Name: Intranasale consegna delle cellule staminali terapeutiche a Glioblastoma in un modello di mouse (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-06-04T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 57 s
Description: Scopri la somministrazione intranasale di cellule staminali terapeutiche per il trattamento del glioblastoma in un modello murino. Questo metodo non invasivo bypassa la barriera ematoencefalica e offre potenziali applicazioni in neuro-oncologia.

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</ol>

Gli autori non hanno alcun conflitto di interessi per dichiarare.

Sebbene sia stato ampiamente esplorato il percorso intranasale della somministrazione di farmaci per le piccole molecole, le nanomedicine e le proteine, 18 , l&#39;applicazione di cellule staminali terapeutiche per il targeting tumorale intranazionale del cervello è molto nuova nello spettro delle terapie tumorali cerebrali in sviluppo 2 , 3 , 4 . Ci sono complicazioni intrinseche riguardanti i comportam...

Bassa tossicità, bassa immunogenicità e tropismo tumorale intrinseco del cervello di cellule staminali umane sono tratti attraenti per la consegna di veicoli terapeutici 1 . Le nuove terapie a base di cellule staminali per tumori cerebrali maligni sono promettenti innovazioni sviluppate negli ultimi anni e l&#39;adattamento intranasale di questa strategia terapeutica rappresenta un salto verso la traduzione clinica, in quanto la somministrazione non invasiva e ripetuta potrebbe ridurre drasticamente la barriera per le applicazioni del paziente e Può essere adattabile per i servizi out-patient senza anestesia generale o un lungo servizio in pazienti associati a procedure chirurgiche invasive 1 , 2 , 3 , 4 . Noi ed altri abbiamo introdotto la via intranasale di consegna delle cellule staminali nei tumori del cervello e abbiamo posto il terreno per alcuni dei principi fondamentaliDella ricerca traslazionale usando i modelli xenograft 2 , 3 e 4 del mouse, oltre a studiare la migrazione di cellule staminali in vivo tramite i rivelatori di risonanza magnetica (MRI) 2 . Attraverso queste esplorazioni pilota, abbiamo accumulato un&#39;esperienza notevole e abbiamo approfittato di come costruire una robusta strategia di valutazione pre-clinica usando modelli di topi xenograft (PDX) di pazienti derivanti da malattie degli amiomi maligni, pur mantenendo la risoluzione investigativa per esaminare I dettagli meccanici più sfumati dei fenomeni biologici sofisticati dell&#39;ingresso cervello intranasale delle cellule staminali terapeutiche consegnate alla cavità nasale. Qui descriviamo i principi di un protocollo operativo standardizzato per dimostrare lo stato attuale di indagini sperimentali utilizzando una linea di cellule staminali neurali umane ben consolidate HB1.F3.CD 5 <sup&gt;, 6 , 7 , 8 , che è facilmente modificabile adattarsi a modelli o strategie tumorali specifici che utilizzano cellule staminali umane come portatori terapeutici.

<table><tbody><tr><td>Telaio stereotassico</td><td>Kopf Instruments</td><td>Modello 900</td><td></td></tr><tr><td>Incubatore per colture cellulari ipossiche</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>VIOS 160i</td><td></td></tr><tr><td>Forniture per colture cellulari (plastica)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Varia Sostituibile</td><td>con qualsiasi fonte</td></tr><tr><td>Legenda Microcentrifuga refrigerata Micro 21R</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>75002490</td><td>Sostituibile con qualsiasi fonte</td></tr><tr><td>Centrifuga da banco Sorvall ST16R&nbsp;</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>75004240</td><td>Sostituibile con qualsiasi fonte</td></tr><tr><td>Micro siringa 702N 25 & micro; l (22S/2"/2)</td><td>Hamilton Company</td><td>80400</td><td>Vassoio</td></tr><tr><td>per campioni a punta piatta per irradiatore</td><td>Best Theratronics</td><td>A13826</td><td>Per impostare la protezione dei topi con scudo di piombo</td></tr><tr><td>Microscopio Leica DMi8 Leica</td><td>Microsystem</td><td></td><td>Configurazione personalizzata</td></tr><tr><td>Leica CM1860 Criostato UV</td><td>Leica Microsystem</td><td></td><td>Configurazione personalizzata</td></tr><tr><td>Exel International Siringa per insulina</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14-841-31</td><td></td></tr><tr><td>Corning Phosphate Buffer Soluzione salina</td><td>Corning Cellgro/ThermoFisher</td><td>21-031-CV</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's Modified Eagle Medium&nbsp;</td><td>Corning Cellgro/ThermoFisher</td><td>11965-084</td><td></td></tr><tr><td>Tripsina 0,05%</td><td>Corning Cellgro/ThermoFisher</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>Ialuronidasi da testicoli bovini</td><td>MilliporeSigma</td><td>H3506</td><td></td></tr></tbody></table>

intranasale consegna delle cellule staminali terapeutiche a glioblastoma in un modello di mouse

