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Saggio per la fosforilazione e l'associazione dei microtubuli con localizzazione della proteina T...
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Assay for Phosphorylation and Microtubule Binding Along with Localization of Tau Protein in Colorectal Cancer Cells

Saggio per la fosforilazione e l'associazione dei microtubuli con localizzazione della proteina Tau in cellule di cancro del colon-retto

Full Text
9,457 Views
12:55 min
October 10, 2017

DOI: 10.3791/55932-v

Md Nazmul Huda1,2, Erdenedolgor Erdene-Ochir1,2, Cheol-Ho Pan1,2

1Systems Biotechnology Research Center,KIST Gangneung Institute of Natural Products, 2Division of Bio-Medical Science & Technology, KIST School,Korea University of Science and Technology

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Questo manoscritto descrive protocolli standard per la misurazione iperfosforilazione di tau, associazione tau ai microtubuli e la localizzazione intracellulare Tau dopo trattamenti farmacologici di misura. Questi protocolli possono essere utilizzati in modo ripetitivo per lo screening di farmaci o altri composti che ottenere tau iperfosforilazione o dei microtubuli associazione.

L'obiettivo generale di questa procedura è studiare la fosforilazione della tau, le capacità di legame dei microtubuli della tau e la localizzazione della tau, utilizzando la microscopia confocale nelle cellule tumorali del colon-retto. Questo metodo può essere efficace per la maggior parte dei campi della ricerca biologica, in particolare la ricerca sul cancro e la demenza, dove la fosforilazione e il legame con i microtubuli sono fattori importanti. Il vantaggio principale del test della fosforatasi presentato è che fornisce un modo semplice per percepire l'intera fosforilazione dei campioni proteici.

Il vantaggio principale del saggio di legame dei microtubuli è che si tratta di una procedura semplice per separare le proteine leganti i microtubuli dalle frazioni non leganti. Tuttavia, i principali vantaggi della tecnica di localizzazione della tau è che richiede una quantità relativamente piccola di anticorpi primari e secondari. Per iniziare questa procedura, preparare tutti i reagenti come indicato nel protocollo di testo.

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