Name: Un nuovo metodo per modellare lencefalopatia traumatica cronica in Drosophila (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-07-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 15 s
Description: Scopri un nuovo metodo per modellare l'encefalopatia traumatica cronica in Drosophila melanogaster. Questa tecnica consente impatti ripetuti controllati sulla testa per studiare la degenerazione neuronale.

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Gli autori non hanno nulla da rivelare.

1. Montaggio del Dispositivo Strike ( Figura 1 ) <ol><li> Rimuovere lo stantuffo da una siringa tubercolina da 1 ml. Tagliare la canna al punto di 1 ml. </li><li> Rimuovere una barriera aerosol (3 mm di altezza x 4 mm di diametro) da una punta di pipetta da 200 μl e utilizzarla come impattatore. Posizionare l&#39;impatto nell&#39;interno della barra della siringa. Toccare delicatamente il cilindro per spostare l&#39;impattatore all&#39;estremità della punta, con il lato piatto che copre l&#39;apertura dell&#39;ugello. </li><li> Fissare l&#39;estremità della punta del tubo al tubo di plastica collegato al regolatore di flusso di anidride carbonica (CO 2 ) di una stazione di anestesia Drosophila . </li><li> Tenere la barella verticalmente e fissarla a un supporto di supporto standard di bloccaggio in modo che il dispositivo di impatto rimanga in fondo alla canna. </li><li> Modificare una punta pipetta da 200 μl per realizzare il supporto mosca. <ol><li> Tagliare 4 mm dalla punta per fare un&#39;apertura di diametro di 0,8 mm, consentendo solo di esporre la testa a mosca. NOTA: il thoRax e tutte le altre parti del corpo mosca rimarranno all&#39;interno della punta pipetta. </li></ol></li><li> Modificare una punta pipetta da 1000 μL e un tappo ago da 1 ml di siringa per realizzare il connettore. <ol><li> Tagliare 44 mm dall&#39;apertura della punta. Prendete una lunghezza di 6 mm di un capsula da 1 ml della siringa e spingetela strettamente nel segmento rimanente della punta della pipetta da 1000 μL. </li></ol></li></ol> 2. Funzionamento del dispositivo Strike <ol><li> Anestetizza una singola femmina adulta di 2 giorni che vola usando CO 2 su un moscerino. </li><li> Trasferitelo delicatamente sul supporto di mosca usando una spazzola fine. Toccare delicatamente il supporto in modo che la testa di mosca sia visibile all&#39;esterno dell&#39;estremità della punta. Se la proboscide di mosca è esposta al di fuori della punta, infilate leggermente dentro la punta con un ago sferico da 1 ml sbattuto. NOTA: Assicurarsi di mantenere la proboscide di mosca all&#39;interno del supporto. Altrimenti, la mosca può morire da un infortunio alla ventosa. </li><li> Serrare la moscaSulla barra della siringa con il connettore in modo che la testa di mosca sia rivolta verso il basso. </li><li> Impostare la pressione del gas a 100 kPa. Regolare la portata secondo il disegno dell&#39;esperimento. </li><li> Spostare e spegnere rapidamente l&#39;interruttore del regolatore di flusso in modo che l&#39;urto di impatto raggiunga una volta la testa di mosca. </li><li> Sollevare il supporto mosca e spostarlo su un rilievo di mosca. Invertire il supporto volante e toccare delicatamente il lato per far uscire il volo. Lasciare la mosca in un flacone vuoto per recuperare. </li></ol> 3. Monitoraggio del movimento assistito video <ol><li> Riempire un piatto di Petri da 6 cm con elastomero trasparente al silicio per realizzare l&#39;arena di tracciamento. Lasciare uno spazio di 3 mm tra il silicone e il coperchio del piatto per consentire alle mosche di camminare liberamente ma non di volare. </li><li> Anestetizzare quattro mosche dal gruppo o dal gruppo trattato ogni volta e piazzarli nell&#39;arena. Lasciare le mosche a 22 ° C per 1 ora. </li><li> Posizionare una telecamera con dispositivo di accoppiamento (CCD) sopra le arene e registrare per 5 minuti.</li><li> Analizzare le traiettorie di movimento registrate usando il software Ctrax (liberamente disponibile da Caltech) 16 . Esportare i dati tracciati in un linguaggio di programmazione (ad esempio, Matlab) -compatibile e analizzare i dati in base alla distanza percorsa per fotogramma 17 . Calcolare la distanza percorsa media per ogni mosca e combinarla con tutte le altre mosche registrate / gruppo per ottenere una distanza cumulativa media percorsa dalla popolazione di file nello stesso gruppo. </li></ol>