Intranasal Delivery of Therapeutic Stem Cells to Glioblastoma in a Mouse Model

Il tropismo intrinseco verso malignità del cervello rende le cellule staminali come vettori promettenti di agenti terapeutici contro tumori maligni. La consegna di cellule staminali terapeutiche attraverso il percorso intranasale è una strategia alternativa scoperta di recente, con un forte potenziale di traduzione clinica, a causa della sua natura non invasiva rispetto all&#39;intestazione intracranica o alla consegna attraverso percorsi sistemici. La mancanza di barriera sanguigna del sangue rafforza ulteriormente il potenziale terapeutico delle cellule staminali sottoposte a entrata intranasale del cervello. Questo articolo riassume le tecniche essenziali utilizzate nei nostri studi e delinea i principi fondamentali della strategia intranasale per la consegna delle cellule staminali usando un modello di mouse degli xenograft intracranici degli gliomi. Eseguiamo le procedure ottimizzate che generano risultati coerenti e riproducibili con specifici parametri sperimentali predeterminati e offrono linee guida per un flusso di lavoro semplificato che garantisca un&#39;efficace esecuzione e un&#39;esperienza affidabileRisultato ntal. L&#39;articolo è stato progettato per servire da base per un&#39;ulteriore personalizzazione sperimentale basata su ipotesi, tipi di cellule staminali o specifiche tumorali.

Sia il pretrattamento ipossico ( Figura 4A ) 4 che la sovraespressione di CXCR4 ( figure 4B e 4C ) 4 aumentano significativamente la presenza di membrane delle cellule dei recettori CXCR4 come dimostrato dalla citometria a flusso. Il tropismo tumorale dimostrato da NSC (frecce blu), è mostrato nell&#39;istologia del tessuto tumorale (cerchio rosso). La presenza di cellule stami...

Le cellule staminali sono promettenti vettori terapeutici per curare i tumori cerebrali a causa del loro tropismo tumorale intrinseco. La consegna delle cellule staminali intranasali non invasive bypassa la barriera del cervello e dimostra un forte potenziale per la traduzione clinica. Questo articolo riassume i principi fondamentali della consegna delle cellule staminali intranasali in un modello di topo di glioma.

Intranasale consegna delle cellule staminali terapeutiche a Glioblastoma in un modello di mouse

The intrinsic tropism towards brain malignancies renders stem cells as promising carriers of therapeutic agents against malignant tumors. The delivery of ...

L'obiettivo generale di questo protocollo è somministrare cellule staminali terapeutiche al cervello per via intranasale in un modello preclinico murino di glioblastoma. Questo metodo può contribuire a rispondere a domande fondamentali nel campo della neuro-oncologia, in particolare se un trattamento con cellule staminali terapeutiche possa ottenere un effetto terapeutico significativo in un modello preclinico di tumore cerebrale. Il vantaggio principale di questa tecnica è che l'amministrazione intranasale facilita la somministrazione di un trattamento non invasivo e ripetibile per i tumori cerebrali, aggirando la barriera emato-encefalica, che rappresenta un ostacolo all'ingresso delle sostanze nel cervello.Questa tecnica non è limitata al glioblastoma. Può essere ampiamente estesa alla terapia di altre neoplasie cerebrali e disturbi cerebrali. I miei colleghi, Dou Yu, professore assistente di ricerca, e Gina Li, tecnologa di ricerca, mostreranno questa procedura.Iniziare coltivando le cellule di glioma di interesse da un ceppo congelato a una concentrazione di un milione di cellule per fiasca da coltura di 75 centimetri quadrati, in 15 millilitri di mezzo integrato con siero o p

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Fonte: Kim, B. D., et al. Consegna di nanoparticelle di un carico utile di oligonucleotidi in un modello animale di glioblastoma multiforme. J. Vis. Exp. (2024)Questo video mostra l'iniezione endovenosa di nanoparticelle terapeutiche in un topo portatore di glioblastoma. Il metodo consente la somministrazione mirata attraverso la barriera emato-encefalica e supporta l'imaging non invasivo per valutare la biodistribuzione delle nanoparticelle e l'efficacia terapeutica nei tumori cerebrali.

Somministrazione endovenosa di nanoparticelle terapeutiche in un modello di glioblastoma murino

Questo video dimostra la somministrazione intranasale di cellule staminali neurali terapeutiche caricate con virus oncolitici in un modello murino portatore di tumore cerebrale. La somministrazione intranasale non invasiva di cellule staminali bypassa la barriera ematoencefalica, facilitando la loro consegna al sito tumorale nel cervello per applicazioni terapeutiche.

