kg xilazina. Quando l&#39;animale è sotto anestesia adeguata, la cavità toracica viene aperto, e utilizzando un ago 23-gauge, cloruro di potassio freddo (KCl, 30 mM) viene iniettata nella regione basale posteriore del cuore. Il cuore è arrestato in diastole. Per ulteriore convalida della ligazione, il cuore vi...

Forniamo un metodo affidabile per la legatura dell'arteria discendente anteriore sinistra (LAD) in un modello murino. Questo metodo è relativamente meno invasivo di altri metodi, che coinvolgono l'intubazione endotracheale, un approccio di toracotomia sul lato sinistro e la toracentesi. Questo metodo può essere utilizzato come modello per l'infarto miocardico acuto e cronico.

Murino discendente anteriore sinistra (LAD) Coronary legatura dell&#39;arteria: una migliore e semplificata del modello di infarto miocardico

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

L'obiettivo generale di questa procedura è indurre un infarto miocardico in un topo mediante legatura dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra. Questo metodo può contribuire a rispondere a domande fondamentali nel campo cardiovascolare, ad esempio se la sovraespressione o l'eliminazione (knock out) di determinati geni possa influenzare il recupero del cuore dopo un infarto miocardico. Il principale vantaggio di questa tecnica è che l'intervento è meno invasivo rispetto ad altri modelli che simulano l'infarto miocardico e determina un tempo di recupero più rapido con minori complicazioni.Generalmente, le persone nuove a questo metodo incontreranno difficoltà poiché l'intubazione endotracheale e l'identificazione dell'arteria discendente anteriore (LAD) richiedono pratica sotto la guida di un istruttore qualificato. Una dimostrazione visiva di questa tecnica è fondamentale, poiché l'individuazione e la valutazione della LAD risultano difficili da apprendere senza esperienza o formazione. Prima di sedare l'animale, iniziare a riscaldare lo sterilizzatore a sfera fino a 250 gradi Celsius, operazione che può richiedere fino a 20 minuti.Verificare che il topo sia fortemente

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Questo video illustra come utilizzare un modello veloce e affidabile per lo studio dei processi fisiopatologici pathobiological e di ischemia miocardica.

LAD-Legatura: un modello murino di infarto miocardico

Il modello di topo di infarto miocardico acuto (AMI) è utile per studiare la conseguenza di un infarto miocardico sulla funzione cardiaca fisiopatologici e fisiologici.

Infarto acuto del miocardio in topi

La procedura chirurgica utilizzata per indurre infarto miocardico sperimentale in topi inizia con toracotomia sinistra tra il terzo e il quarto nervature per visualizzare la superficie anteriore del cuore e polmone sinistro. Coronaria sinistra viene ligato, il torace è chiuso e il mouse viene consentito di recuperare spontaneamente.

Tecnica modificata di legatura dell&#39;arteria coronarica in Mouse

Si introduce un metodo chirurgico per indurre sperimentale ischemia / riperfusione (I / R) pregiudizio per simulare infarto del miocardio (MI) in modelli murini che consente una maggiore chiarezza posizionamento della legatura sulla discendente anteriore sinistra (LAD) per migliorare la riproducibilità di esperimenti MI nei topi.

Un modello murino di ischemia miocardica e riperfusione lesioni da legatura della arteria discendente anteriore sinistra

L'insufficienza cardiaca è la principale causa di ospedalizzazione e una delle principali cause di mortalità. Un modello di legatura permanente dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra nei topi è stato applicato per studiare il rimodellamento ventricolare e la disfunzione cardiaca post-infarto del miocardio. Viene presentata la tecnica delle misurazioni emodinamiche invasive nei topi.

Legatura permanente dell&#39;arteria discendente anteriore sinistra coronarica nei topi: un modello di post-infarto rimodellante miocardico e insufficienza cardiaca

Qui descriviamo una procedura chirurgica che mostra come ottenere una legatura permanente dell'arteria coronaria discendente sinistra-anteriore nei topi. Questo modello è di grande rilevanza per studiare la fisiofisiologia dell'infarto miocardico e i processi biologici concomitanti.

Modello di infarto miocardico Murine utilizzando la legatura permanente dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra

Qui descriviamo un metodo semplice e riproducibile che può indurre infarto miocardico o danno da ischemia-riperfusione miocardica nei topi mediante legatura di precisione dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra attraverso la micromanipolazione.

Induzione di infarto miocardico e danno da ischemia-riperfusione miocardica nei topi

Qui presentiamo un protocollo incentrato sul controllo di qualità della legatura dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra modificando tecnicamente la procedura tradizionale nei ratti per la ricerca acuta sull'ischemia-riperfusione miocardica.

Legatura delle arterie coronarie discendenti anteriori sinistre per la ricerca sull'ischemia-riperfusione: miglioramento del modello tramite modifiche tecniche e controllo qualità

Presentato qui è una procedura chirurgica per la legatura permanente dell'arteria coronaria sinistra nei topi. Questo modello può essere utilizzato per studiare la fisiopatologia e la risposta infiammatoria associata dopo infarto miocardico.

Legatura coronaria sinistra: un modello chirurgico murino di infarto miocardico

Numerose manipolazioni genetiche e / o iniezioni intramiocardiche di geni, proteine, cellule e / o biomateriali si sovrappongono la dimensione del tempo negli studi di acuta ischemia / riperfusione e rimodellamento cronica nel topo. Questo video illustra le procedure di microchirurgia per ischemia / riperfusione, permanente legatura delle arterie coronarie, e gli studi di iniezione intramiocardico.

Legatura dell&#39;arteria coronarica e di iniezione intramiocardico in un modello murino di infarto

Impara la legatura dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra (LAD) nel topo per studiare l'infarto miocardico. Questa tecnica chirurgica minimamente invasiva consente di analizzare i meccanismi di recupero cardiaco post-infartuale.

Murino discendente anteriore sinistra (LAD) Coronary legatura dellarteria: una migliore e semplificata del modello di infarto miocardico (Video) | JoVE Journal

Murino discendente anteriore sinistra (LAD) Coronary legatura dell'arteria: una migliore e semplificata del modello di infarto miocardico

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