Precision-cut Mouse Lung Slices to Visualize Live Pulmonary Dendritic Cells

Miranda R. Lyons-Cohen; Seddon Y. Thomas; Donald N. Cook; Hideki Nakano

doi:10.3791/55465

Taglio di precisione polmone mouse Fette per la visualizzazione in diretta cellule dendritiche po...

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Immunology and Infection

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Precision-cut Mouse Lung Slices to Visualize Live Pulmonary Dendritic Cells

Taglio di precisione polmone mouse Fette per la visualizzazione in diretta cellule dendritiche polmonare

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09:33 min

April 5, 2017

DOI: 10.3791/55465-v

Miranda R. Lyons-Cohen¹, Seddon Y. Thomas¹, Donald N. Cook¹, Hideki Nakano¹

¹Immunity, Inflammation, and Disease Laboratory, Division of Intramural Research,National Institute of Environmental Health Sciences, NIH

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article describes a method for generating precision-cut lung slices (PCLS) to visualize immune cell localization in the lung. The technique allows for the observation of various immune cell types and their interactions in a live ex vivo environment.

Key Study Components

Area of Science

Immunology
Cell Biology
Respiratory Physiology

Background

Precision-cut lung slices maintain the three-dimensional architecture of lung tissue.
This method enables visualization of immune cell trafficking and localization.
It can also assess airway and smooth muscle tissue contraction.
The technique is applicable for studying inflammation in the lung.

Purpose of Study

To visualize the localization and migration patterns of immune cells in the lung.
To provide insights into immune responses during inflammation.
To explore interactions between different cell types in lung tissue.

Methods Used

Harvesting lung tissue from six to 12 week old mice.
Using scissors to open the abdominal cavity and access the lungs.
Draining blood from the lungs by snipping the inferior vena cava.
Puncturing the diaphragm to allow ribcage expansion.

Main Results

Successful visualization of immune cell localization in lung slices.
Demonstrated the ability to track immune cell migration patterns.
Provided insights into the interactions of immune cells with lung tissue.
Showed potential for studying airway and smooth muscle contraction.

Conclusions

The PCLS method is a valuable tool for immunological research.
It allows for real-time observation of immune cell dynamics.
This technique can enhance understanding of lung immunology.

Frequently Asked Questions

What are precision-cut lung slices?

Precision-cut lung slices are thin sections of lung tissue that maintain the three-dimensional architecture and can be used for live imaging studies.

How can this method be applied in research?

This method can be used to study immune cell behavior, interactions, and responses in the lung under various conditions, including inflammation.

What are the advantages of using PCLS?

PCLS allows for the visualization of live tissue interactions while preserving the native structure of the lung, enabling more accurate studies of cellular dynamics.

Is this method applicable to other cell types?

Yes, the protocol can be adapted to visualize various cell types beyond immune cells, depending on the research focus.

What is the significance of studying immune cells in the lung?

Understanding immune cell localization and behavior in the lung is crucial for insights into respiratory diseases and inflammatory responses.

Can this method be used for therapeutic research?

Yes, it can help in evaluating the effects of potential therapies on immune cell behavior and lung tissue responses.

Si descrive un metodo per la generazione di precisione intercettato Lung fette (PCLS) e immunocolorazione loro di visualizzare la localizzazione dei vari tipi di cellule immunitarie nel polmone. Il nostro protocollo può essere esteso per visualizzare la posizione e la funzione dei diversi tipi di cellule in una varietà di condizioni.

L'obiettivo generale di questo metodo è quello di utilizzare fette polmonari tagliate con precisione, o PCLS, per visualizzare la localizzazione e il traffico di vari tipi di cellule immunitarie nel polmone. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo dell'immunologia, come la localizzazione e i modelli di migrazione delle cellule immunitarie nel polmone. Il vantaggio principale di questa tecnica è che diverse interazioni possono essere visualizzate nel tessuto vivo ex vivo che mantiene l'architettura tridimensionale del polmone.

Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sulla localizzazione e sul traffico delle cellule immunitarie durante l'infiammazione, può anche essere utilizzato per visualizzare le vie aeree e la contrazione del tessuto muscolare liscio. Per prelevare il tessuto polmonare, utilizzare prima le forbici per aprire la pelle e il peritoneo dal centro dell'addome fino alla mascella di un topo di età compresa tra sei e 12 settimane e spostare l'intestino sul lato della cavità addominale. Taglia la vena cava inferiore per drenare il sangue dai polmoni e usa la punta affilata delle forbici per perforare il diaframma per consentire l'espansione della gabbia toracica.

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