Localizzazione dei geni del recettore degli odoranti nell'antenna di Locust da RNA In Situ Ibridazione

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di localizzare i geni dei recettori degli odori espressi a basso livello e altri geni nelle antenne degli insetti utilizzando sonde marcate con digossigenina o biotina. Per iniziare questa procedura, selezionare le nuove locuste adulte in muta che sono attive e hanno le antenne intatte, quindi tagliare le antenne in pezzi di due o tre millimetri usando rasoi sterili. Quindi, applicare il composto OCT su un supporto per microtomo di congelamento e posizionare i campioni sul composto orizzontalmente.

Trasferire il supporto nel microtomo di congelamento a una temperatura negativa di 24 gradi Celsius per equilibrare fino a quando il composto non si congela. Successivamente, estrarre il supporto e coprire i campioni con un po' di composto. Trasferire nuovamente il supporto nel microtomo di congelamento a una temperatura negativa di 24 gradi Celsius per almeno 10 minuti, quindi sezionare i campioni congelati in fette spesse 12 micrometri.