Name: Costruzione e valutazione di un modello murino Osteolysis Calvarial tramite lesposizione a particelle di CoCrMo in allentamento asettico (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-02-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 46 s
Description: Impara a costruire e valutare un modello murino di osteolisi calvarica esponendo il tessuto a nanoparticelle di CoCrMo. Questo metodo permette di studiare le interazioni tra particelle di usura e cellule nell'allentamento asettico.

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Questo studio è stato sostenuto da National Natural Science Foundation of China (81572111), la scienza clinica e tecnologia progetto Fondazione della provincia di Jiangsu (BL2012002), il progetto di ricerca scientifica di Nanchino (201402007), la scienza naturale Fondazione della provincia di Jiangsu (BK20161385) e la fondazione speciale dell'associazione cinese medico (2015COS0810).

Tutti i metodi descritti qui sono stati approvati dal istituzionale Animal Care e uso Committee (IACUC) dell'Università di Nanchino.
1. preparazione delle particelle CoCrMo
<ol><li>Ottenere particelle CoCrMo utilizzando una corrente continua di fabbricato ad alto vuoto tre elettrodi4. Lega CoCrMo posto nello strumento sotto 10-3 Pa vuoto, 0,04 MPa argon e idrogeno 3:2 (v/v) e 650 A catodo attuale.</li>
	<li>Misurare i diametri delle particelle CoCrMo.<ol>
<li>Aggiungere 1 mg di CoCrMo particelle in 1,5 mL di etanolo anidro.</li>
		<li>Risospendere CoCrMo particelle in etanolo anidro agitando ad ultrasuoni a 28 kHz e 600 W per 5 min.</li>
		<li>Applicare una goccia (circa 20 µ l) della sospensione risultante sul tavolo oggettiva di un microscopio elettronico a trasmissione (TEM). Serie di foto TEM a 200 kV tensione di accelerazione e 0,24 nm risoluzione di cattura.</li>
		<li>Utilizzare il software fornito per calcolare la distribuzione delle dimensioni della particella e di diametro media in micrografie TEM.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Decontaminare le endotossine<ol>
<li>Autoclave 50g di particelle per 15 min a 121 ° C e 15 psi.</li>
		<li>Rilevare le endotossine da un'analisi quantitativa di Limulus metodo Lysate (LAL) (< 0,25% EU/mL è stato considerato per indicare assenza di endotossina)5.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Risospendere le particelle in tampone fosfato salino (PBS) ad una concentrazione di 50 mg/mL come soluzione di riserva6.</li>
</ol>2. costruzione del modello Calvarial osteolisi
<ol><li>Anestetizzare 6 settimane di età C57BL/J6 topi (sei topi per gruppo) withpentobarbital (50 mg/kg). Utilizzare il pinch test per valutare il livello di anestesia. Prevenire la secchezza degli occhi con normale soluzione salina.</li>
	<li>Posto topi in posizione prona. Rimuovere la pelliccia sul cranio con un rasoio e disinfetti la pelle usando batuffoli di cotone medico contenente etanolo di 75%.</li>
	<li>Per la localizzazione del punto, identificare due punti, inclusi i punti medi tra i due occhi e orecchie, rispettivamente. Quindi, determinare la linea tra i due punti e incise la pelle lungo la linea di cui sopra con le forbici (Figura 1A).</li>
	<li>Rimuovere il periostio cranico dalla calvaria con un bisturi (Figura 1B)6.</li>
	<li>Pelle di sutura a entrambe le estremità con semplice sutura interrotto.</li>
	<li>Fare una linea di sutura nel mezzo dell'incisione senza annodatura. Tenere le due estremità della linea di sutura.</li>
	<li>Incorporare 50 µ l di sospensione di particelle di CoCrMo (50 mg/mL, in PBS) nel mezzo del calvarias (Figura 1)2.</li>
	<li>Annodare l'ultimo punto all'interno di semplice sutura interrotto (Figura 1).</li>
	<li>Mantenere topi per altre 2 settimane.</li>
</ol>3. valutazione del modello di Osteolysis Calvarial scansionando Micro-CT
<ol><li>Sacrificare i topi con anidride carbonica. Decapitare i topi nel piano orizzontale. Rimuovere il tessuto cerebrale all'interno e la pelle e pelliccia all'esterno. Raccogliere il calvarias per ulteriori esperimenti.</li>
	<li>Tutti i tessuti molli il calvaria delicatamente chiaro con le pinzette. Difficoltà il calvarias liquidati in paraformaldeide al 4% a 4 ° C per 24 h. Immergere il calvarias in PBS 24 h prima di micro-TAC.</li>
	<li>Analizzare il calvarias di topi di micro-CT ad alta definizione a una risoluzione isometrica di 18 µm e le impostazioni di energia dei raggi x di 45 kV e 550 mA.</li>
	<li>Condurre la ricostruzione tridimensionale di dati micro-CT con il software.</li>
	<li>Analisi quantitativa e qualitativa.<ol>
<li>In primo luogo, selezionare l'area quadrata intorno la sutura mediana come la regione di interesse.</li>
		<li>In secondo luogo, misurare la densità minerale ossea (BMD), osso volume/totale volume (BV/TV), trabecular numero (Tb.N), spessore trabecolare (Tb.Th), trabecular separazione/spaziatura (Tb.Sp) e percentuale di porosità totale con il software fornito per micro-CT.</li>
		<li>In terzo luogo, confrontare i tre gruppi per varie misure di One-way ANOVA. Per post-hoc analisi della varianza, applicare il metodo di Bonferroni2.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. valutazione del modello di Osteolysis Calvarial macchiando di H & E
<ol><li>Decalcificare campioni di calvaria in 15% acido etilendiamminotetraacetico (EDTA)-PBS a 4 ° C. Cambiare la soluzione di decalcificazione ogni giorno per 3 settimane.</li>
	<li>Incorporare i campioni decalcificati in paraffina per 2 cm x 1 cm x 1 cubo di cm e tagliateli a fettine in 2 sezioni di µm nella zona di deposizione delle particelle.</li>
	<li>Macchia le sezioni con ematossilina ed eosina come precedentemente descritto7.</li>
	<li>Catturare micrografie della pathomorphism complessiva da microscopia chiara.</li>
</ol>

