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Confocale Imaging di Neuropeptide Y-pHluorin: una tecnica per visualizzare esocitosi di granuli d...
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JoVE Journal Biology
Confocal Imaging of Neuropeptide Y-pHluorin: A Technique to Visualize Insulin Granule Exocytosis in Intact Murine and Human Islets

Confocale Imaging di Neuropeptide Y-pHluorin: una tecnica per visualizzare esocitosi di granuli di insulina in isolotti intatti Murine ed umani

Full Text
9,700 Views
09:41 min
September 13, 2017

DOI: 10.3791/56089-v

Madina Makhmutova1, Tao Liang2, Herbert Gaisano2, Alejandro Caicedo1, Joana Almaça1

1Department of Medicine,University of Miami, 2Department of Medicine,University of Toronto

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Descriviamo un protocollo per la visualizzazione di esocitosi di insulina in isolotti intatti usando pHluorin, una proteina fluorescente verde sensibili al pH. Gli isolotti isolati sono infettati con l'adenovirus codifica pHluorin accoppiato per il vescicola carico neuropeptide Y. Questo consente il rilevamento degli eventi di fusione granello dell'insulina mediante microscopia confocale.

L'obiettivo generale di questo test è visualizzare l'esocitosi dei granuli di insulina in tempo reale in isole pancreatiche intatte mediante microscopia confocale. Questo metodo risponderà a domande chiave nel campo del diabete. Ad esempio, cosa regola l'esocitosi dell'insulina?

Questo è fondamentale perché la fusione dei granuli è l'evento più importante nella vita di una cellula migliore. Il vantaggio principale di questa tecnica è che possiamo utilizzare isole intatte, possiamo vedere eventi di fusione nelle cellule all'interno del loro ambiente nativo. Madina Mahkmutova, una dottoranda del nostro laboratorio, dimostrerà la tecnica.

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