<ol><li>McKee, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+first+NINDS%2FNIBIB+consensus+meeting+to+define+neuropathological+criteria+for+the+diagnosis+of+chronic+traumatic+encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol%22%5BJournal%5D)">The first NINDS/NIBIB consensus meeting to define neuropathological criteria for the diagnosis of chronic traumatic encephalopathy.</a> Acta Neuropathol. 131, 75-86 (2016).</li>
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</ol>

Questo lavoro è stato sostenuto dalla Facoltà di Johns Hopkins University School of Medicine di startup fund a LC

I modelli animali che modellano fedelmente le caratteristiche del CTE, comprese le alterazioni neurofisiologiche, i segni neuropatologici e i disordini neurobehaviorali, sono essenziali per scoprire i meccanismi della malattia e per sviluppare obiettivi diagnostici e terapeutici. È comprensibile che nessun modello animale di una malattia umana sia perfetto a imitare tutti gli endpoint clinicamente rilevanti. Tuttavia, riteniamo che un robusto modello CTE dovrebbe soddisfare i seguenti tre requisiti: (1) l&#39;impatto de...

L&#39;encefalopatia traumatica cronica (CTE) è stata recentemente riconosciuta come un disturbo neurodegenerativo distinto, separato da altre tauopatie come la malattia di Alzheimer 1 . A differenza della malattia di Alzheimer e di altre tauopatie comuni, i cui fattori di rischio più importanti stanno avanzando l&#39;età e una storia familiare di demenza, la CTE, come indicato dal suo nome, implica una stretta collaborazione con una storia di traumi cerebrali, probabilmente visto in atleti sportivi di contatto, Come pugili e calciatori, così come nei veterani militari 2 , 3 , 4 , 5 . Si pensa di essere iniziato da ripetuti colpi concussivi e subconcutici alla testa. I pazienti possono presentare sintomi e segni quali disordini cognitivi, cambiamenti di umore e comportamento e disfunzione di movimento, che si sovrappongono in modo significativo con la malattia di Alzheimer, frontotemporalDemenza, demenza del corpo di Lewy e malattia di Parkinson 6 . Al contrario, gli esami post-mortem del tessuto cerebrale rivelano un modello distinto di accumulo di tau per iperfosforilati che circonda i piccoli vasi sanguigni nelle profondità dei sulci corticali, caratteristica patognomonica non osservata nelle altre condizioni degenerative 7 . Tuttavia, finora poco si sa sulla patogenesi che conduce alla manifestazione delle malattie. Questo è in gran parte dovuto alla mancanza di un modello animale fedele - solo di recente sono stati generati modelli roditori 5 , 8 . Questi organismi di modello hanno gli svantaggi di una terapia intensiva e una durata di vita relativamente lunga, che non sono adatti per studi di malattia neurodegenerativa. Rispetto alle omologhe di mammiferi, gli animali invertebrati come Drosophila sono un&#39;ottima alternativa, con la loro manutenzione economica,Strumenti estensivi per la dissezione di determinanti genetici e durata relativamente breve 9 . Notevolmente, il cervello volante e umano condividono le vie molecolari e cellulari evolutamente conservate, nonché le somiglianze anatomiche 10 , 11 , 12 . Due geniali modelli Drosophila per studiare lesioni cerebrali traumatiche sono state riportate in precedenza 13 , 14 . Il primo dispositivo &quot;High Impact Trauma&quot; (HIT) progettato da Katzenberger e colleghi conteneva mosche in movimento in una flaconcina di plastica legata all&#39;estremità libera di una molla metallica 13 , 15 . Quando il flaconcino di plastica è stato inclinato in verticale e rilasciato, ha colpito un tampone di poliuretano e impartito il trauma alle mosche quando si sono rimbalzati alla parete del flacone e rimbalzato. Al contrario, Barekat e colleghi hanno progettato un diverso metodo di consegnaLa piattaforma omogeneizzatrice Omni Bead Ruptor-24 14 . Le mosche sono state inabilitate con CO 2 e poste in un tubo a vite da 2 mL che è stato fissato all&#39;omogenizzatore e sottoposto a condizioni di scossa preprogrammate. Un vantaggio di utilizzare il sistema di omogeneizzazione dei tessuti è che lo sperimentatore potrebbe modulare l&#39;intensità della lesione, la durata della lesione e il numero di attacchi di lesioni. Tuttavia, entrambi i regimi subiscono lo stesso inconveniente: lesioni primarie alla testa vengono inflitte casualmente in termini di posizione e forza di impatto. Inoltre, entrambi i metodi hanno determinato una notevole mortalità, causata da inevitabili danneggiamenti collaterali ad altre parti del corpo e degli organi interni. Qui descriviamo un nuovo metodo per indurre mTBI nelle mosche di frutta. Il nostro apparecchio è costituito da un impatto balistico a propulsione a gas. Rispetto ai modelli Drosophila 14 , 15 , il nostro metodo ha il vantaggio unico di fornire measImpatto urra, diretto solo alla testa di mosca libera, consentendo così il controllo accurato di vari fattori, come la gravità dell&#39;impatto, l&#39;intervallo di tempo tra gli impatti e il numero totale di impatti sostenuti.