<ol><li>Dong, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antisense+oligonucleotide+targeting+TNF-alpha+can+suppress+Co-Cr-Mo+particle-induced+osteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Antisense oligonucleotide targeting TNF-alpha can suppress Co-Cr-Mo particle-induced osteolysis.</a> J Orthop Res. 26 (8), 1114-1120 (2008).</li>
<li>Deng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SIRT1+protects+osteoblasts+against+particle-induced+inflammatory+responses+and+apoptosis+in+aseptic+prosthesis+loosening%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">SIRT1 protects osteoblasts against particle-induced inflammatory responses and apoptosis in aseptic prosthesis loosening.</a> Acta Biomater. 49, 541-554 (2017).</li>
<li>Langlois, J., Hamadouche, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+animal+models+of+wear-particle+osteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Orthop%22%5BJournal%5D)">New animal models of wear-particle osteolysis.</a> Int Orthop. 35 (2), 245-251 (2011).</li>
<li>Wang, P., Zhao, F. X., Zhang, Z. Z. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/287666498_Preparation_of_ultrafine_silver_powders_by_DC_arc_plasma">Preparation of ultrafine zinc powders by DC arc plasma evaporation method.</a> Chinese Journal of Nonferrous Metals. 21 (9), 2236-2241 (2011).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fibroblast+expression+of+RANKL+in+CoCrMo-particle-induced+osteolysis+is+mediated+by+ER+stress+and+XBP1s%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">The fibroblast expression of RANKL in CoCrMo-particle-induced osteolysis is mediated by ER stress and XBP1s.</a> Acta Biomater. 24, 352-360 (2015).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autophagy+mediated+CoCrMo+particle-induced+peri-implant+osteolysis+by+promoting+osteoblast+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Autophagy%22%5BJournal%5D)">Autophagy mediated CoCrMo particle-induced peri-implant osteolysis by promoting osteoblast apoptosis.</a> Autophagy. 11 (12), 2358-2369 (2015).</li>
<li>Wang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Particle-induced+osteolysis+mediated+by+endoplasmic+reticulum+stress+in+prosthesis+loosening%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Particle-induced osteolysis mediated by endoplasmic reticulum stress in prosthesis loosening.</a> Biomaterials. 34 (11), 2611-2623 (2013).</li>
<li>Yang, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adeno-associated+virus-mediated+osteoprotegerin+gene+transfer+protects+against+particulate+polyethylene-induced+osteolysis+in+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Adeno-associated virus-mediated osteoprotegerin gene transfer protects against particulate polyethylene-induced osteolysis in a murine model.</a> Arthritis Rheum. 46 (9), 2514-2523 (2002).</li>
<li>Liu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autophagy+mediated+TiAl%286%29V%284%29+particle-induced+peri-implant+osteolysis+by+promoting+expression+of+TNF-alpha%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Autophagy mediated TiAl(6)V(4) particle-induced peri-implant osteolysis by promoting expression of TNF-alpha.</a> Biochem Biophys Res Commun. 473 (1), 133-139 (2016).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ER+Stress+Mediates+TiAl6V4+Particle-Induced+Peri-Implant+Osteolysis+by+Promoting+RANKL+Expression+in+Fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">ER Stress Mediates TiAl6V4 Particle-Induced Peri-Implant Osteolysis by Promoting RANKL Expression in Fibroblasts.</a> PLoS One. 10 (9), e0137774(2015).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TiAl6V4+particles+promote+osteoclast+formation+via+autophagy-mediated+downregulation+of+interferon-beta+in+osteocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">TiAl6V4 particles promote osteoclast formation via autophagy-mediated downregulation of interferon-beta in osteocytes.</a> Acta Biomater. 48, 489-498 (2017).</li>
<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lycorine+suppresses+RANKL-induced+osteoclastogenesis+in+vitro+and+prevents+ovariectomy-induced+osteoporosis+and+titanium+particle-induced+osteolysis+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Lycorine suppresses RANKL-induced osteoclastogenesis in vitro and prevents ovariectomy-induced osteoporosis and titanium particle-induced osteolysis in vivo.</a> Sci Rep. 5, 12853(2015).</li>
<li>Neuerburg, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+calcitonin+receptor+signalling+in+polyethylene+particle-induced+osteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">The role of calcitonin receptor signalling in polyethylene particle-induced osteolysis.</a> Acta Biomater. 14, 125-132 (2015).</li>
<li>Catelas, I., Jacobs, J. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20415362">Biologic activity of wear particles.</a> Instr Course Lect. 59, 3-16 (2010).</li>
<li>Liu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biological+response+to+nanometre-sized+polymer+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">The biological response to nanometre-sized polymer particles.</a> Acta Biomater. 23, 38-51 (2015).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Ci sono due metodi principali per usura osteolysis particella-indotto in topi: il modello aria-sacchetto e il modello di calvarial osteolisi. Nel modello aria-sacchetto, un sacchetto di aria generato per via sottocutanea è stabilito in primo luogo, seguito da introduzione delle particelle di usura e l'impianto nel tessuto osseo8. Il muro di sacchetto imita il periostio in allentamento asettico. Tuttavia, l'impianto osseo è non vascolare con nessuna attività biologica, che lo rende difficile valuta...

