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Isolamento Droplet per l'analisi quantitativa dei lipidi Spettrometria di Massa
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JoVE Journal Biochemistry
Lipid Droplet Isolation for Quantitative Mass Spectrometry Analysis

Isolamento Droplet per l'analisi quantitativa dei lipidi Spettrometria di Massa

Full Text
10,772 Views
10:23 min
April 17, 2017

DOI: 10.3791/55585-v

Kathrin Rösch1, Marcel Kwiatkowski2, Hartmut Schlüter2, Eva Herker1

1Heinrich Pette Institute,Leibniz Institute for Experimental Virology, 2Core Facility Mass Spectrometric Proteomics,University Medical Center Hamburg-Eppendorf

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

gocce lipidiche sono organelli importanti per la replicazione di diversi agenti patogeni, tra cui il virus dell'epatite C (HCV). Si descrive un metodo per isolare le goccioline lipidiche per la spettrometria di massa quantitativa delle proteine ​​associate; può essere utilizzato in una varietà di condizioni, come l'infezione da virus, stress ambientale, o di trattamento farmacologico.

L'obiettivo generale dell'isolamento delle goccioline lipidiche per la spettrometria di massa quantitativa è comprendere la funzione di questi organelli, ad esempio, nella replicazione di agenti patogeni come il virus dell'epatite C. Questo metodo può rispondere a domande chiave nel campo delle malattie infettive, come ad esempio il motivo per cui gli agenti patogeni si legano alle goccioline per la replicazione. L'isolamento delle goccioline lipidiche può essere effettuato in sei-sette ore.

E durante questa procedura, è importante evitare la contaminazione della cheratina. Per iniziare, rimuovere 50 millilitri da ogni flacone di DMEM medium e aggiungere 50 millilitri di siero fetale di vitello dializzato. Successivamente, sciogliere 50 milligrammi di lisina marcata con carbonio 13 e 50 milligrammi di arginina marcata con carbonio 13 in un millilitro di terreno.

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Biochimica Issue 122 lipidi goccioline i corpi dei lipidi la spettrometria di massa quantitativa l'etichettatura degli isotopi stabili di aminoacidi nelle cellule in coltura (SILAC) la quantificazione della proteina il virus dell'epatite C (HCV) infezione da virus

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