<table><tbody><tr><td>Barriera per aerosol</td><td>USA Scientific</td><td>1120-8810</td><td>Utilizzato come impattatore</td></tr><tr><td>200 &#956; L Puntale per pipetta</td><td>USA Scientific</td><td>1111-0706</td><td>Utilizzato come supporto per testa di mosca</td></tr><tr><td>1000 &#956; L Puntale per pipetta</td><td>USA Scientific</td><td>1122-1830</td><td>Utilizzato come connettore</td></tr><tr><td>Siringa per tubercolina da 1 ml</td><td>Becton Dickinson</td><td>309625</td><td></td></tr><tr><td>Piastre di Petri da 60 mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB0875713A</td><td>Utilizzato come arene di tracciamento</td></tr><tr><td>Regolatore di flusso</td><td>Genesee Scientific</td><td>59-122WC</td><td></td></tr><tr><td>Standard Clamp Holder/supporto</td><td>EISCO Scientific</td><td>CH0688</td><td></td></tr><tr><td>Spazzola fine</td><td>Genesee Scientific</td><td>59-204</td><td></td></tr><tr><td>Flypad</td><td>Genesee Scientific</td><td>59-114</td><td></td></tr><tr><td>Sylgard Elastomero siliconico</td><td>Dow Corning</td><td>4019862</td><td></td></tr><tr><td>CCD Camera</td><td>Microsoft&nbsp;</td><td>HD-5000</td><td></td></tr><tr><td>Ctrax Walking Fly Tracker</td><td>Caltech</td><td>Ctrax 0.2.11</td><td></td></tr><tr><td>MATLAB Cassetta degli attrezzi per l'elaborazione delle immagini</td><td>MATLAB</td><td>R2015b</td><td></td></tr></tbody></table>

un nuovo metodo per modellare l&#39;encefalopatia traumatica cronica in<em&gt; drosophila</em

A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila

L&#39;encefalopatia traumatica cronica (CTE) è una malattia neurodegenerativa consolidata che è strettamente associata all&#39;esposizione a un mite traumatico (TMT) ripetitivo. I meccanismi responsabili dei suoi complessi cambiamenti patologici rimangono in gran parte sfuggenti, nonostante un recente consenso per definire i criteri neuropatologici. Qui descriviamo un nuovo metodo per sviluppare un modello di CTE in Drosophila melanogaster ( Drosophila ) nel tentativo di identificare i geni chiave e le vie che portano al caratteristico accumulo tau iperfosforilato e alla morte neuronale nel cervello. Impatti di forza di regolazione per infliggere lesioni chiuse lievi vengono consegnati direttamente alla testa di mosca sottoponendo la testa ad accelerazione e decelerazione rapida. Il nostro metodo elimina i problemi potenziali inerenti ad altri modelli moto Drosophila ( ad esempio, la morte animale potrebbe essere indotta da danni aAltre parti del corpo o agli organi interni). La mancanza di manodopera a basso costo e a basso costo, una breve durata di vita e estesi strumenti genetici rendono la frutta ideale per studiare la patogenesi della CTE e rendere possibile la realizzazione di schermi genetici e farmacologici avanzati su vasta scala genomica. Prevediamo che la continua caratterizzazione del modello genera importanti conoscenze meccaniche sulla prevenzione delle malattie e sugli approcci terapeutici.

