High throughput Screening per eredità a base di proteine in S. cerevisiae

L'obiettivo generale di questa fenotipizzazione del lievito ad alto rendimento è quello di individuare le proteine che illecitano una memoria fenotipica duratura dell'espressione passata, come proxy per l'ereditarietà basata sulle proteine. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo del lievito Prione, come ad esempio, quante proteine può ereditare illecitamente di questo tipo. Il vantaggio principale di questa tecnica è che è possibile eseguire lo screening di molte proteine e percorsi in modo imparziale.

Inizia questa procedura facendo crescere le cellule di lievito appropriate in una piastra a 96 pozzetti a 30 gradi Celsius, come descritto nel protocollo di testo. Ispezionare visivamente le colture per confermare che le colture siano sature, le cellule dovrebbero essere visibili ad occhio, sul fondo di ogni pozzetto. Utilizzare un robot per la manipolazione dei liquidi per preparare piastre da 384 pozzetti, contenenti 45 microlitri del terreno appropriato per pozzetto.