Batteria di comportamentali test valutazione generale locomozione, forza muscolare e coordinazione in topi

Test comportamentali è utilizzato in studi pre-clinici per valutare gli effetti fenotipici di una malattia o un trattamento benessere di un animale. Al fine di valutare globalmente funzionamento del motore, abbiamo selezionato le prove per la locomozione generale, forza muscolare e di coordinazione: campo aperto-test, il test di rete e il rotarod test, rispettivamente.

L'obiettivo generale di questa batteria di test comportamentali è osservare la locomozione generale, la forza muscolare e la coordinazione nei topi. Questi metodi possono aiutare a rispondere a domande chiave sull'implementazione di diversi trattamenti in più studi preclinici, come il beneficio dei risultati del trattamento sulla motilità nei topi. Il vantaggio principale di questa tecnica è che più sfaccettature e dimensioni del movimento vengono misurate e valutate da questa batteria di test comportamentali.

A dimostrare la procedura sarà Meera, una studentessa del nostro laboratorio. Iniziare attivando il programma di test in campo aperto e collegando il computer alla fotocamera o alla scatola da campo aperta. Avviare il software SmartWare selettivo nell'icona Open Field.

Seleziona OK. Se applicabile, scegliere la sorgente del convertitore analogico digitale dalle opzioni della telecamera. Seguire le istruzioni per creare le dimensioni appropriate per coprire la scatola da campo aperto.

Quindi, assicurarsi che il mouse venga rilevato entro i confini del campo aperto calibrando la parte appropriata del software. Fare clic su tempo per preimpostare un periodo di tempo per testare i mouse. In questo caso, impostare cinque minuti.

Inserisci gli oggetti, cliccando e scrivendo il nome appropriato per i file. Ad esempio, la prima fase, la prima sessione. Quindi, posiziona il mouse al centro dei campi aperti e fai clic sull'icona di avvio per richiedere al programma di iniziare la registrazione.

Dopo cinque minuti, osservare il programma passare automaticamente all'argomento successivo. In questo caso, rimuovere il mouse che ha completato il test e posizionare il soggetto successivo nel campo aperto del programma. Quindi fare clic su Start.

Infine, per analizzare i dati clicca sull'icona di analisi in alto a destra dello schermo. Fare nuovamente clic su Analizza, quindi su Report di riepilogo. Inizia posizionando un mouse al centro di una mesh.

E capovolgere la rete a 20 centimetri sopra un contenitore trasparente. Una volta invertito, avvia il timer. Registra il tempo di latenza per la caduta del mouse dalla rete.

Se il mouse non cade entro 60 secondi, assegnagli un punteggio di 60 secondi e non condurre ulteriori prove. Quindi, lascia riposare il mouse per almeno cinque minuti. Quindi accendi il rotarod e il computer.

E assicurarsi che siano collegati correttamente per la registrazione dei dati. Per eseguire il protocollo accelerato, utilizzare i codici sulla tastiera per impostare la durata desiderata sulla rotarod a 300 secondi, il numero di corsie a cinque, la velocità iniziale e finale rispettivamente a quattro e quaranta rotazioni al minuto e il tempo di rampa a 300 secondi. Quindi impostare l'unità in modalità di avanzamento del mouse.

Assicurati che tutte le corsie magnetizzate siano bilanciate prima di iniziare la prova e posiziona un mouse in ogni corsia del rotarod. Quindi premere start per avviare il programma. Quando i topi cadono, rimuovili prontamente dalle loro corsie per assicurarti che non inciampino nelle altre corsie.

Infine, lascia riposare i topi per un intervallo di 10 minuti. Durante questo intervallo, inizia la prova per il prossimo gruppo di topi. Questi dati dimostrano l'uso del rotarod come mezzo per vedere come si comportano i topi trattati rispetto ai normali topi eterozigoti.

La divergenza dei due gruppi a 40 settimane denota l'inizio della diminuzione della coordinazione del gruppo di trattamento rispetto ai normali controlli. Durante i test comportamentali mensili, i topi trattati si sono comportati in modo simile ai normali controlli eterozigoti, al test in campo aperto, al rotarod e al test mesh. A 12 settimane, gli animali trattati superano gli animali non trattati per quanto riguarda il tempo di movimento nel test in campo aperto e la latenza per cadere nel test mesh.

Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere completata in due ore e mezza per completare 20 topi attraverso il protocollo, se eseguita correttamente. Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordarsi di pulire l'apparato tra una prova e l'altra di ciascun topo, al fine di evitare possibili contaminazioni tra topi e gabbie. Seguendo questa procedura, è possibile eseguire altri metodi, come ulteriori test comportamentali e biochimici, al fine di rispondere a ulteriori domande relative all'efficienza del trattamento, come i test di biodistribuzione, i test di attività enzimatica, i test istologici o i test di memoria e apprendimento.

Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della psicologia e successivamente delle neuroscienze per esplorare l'effetto di una varietà di trattamenti e condizioni sugli organismi modello. Dopo aver visto il video, dovresti avere una buona comprensione di come eseguire i test comportamentali per la locomozione generale, la forza muscolare e la coordinazione. Non dimenticare che lavorare con i topi può essere pericoloso e che durante l'esecuzione di questa procedura è necessario prendere sempre precauzioni come indossare dispositivi di protezione individuale adeguati.