Errore di verifica nell'industria farmaceutica a causa di impurità di superficie in acciaio inox per la pulizia

L'obiettivo generale di questo lavoro è quello di ottenere recuperi elevati e riproducibili di residui farmaceutici dalla superficie di provini in acciaio inossidabile applicando le migliori pratiche per lo sviluppo di metodi di pulizia analitica per piccole molecole, proteine terapeutiche e anticorpi. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della verifica della pulizia nell'industria farmaceutica, ad esempio perché la verifica della pulizia delle apparecchiature di produzione non riesce. Il vantaggio principale di questo studio è che mostra la procedura per pulire correttamente la superficie dei coupon in acciaio inossidabile utilizzati per la convalida del metodo analitico.

Per iniziare questo esperimento, preparare soluzioni campione del farmaco disciolto nel diluente di scelta dopo aver calcolato il limite di pulizia per un farmaco. Pulisci i tagliandi in acciaio inossidabile risciacquandoli con acqua e strofinando la superficie due volte per 10-15 secondi. Quindi, ripetere questa fase di risciacquo e pulizia con metanolo per eliminare eventuali depositi residui.

Per eseguire l'approccio di pulizia avanzato utilizzando soluzioni clean in place, immergere i provini in cromatografia liquida ad alta prestazione o acqua di grado HPLC e sonicare per due minuti. Immergere i tagliandi in una soluzione detergente alcalina allo 0,1% in acqua di grado HPLC e sonicare per due minuti. Immergere nuovamente i coupon in acqua HPLC e ripetere la sonicazione per due minuti.

Quindi, immergerli in una soluzione detergente acida allo 0,1% in acqua HPLC e sonicare per due minuti. Terminare con due minuti di sonicazione in acqua HPLC. Successivamente, utilizzando un nastro biadesivo, montare i tagliandi in acciaio inossidabile sul fondo di un bicchiere di plastica da 250 millilitri.

Tenere il becher durante la procedura per facilitare l'inchiodatura e il tampone e per evitare incidenti. Utilizzare una pipetta a spostamento positivo per infondere un volume di farmaco definito, alla concentrazione e alla formulazione desiderate, in uno schema vorticoso sulla superficie del coupon. Una volta che la superficie del coupon è asciutta, immergere un tampone asciutto in una fiala con due millilitri di diluente.

Premere il tampone contro l'interno del flaconcino per rimuovere il solvente in eccesso. Utilizzare tratti uniformi e sovrapposti da un lato all'altro per pulire saldamente la superficie del coupon con un lato del tampone umido, fino a pulire l'area di test totale di 50 centimetri quadrati. Utilizzare lo stesso lato del tampone per ripetere il processo di pulizia.

Tamponare due volte ciascuno dei quattro bordi del coupon. Ruotare il coupon di 90 gradi e utilizzare l'altro lato del tampone, ruotando ora la direzione di pulizia di 90 gradi. Ripetere la pulizia utilizzando questo lato del tampone allo stesso modo, assicurandosi di pulire due volte tutti e quattro i bordi del coupon.

Dopo la pulizia della superficie, utilizzare le forbici per tagliare la testa del tampone nella fiala di solvente. Successivamente, ripetere l'intera procedura di tamponamento utilizzando un secondo tampone, ruotando il coupon di 90 gradi verso la stessa direzione scelta in precedenza. Quindi, sonicare la fiala contenente due teste di tampone per cinque minuti.

Quindi, agitare la fiala per 10 secondi. Infine, trasferire la soluzione in una fiala HPLC ed etichettarla come soluzione funzionante. Per recuperare il campione, preparare le soluzioni di controllo mescolando 200 microlitri di ogni soluzione di spilling o campione con 1.800 microlitri di diluente.

Utilizzare queste soluzioni per eseguire la cromatografia secondo il protocollo di testo. Calcolare il recupero della soluzione di lavoro del tampone in base all'area relativa sotto i picchi delle soluzioni di lavoro e di controllo. Ripeti questo processo per tre cedole per calcolare il recupero medio e la relativa deviazione standard.

Prima che i coupon fossero puliti, i risultati di recupero per i diversi livelli di picco erano incoerenti, indipendentemente dal rapporto tra l'ingrediente farmaceutico attivo o l'eccipiente API, dai diversi analisti o persino dal giorno diverso per lo stesso analista. La maggior parte dei risultati del recupero presentava un'elevata deviazione standard relativa. La variabilità osservata nel recupero non è stata eliminata quando sono stati regolati diversi parametri, tra cui la tecnica di tamponamento, il diluente, il solvente di spiking, il pH della spike e del diluente, la tecnica di spiking e la tecnica di estrazione.

La differenza tra il recupero individuale su ciascuna superficie cedolare e il recupero medio mostra che il recupero medio è diverso da una superficie cedolare all'altra, quindi è molto probabile che la variabilità osservata derivi dalle differenze tra le superfici cedolari. Dopo aver seguito la pulizia dei coupon descritta in questo protocollo, i risultati del recupero sono stati riproducibili da uno studio all'altro, con una differenza minima nel recupero tra i coupon. La pulizia dei coupon eseguita qui ha portato a recuperi superiori al 90% Inoltre, i valori di deviazione standard relativa per ciascun livello di spiking erano accettabili e inferiori ai risultati ottenuti prima della pulizia.

Una volta padroneggiata, la pulizia dei tagliandi può essere effettuata in meno di 30 minuti, se eseguita correttamente. Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordare come eseguire correttamente il picco e il recupero senza perdere l'analisi di interesse. Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come pulire correttamente le superfici in acciaio inossidabile per ottenere recuperi elevati e riproducibili dei residui.

Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori dell'industria farmaceutica per fornire dati di pulizia affidabili per i processi di produzione.