Effetti dell'esposizione di formaldeide per un modello del ratto della dermatite atopica indotta dal trattamento neonatale capsaicina

L'obiettivo generale di questa procedura è indurre sintomi simili alla dermatite atopica mediante trattamento neonatale con capsaicina. E per misurare l'effetto della formaldeide sui sintomi simili alla dermatite atopica. Questo metodo può aiutare a rispondere a una domanda chiave relativa alla fisiopatologia della dermatite atopica in campo dermatologico.

Il principale vantaggio di questa tecnica è l'induzione di sintomi simili alla dermatite atopica e la creazione di un importante sistema di esposizione con gli incrementi. Per preparare una soluzione di capsaicina da cinque milligrammi per millilitro, aggiungere un millilitro di Tween 80, un millilitro di etanolo al 100% e 50 milligrammi di capsaicina in un tubo conico da 15 millilitri. Quindi aggiungere otto millilitri di soluzione fisiologica normale al tubo conico.

Tappare e agitare energicamente la provetta fino a quando non sono visibili strati separati. È fondamentale somministrare la capsaicina tra le 12 e le 48 ore dopo la nascita. Iniettare la soluzione di capsaicina nel tessuto sottocutaneo sulla linea mediana e sul retro del collo di un ratto Sprague Dawley neonatale.

Per prevenire l'arresto respiratorio dovuto all'iniezione di capsaicina, posizionare i neonati in una camera di ossigeno fino a quando la respirazione non diventa normale. Se necessario, spingere il torace dei neonati per favorire la respirazione. Inizia preparando camere di plastica dotate di uno specchio per consentire una copertura completa per la visione e fori per consentire ai ratti di respirare.

Metti i ratti nella camera di plastica e copri il soffitto della camera con un oggetto pesante per evitare che il coperchio si apra. Quindi imposta una videocamera digitale per registrare contemporaneamente sia le viste speculari che le viste frontali dei ratti. Quindi registra i comportamenti spontanei dei ratti per un'ora.

Riproduci i video clip e conta il numero di comportamenti di graffio come quelli esibiti dal ratto a destra. E il topo al centro. Per valutare le lesioni, identificare l'estensione e la gravità della dermatite nelle orecchie e in altre parti di un ratto anestetizzato.

Definire la dimensione unitaria per l'estensione delle lesioni cutanee come 0,25 centimetri al quadrato. E la gravità delle lesioni cutanee utilizzando questa tabella. Prepara una scatola di vetro acrilico con due connettori sui lati opposti.

Per la circolazione del gas formaldeide, l'uscita di sfiato deve essere posizionata più in alto rispetto all'uscita di aspirazione del gas. Collegare i tubi a entrambi i connettori. Far passare il tubo di scarico dello sfiato verso la cappa di circolazione o all'esterno dell'edificio per l'emissione del gas.

E collegare l'altro tubo di ingresso a un regolatore di ossigeno medico. Posiziona una gabbia per topi convenzionale all'interno della scatola di vetro acrilico. Metti i ratti di una settimana nella gabbia e poi sigilla la scatola di vetro acrilico il più strettamente possibile per evitare perdite di gas.

Applicare la pellicola trasparente per avvolgere la camera e chiudere la camera con un coperchio gommato per una tenuta ermetica. Aggiungere la soluzione di formaldeide allo 0,5% al flacone dell'umidificatore collegato al regolatore di ossigeno medicale. Non dimenticare che lavorare con la formaldeide può essere estremamente pericoloso.

E precauzioni come maschere e guanti dovrebbero sempre essere prese eseguendo questa procedura. Quindi accendi il regolatore e imposta la portata a cinque litri al minuto. Esporre i ratti al gas formaldeide per un periodo di due ore.

Qui sono mostrate fotografie rappresentative dell'infiammazione cutanea nel ratto trattato con capsaicina. Qui è mostrato lo sviluppo cronologico della dermatite dei ratti trattati con capsaicina. Questa immagine illustra lo sviluppo cronologico dei comportamenti di graffio nei ratti trattati con capsaicina.

Questa è un'immagine rappresentativa delle lesioni cutanee recidivanti di ratti trattati con capsaicina di 16 settimane. I livelli sierici di IgE sono significativamente elevati negli animali trattati con capsaicina. Un aumento significativo dell'espressione dell'mRNA di IL-4 è stato osservato anche negli animali trattati con capsaicina.

Qui è mostrato un aumento significativo dell'espressione dell'mRNA di IL-13 negli animali trattati con capsaicina. Queste fotografie rappresentative mostrano la dermatite atopica dopo la quinta settimana di trattamento utilizzando 1,2 parti per milione. E 0,8 parti per milione di formaldeide rispetto al trattamento controllato con aria.

L'esposizione a 1,2 parti per milione di formaldeide, ma non a 0,8 parti per milione di formaldeide, ha esacerbato significativamente il prurito nel modello di dermatite atopica trattata con capsaicina. Risultati simili sono stati osservati quando è stata misurata la dermatite. Un aumento dei livelli sierici di IgE è stato osservato nel modello di ratto AD trattato con capsaicina trattato con un'esposizione di 1,2 parti per milione di formaldeide.

Seguendo questa procedura, altri materiali come la soluzione di gylcol possono essere utilizzati per rispondere a ulteriori domande relative agli effetti di una particolare materia sulla dermatite atopica. Dopo questi sviluppi, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della dermatologia per esplorare il ruolo dei fattori ambientali nella patogenesi della dermatite atopica.