Per stabilire un modello CTE con l&#39;adulto Drosophila abbiamo determinato l&#39;efficacia del nostro dispositivo per infliggere una singola lesione alla testa chiusa. Per eliminare le variazioni relative al genotipo, al sesso o all&#39;età, abbiamo usato le mosche femminili Canton-S WT di due giorni nell&#39;esperimento. Potremmo facilmente controllare la resistenza dell&#39;impulso di impatto regolando la portata di CO 2 ad una pressione costante di 100 kPa. Le mo...

Qui descriviamo un nuovo approccio per infliggere danni traumatici al cervello chiuso a Drosophila melanogaster . Il nostro metodo ha il vantaggio di trasmettere direttamente impatti ripetitivi con forza regolabile solo alla testa. Un&#39;ulteriore esplorazione del sistema invertebrato contribuirà ad illuminare la patogenesi di encefalopatia traumatica cronica.

Un nuovo metodo per modellare l&#39;encefalopatia traumatica cronica in<em&gt; Drosophila</em

Chronic Traumatic Encephalopathy (CTE) is an established neurodegenerative disease that is closely associated with exposure to repetitive mild Traumatic ...

L'obiettivo generale di questa nuova procedura è provocare lesioni cerebrali traumatiche chiuse nella mosca della frutta, Drosophila, al fine di stabilire un nuovo modello di encefalopatia traumatica cronica. Questo metodo può contribuire a rispondere a domande fondamentali nel campo dell'encefalopatia traumatica cronica, come ad esempio in che modo il trauma ripetitivo induca la degenerazione neuronale. Il principale vantaggio di questa tecnica consiste nella capacità di applicare impatti ripetuti di intensità regolabile direttamente sulla testa della mosca, senza provocare danni ad altre parti del corpo dell'animale.Una dimostrazione pratica di questo metodo è fondamentale poiché il montaggio del dispositivo e il caricamento dei moscerini sono passaggi difficili da apprendere, dato che la testa del Drosophila è molto piccola e risulta essenziale applicare l’impatto soltanto sulla testa. Per costruire l’apparato utilizzato per commuovere o colpire i moscerini della frutta, iniziare realizzando la parte dell’impatto. Rimuovere il pistone da una siringa tubercolinica in policarbonato da un millilitro, quindi tagliare il corpo della siringa al segno di un millilitro.Per un impattatore, utilizzare la barriera aerosol presente su una punta per pipetta da 200 microlitri. Questo impattatore deve essere lungo tre millimetri e avere un diametro di quattro millimetri. Successivamente, inserire l'impattatore nel corpo della siringa con il lato piatto rivolto verso l'ugello.Per fornire forza, collegare il corpo della siringa a un regolatore di flusso di anidride carbonica. Il regolatore deve essere dotato di un interruttore di accensione/spegnimento e di un controllo preciso della portata del gas. Successivamente, fissare il corpo verticalmente a un supporto in ferro, in modo che l'impattore cada sul fondo del corpo.Successivamente, preparare il supporto per i moscerini. Prendere un puntale per pipetta da 200 microlitri. Tagliare la punta del puntale a cinque millimetri dall'estremità più piccola, in modo da ottenere un'apertura con un diametro di 8 millimetri.La testa di una mosca passerà attraverso questo foro, ma il torace no. Infine, preparare il supporto per la mosca e il dispositivo di impatto. Per prima cosa, tagliare la punta di una pipetta da un millilitro a 44 millimetri dall'apertura piccola.In secondo luogo, tagliare un pezzo lungo sei millimetri dal cappuccino dell'ago per una siringa da un millilitro. Quindi, unirli insieme. Anestetizzare un singolo moscerino adulto femmina di due giorni utilizzando anidride carbonica.Dal tampone di anidride carbonica, utilizzare un pennello fine per trasferire delicatamente la mosca nel supporto. Successivamente, battere leggermente sul supporto finché la testa non sporge dalla punta. Se il proboiscide è esposto, utilizzare un ago di siringa da un millilitro arrotondato per riposizionarlo delicatamente all'interno della punta.