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Developmental Biology
Imaging Live di Mouse Seconda Palate Fusion
Imaging Live di Mouse Seconda Palate Fusion
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Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

Imaging Live di Mouse Seconda Palate Fusion

Full Text
8,048 Views
06:10 min
July 27, 2017

DOI: 10.3791/56041-v

Seungil Kim1, Jan Prochazka2, Jeffrey O. Bush1

1Department of Cell and Tissue Biology, Program in Craniofacial Biology and Institute for Human Genetics,University of California San Francisco, 2Laboratory of Transgenic Models Diseases,Czech Centre for Phenogenomics, Institute of Molecular Genetics of the Czech Academy of Sciences

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a protocol for live imaging of mouse secondary palate fusion using confocal microscopy. The method allows for direct observation of cellular processes during craniofacial development and can be adapted for other developmental systems.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Developmental Biology
  • Imaging Techniques

Background

  • Understanding secondary palate fusion is crucial for craniofacial development.
  • Live imaging techniques provide insights into dynamic cellular processes.
  • Fluorescent reporter mouse lines enhance visualization of specific tissues.
  • Pathway inhibitors can be used to study mechanistic insights.

Purpose of Study

  • To develop a reliable protocol for observing palate fusion in real-time.
  • To facilitate the study of cellular dynamics during craniofacial development.
  • To enable the use of various fluorescent markers for enhanced imaging.

Methods Used

  • Confocal microscopy for live imaging of mouse embryos.
  • Dissection techniques to isolate the head and palatal structures.
  • Use of fine forceps to manipulate delicate tissues without damage.
  • Application of fluorescent reporters to visualize cellular processes.

Main Results

  • Successful imaging of secondary palate fusion in live embryos.
  • Demonstrated the importance of maintaining the midline epithelia seam during dissection.
  • Provided a framework for future studies on craniofacial development.
  • Adaptability of the protocol for other developmental systems was confirmed.

Conclusions

  • The protocol offers a valuable tool for researchers studying palate fusion.
  • Live imaging enhances understanding of cellular dynamics in development.
  • Future applications may extend to other areas of developmental biology.

Frequently Asked Questions

What is the main focus of this study?
The study focuses on live imaging of mouse secondary palate fusion during craniofacial development.
What imaging technique is used?
Confocal microscopy is used for live imaging in this protocol.
Can this protocol be adapted for other systems?
Yes, the protocol can be adapted for live imaging in other developmental systems.
What is the significance of using fluorescent reporters?
Fluorescent reporters enhance visualization of specific tissues during imaging.
How does this study contribute to craniofacial research?
It provides a method to observe dynamic cellular processes involved in palate fusion.

Qui presentiamo un protocollo per l'imaging in diretta di fusione secondaria del palato del mouse usando la microscopia confocale. Questo protocollo può essere utilizzato in combinazione con una varietà di linee fluorescenti del mouse del reporter, e con inibitori del percorso per l'intuizione meccanica. Questo protocollo può essere adattato all'immagine dal vivo in altri sistemi di sviluppo.

L'obiettivo generale di questo metodo di imaging confocale dal vivo è osservare direttamente i processi cellulari, la fusione secondaria del palato dell'unità durante lo sviluppo craniale facciale. Inizia separando la testa dal corpo dell'embrione al microscopio da dissezione in una capsula di Petri contenente PBS fresco a temperatura ambiente. Afferra la testa con un paio di pinze sottili numero cinque e usa un secondo paio di pinze per rimuovere la parte superiore del cervello, tagliando via il tessuto in eccesso al di fuori dei ripiani palatali con un secondo paio di pinze.

Rimuovere la mandibola con cautela senza danneggiare i ripiani palatali. Quando la mandibola è stata staccata, rimuovere con cautela la lingua e confermare la presenza di un robusto segnale reporter nella cucitura dell'epitelio della linea mediana. È importante non danneggiarlo, ha spiegato il palato durante la dissezione, per mantenere intatta la cucitura dell'epitelio della linea mediana.

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