Somministrazione intranasale di cellule staminali neurali terapeutiche (NSC) in modello murino: una procedura per la somministrazione mirata al tumore di NSC caricate con virus oncolitico in un modello murino portatore di tumore cerebrale

Fonte: Shahror, R. A. et. al., Monitoraggio delle cellule staminali mesenchimali marcate con ossido di ferro superparamagnetico utilizzando la risonanza magnetica dopo la consegna intranasale in un modello murino di lesione cerebrale traumatica. J. Vis. Exp. (2019)Questo video mostra la somministrazione intranasale di cellule staminali mesenchimali (MSC) in un modello murino. Le MSC vengono assorbite nel tessuto nasale, migrano verso il cervello attraverso i segnali delle citochine e secernono...

Consegna intranasale di cellule staminali mesenchimali in un modello murino di lesione cerebrale traumatica

Fonte: Parajuli, B., et.al. Trapianto di microglia derivate da cellule staminali pluripotenti indotte umane in cervello di topi immunocompetenti per via transnasale non invasiva. J. Vis. Exp. (2022).Questo video mostra il trapianto transnasale di cellule di microglia umana derivate da cellule staminali pluripotenti indotte (iPSMG) in un cervello di topo. La ialuronidasi viene applicata alle narici di un topo impoverito di microglia per migliorare la permeabilità. La sospensione di iPSMG viene...

Trapianto transnasale di cellule microgliali umane derivate da cellule staminali pluripotenti indotte nel cervello di topo

Alla ricerca di tumore terapeutiche cellule staminali mesenchimali (MSCs) mostrano la promessa come trattamento per glioblastoma dilagante. Trapianto ottimo coinvolge consegna delle MSC in cavità di resezione del tumore su ponteggi. Qui, preclinici tecniche per studiare il trattamento del MSC di glioblastoma sono forniti tra cui: resezione del tumore immagine-guida; impianto di scaffold MSC-seminato; e terapia postoperatoria di rilevamento.

Immagine-Guida di resezione del Glioblastoma e l'impianto intracranico di terapeutica delle cellule staminali-seminato ponteggi

Qui, presentiamo un protocollo per la preparazione e la somministrazione stereotassica di linfociti umani allogenici in topi immunodeficienti portatori di tumori cerebrali primari umano ortotopico. Questo studio fornisce un proof-of-concept per sia la fattibilità e l'efficacia antitumorale di immunoterapie cellulari intrabrain-consegnato.

Trasferimento adottivo stereotactic di citotossici cellule immunitarie nei modelli murini di xenotrapianti Multiforme di Glioblastoma umano ortotopico

Un metodo per la fornitura di cellule staminali neurali, adattabile per l'iniezione di soluzioni o sospensioni, attraverso l'arteria carotide comune (mouse) o l'arteria carotide esterna (ratto) dopo ictus ischemico è segnalato. Le cellule iniettate sono distribuite ampiamente in tutto il parenchyma cerebrale e possono essere rilevate fino a 30 d dopo la consegna.

Consegna intra-arteriosa di cellule staminali neurali al cervello di ratto e topo: applicazione all'ischemia cerebrale

Qui, descriviamo un modello murino ortotopico preclinico per GBM, stabilito mediante iniezione intracranica di cellule derivate da tumori modello murino geneticamente modificati. Questo modello mostra le caratteristiche della malattia del GBM umano. Per gli studi traslazionali, il tumore cerebrale del topo viene monitorato mediante risonanza magnetica in vivo e istopatologia.

Modelli ortotopici traslazionali di glioblastoma multiforme

La riparazione dell'arteria intracarotide in un modello murino dopo l'iniezione restituisce il flusso sanguigno all'arteria senza influire negativamente sulla distribuzione del materiale iniettato. La riparazione del sito di iniezione facilita le iniezioni successive attraverso la stessa arteria e previene l'ischemia cerebrale nei ceppi di topo privi di un Circle of Willis completo.

Facilitare la ripetizione delle iniezioni intracarotidei in modelli murini mediante una nuova tecnica di riparazione del sito di iniezione

Il presente protocollo descrive lo sviluppo di un modello murino riproducibile di glioma del midollo spinale mediante l'iniezione di cellule tumorali nello spazio intervertebrale, offrendo un approccio più efficace e meno invasivo per la ricerca e lo sviluppo terapeutico.

Trapianto chirurgico di cellule tumorali nel midollo spinale di topi

L'obiettivo di questo protocollo è fornire ai ricercatori una tecnica altamente riproducibile per le impianti intracraniche.

Impianto intracranico stereotassico di linee cellulari xenoinnestate derivate dal paziente con glioblastoma nei topi

Scopri la somministrazione intranasale di cellule staminali terapeutiche per il trattamento del glioblastoma in un modello murino. Questo metodo non invasivo bypassa la barriera ematoencefalica e offre potenziali applicazioni in neuro-oncologia.

Intranasale consegna delle cellule staminali terapeutiche a Glioblastoma in un modello di mouse

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