È fondamentale mantenere il corpo della mosca, in particolare la parte boccale, all'interno del supporto. In caso contrario, la mosca potrebbe morire a causa di danni agli organi interni o per l'incapacità di ingerire il cibo. Successivamente, impostare la pressione del gas a 100 kilopascals e regolare il flusso secondo necessità.Dopo aver caricato la mosca, fissare il supporto al corpo della siringa utilizzando il connettore, in modo che la testa della mosca sia rivolta verso il basso. Quindi, utilizzando l'interruttore a levetta, inviare un impulso di gas che sposta l'urto per colpire la mosca una sola volta. A questo punto, staccare il supporto della mosca e rimetterla sul tappetino di anidride carbonica.Trasferire la mosca in una provetta vuota finché non si riprende. Mantenere una mosca per provetta. Il recupero richiede solo pochi minuti.Ripetere il processo per testare quattro mosche per gruppo sperimentale. L'elaborazione di due gruppi, uno di prova e uno fittizio, dovrebbe richiedere solo da 20 a 30 minuti. Trattare i gruppi fittizi esattamente come gli animali di prova, tranne per il fatto di non includere una barriera aerosol nel tubo dell'impatto.Per tracciare i movimenti dei moscerini in una piastra di Petri, riempire innanzitutto una piastra da sei centimetri con un elastomero di silicone trasparente per creare l'arena di tracciamento. Lasciare un'intercapedine di tre millimetri tra il silicone e il coperchio, in modo che i moscerini possano camminare liberamente all'interno dell'intercapedine senza poter volare. Sotto l'arena di tracciamento, posizionare uno sfondo bianco.Successivamente, anestetizzare quattro mosche dello stesso gruppo di trattamento e posizionarle nell'arena. Lasciare che le mosche si ambientino per un'ora nell'arena, che deve essere completamente illuminata e mantenuta a circa 22 gradi Celsius. Non più calda della temperatura ambiente.Dopo un'ora, utilizzare una telecamera a dispositivo a accoppiamento di carica posizionata sopra l'arena per registrare l'attività della mosca per cinque minuti. Al termine della registrazione di cinque minuti, anestetizzare le mosche nell'arena e restituirle in un nuovo flacone. Successivamente, smaltire l'arena.In seguito, analizzare le registrazioni utilizzando il software Ctrax disponibile gratuitamente. Questo software genera dati di tracciamento, che possono essere esportati in un formato compatibile con linguaggi programmabili, come il formato MATLAB. A partire dai dati, calcolare la distanza percorsa per ogni fotogramma, la distanza media di cammino per ciascuna mosca e la distanza media totale percorsa per mosca.Per ottenere una significatività statistica, si prevede di testare circa 100 moscerini per gruppo di trattamento. Per stabilire un modello di encefalopatia traumatica cronica, è stata analizzata l'efficacia di un singolo trauma cranico chiuso indotto dall'apparecchio d'impatto a diverse velocità, utilizzando femmine di Canton-S di due giorni di età. La pressione del gas è stata mantenuta a 100 kilopascal.Le mosche esposte a un singolo impatto al flusso più elevato testato hanno mostrato difetti esterni minimi. Nonostante l'assenza di evidenze chiare di danni esterni, lesioni riscontrate a un flusso di 15 litri al minuto si sono rivelate acutamente letali, con una sopravvivenza inferiore al 10% entro 24 ore. La sopravvivenza è aumentata con flussi più bassi.È stato raggiunto un tasso di sopravvivenza del 100% a cinque litri al minuto o inferiore, quindi cinque litri al minuto è stato selezionato come standard per il modello. Subito dopo essere stati colpiti, i moscerini hanno recuperato gradualmente la mobilità entro quattro minuti. Il recupero nei soggetti di controllo è stato di circa un minuto più rapido.Dopo l'impatto, è stato utilizzato un sistema di tracciamento del movimento assistito da video per misurare la funzione locomotoria. Nei due giorni successivi all'impatto, la locomozione è gradualmente tornata alla normalità. Questa evidenza di un recupero progressivo è in linea con il recupero osservato nella CTE umana.Per valutare gli effetti a lungo termine, è stato applicato un protocollo di lesione cerebrale traumatica ripetuta con cinque colpi in cinque giorni. Venti giorni dopo il trattamento, è stata confrontata la locomozione dei sopravvissuti in ciascun gruppo e si è osservato chiaramente che il gruppo trattato camminava di meno. Anche la durata della vita del gruppo trattato è risultata notevolmente ridotta, con una mediana di 26 giorni rispetto ai 37 giorni dei controlli.Dopo il suo sviluppo, questa tecnica apre la strada ai ricercatori nel campo delle lievi lesioni cerebrali traumatiche ripetitive per esplorare i meccanismi patogenetici nel modello animale classico Drosophila melanogaster. Nel tentativo di eseguire questa procedura, è importante ricordare di proteggere il proboiscide, il torace e l'addome dall'impatto diretto del barriera aerosol.

