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L'uso di un'analisi di β-lactamase-based conduttimetriche biosensore per rilevare interazioni bio...
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Bioengineering
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JoVE Journal Bioengineering
The Use of a β-lactamase-based Conductimetric Biosensor Assay to Detect Biomolecular Interactions

L'uso di un'analisi di β-lactamase-based conduttimetriche biosensore per rilevare interazioni biomolecolari

Full Text
9,555 Views
08:06 min
February 1, 2018

DOI: 10.3791/55414-v

Marylène Vandevenne*1, Mathieu Dondelinger*1, Sami Yunus2, Astrid Freischels1, Régine Freischels1, Oscar Crasson1, Noureddine Rhazi1, Pierre Bogaerts3, Moreno Galleni1, Patrice Filée4

1Life Science Department,University of Liège, 2Institute of Condensed Matter and Nanoscience,Catholic University of Louvain, 3Laboratory of Clinical Microbiology,Catholic University of Louvain, 4Biotechnology Department,CER Group

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

In questo lavoro, segnaliamo un nuovo metodo per studiare le interazioni proteina-proteina usando un biosensore conduttimetriche basato sulla tecnologia ibrida β-lattamasi. Questo metodo si basa sul rilascio di protoni all'idrolisi di β-lattami.

L'obiettivo generale di questo test con biosensore conduttimetrico è quello di rilevare le interazioni biomolecolari, utilizzando la tecnologia ibrida beta-lattamasi. Descriviamo un metodo per rilevare le interazioni anticorpo-antigene, utilizzando una proteina chimerica beta-lattamasi. Il principio di questo metodo si basa sul rilevamento del legame misurando il rilascio di protoni dell'attività della beta-lattamasi.

Il vantaggio principale di questa tecnica rispetto agli immunosensori convenzionali è l'uso di una beta-lattamasi chimerica, che rende i saggi sensoriali più economici e veloci utilizzando una proteina ibrida per rilevare gli analiti. A dimostrare la procedura sarà Mathieu Dondelinger, un ricercatore laureato. Iniziare questa procedura con il campione di proteine e la preparazione della soluzione come descritto nel protocollo di testo. Preparare l'elettrodo riutilizzabile immergendo le punte nei pozzetti di una piastra a 96 pozzetti contenente 300 microlitri per pozzetto di soluzione di preparazione dell'elettrodo per due minuti mescolando delicatamente a temperatura ambiente.

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