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Test per misurare il comportamento delle funzioni locomotore, apprendimento, memoria e abilità...

Deficit Locomotore dosaggio, apprendimento e memoria in Drosophila Modelli di neurodegenerazione

Questo video descrive come seguire le mosche che camminano liberamente per valutare la loro capacità generale di locomozione. Il protocollo presentato dimostra la configurazione del test e l'analisi dei dati utilizzando un software di tracciamento video.

Tracciare le mosche che camminano liberamente: un metodo per valutare la locomozione in Drosophila

Questo video mostra una procedura per infliggere una lesione traumatica a testa chiusa nelle mosche Drosophila anestetizzate utilizzando un dispositivo di sciopero con un impattatore a gas. La lesione influisce sulla funzione neuronale e compromette la capacità di camminare.

Una tecnica per infliggere una lesione cerebrale traumatica a testa chiusa nelle mosche della Drosophila

Il video dimostra l'uso di un dispositivo HIT (High-Impact Trauma) per indurre una lesione cerebrale traumatica a testa chiusa (TBI) in Drosophila. Il trauma cranico provoca un trauma cerebrale meccanico che colpisce la funzione neuronale, che nel tempo porta alla neurodegenerazione e alla mortalità.

Un metodo per infliggere una lesione cerebrale traumatica a testa chiusa in Drosophila

Questo video dimostra l'induzione di una lesione cerebrale traumatica penetrante nel cervello della drosofila. I moscerini appena emersi vengono selezionati, anestetizzati e posizionati sotto uno stereomicroscopio dotato di fluorescenza. Viene identificato il corpo del fungo che esprime GFP e viene inserito un perno Minutien per causare lesioni. Le mosche sono autorizzate a riprendersi per ulteriori studi.

Induzione di lesioni cerebrali traumatiche penetranti nelle mosche adulte di Drosophila

Descriviamo qui le procedure di estrazione e purificazione di mRNA e metaboliti...

Purificazione di Trascrizioni e metaboliti<em&gt; Drosophila</em&gt; Teste

Qui descriviamo due saggi che sono stati stabiliti per studiare neurodegenerazione età-dipendente di dopaminergici (DA) neuroni...

Valutare fenotipi neurodegenerative<em&gt; Drosophila</em&gt; Neuroni dopaminergici mediante saggi arrampicata e Whole Brain Immunostaining

Presentiamo un test di geotassi negativa ottimizzato, economico e affidabile in Drosophila melanogaster come modello per i disturbi neurodegenerativi. Essendo più sensibile ai difetti locomotori lievi, questo test aiuterà a individuare potenziali interazioni genetiche e bersagli farmacologici.

Analisi quantitativa dei difetti arrampicata in un modello Drosophila di malattie neurodegenerative

Qui si descrive un metodo per infliggere cranico chiuso lesione cerebrale traumatica (TBI) in Drosophila. Questo metodo fornisce un gateway per studiare i meccanismi cellulari e molecolari che sono alla base delle patologie TBI utilizzando la vasta gamma di strumenti sperimentali e le tecniche disponibili per le mosche.

Un metodo per infliggere Chiuso Testa trauma cranico in<em&gt; Drosophila</em

Drosophila è ampiamente usato come sistema modello per studiare neurodegenerazione. Questo protocollo descrive un metodo con cui la degenerazione, come determinato dalla formazione vacuolo nel cervello, può essere quantificato. Si riduce anche effetti dovuti alla procedura sperimentale di elaborazione e controllo sezionamento e mosche sperimentali come un campione.

Messa Istologia per quantificare neurodegenerazione in<em&gt; Drosophila</em

Questo protocollo descrive la dissezione e immunostaining del adulto Drosophila melanogaster tessuti del cervello. In particolare, questo protocollo evidenzia l'uso di Drosophila fungo del fotoricettore e corpo neuroni come sottoinsiemi di un neurone di esempio che possono essere utilizzati con precisione per scoprire i principi generali alla base di molti aspetti dello sviluppo neuronale.

Dissezione e macchiatura immunofluorescente del corpo di fungo e del fotoricettore neuroni nel cervello adulto Drosophila melanogaster

Scopri un nuovo metodo per modellare l'encefalopatia traumatica cronica in Drosophila melanogaster. Questa tecnica consente impatti ripetuti controllati sulla testa per studiare la degenerazione neuronale.

Un nuovo metodo per modellare l'encefalopatia traumatica cronica in

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