Mobilizzazione asettica è la causa più comune di arthroplasty totale dell'anca (THA) e guasto (TKA) arthroplasty totale del ginocchio, che richiede la chirurgia di revisione1. Tuttavia, il meccanismo di fondo rimane poco chiaro2. Un lungo follow-up è necessario per rilevare il osteolysis particella-indotto, cui il caso è raro; di conseguenza, è difficile per esplorare la relativa patogenesi nei casi clinici. Quindi, ulteriori studi concentrandosi sui complessi meccanismi cellulari e tessutali richiedono che entrambi gli esperimenti in vivo a indossano modelli osteolysis particella-indotto e saggi in vitro in cellule legate alle ossa omeostasi3. Un valido modello animale è importante nel rivelare gli effetti particelle di usura su perdita dell'osso, fornendo la prova per ulteriori test cellulari.
Un modello murino osteolisi calvarial costruito tramite l'esposizione a particelle di CoCrMo è un metodo efficace e valido per valutare le interazioni tra particelle e varie cellule nella mobilizzazione asettica. In questo modello, le particelle CoCrMo provocare osteolisi calvarial d'induzione di citochine infiammatorie in macrofagi, attivando gli osteoclasti, inibendo la proliferazione degli osteoblasti, e promuovendo l'apoptosi degli osteoblasti.
Ci vogliono solo due settimane per stabilire questo modello. Osteolisi possono essere visualizzato e quantificata con ematossilina ed eosina (H & E) e micro computato tomografia (micro-CT)2. Inoltre, questo modello ha un relativamente basso costo e transgenico e knockout mouse modelli possono essere utilizzati per lo screening di un gran numero di composti alle varie dosi3.
La procedura per stabilire e valutare questo modello è semplice. In primo luogo, CoCrMo particelle sono state ottenute da tre elettrodi ad alto vuoto corrente e risospesi in tampone fosfato salino (PBS) ad una concentrazione di 50 mg/mL. Quindi, 50 µ l della sospensione risultante è stato applicato alla metà del calvaria murino dopo separazione del periostio cranico di dissezione. I topi sono stati sacrificati dopo due settimane, e sono stati raccolti campioni di calvaria; analisi qualitative e quantitative sono state effettuate da H & E che macchia andmicro-CT.
Un modello murino osteolisi calvarial costruito tramite l'esposizione a particelle di CoCrMo è uno strumento ideale per valutare le interazioni tra particelle CoCrMo e varie cellule, quali i macrofagi, fibroblasti, osteoblasti e osteoclasti, in allentamento asettico.

<table><tbody><tr><td>Lega CoCrMo da protesi</td><td>Waldemar Link GmbH & Co</td><td>GEMINI MK II</td><td>Materia prima per ottenere nanoparticelle di CoCrMo</td></tr><tr><td>Fabbricato ad alto vuoto a corrente continua a tre elettrodi</td><td>College of Materials Science & Ingegneria, Nanjing University of Technology</td><td></td><td>Macchina auto-progettata Maschio</td></tr><tr><td>C57BL / 6J topi</td><td>modello di 6 settimane Centro di ricerca animale dell'Università di Nanchino</td><td>N000013</td><td></td></tr><tr><td>100% etanolo</td><td>Nanjing Reagente</td><td>C0691514023</td><td>Solvente di nanoparticelle CoCrMo per la scansione al microscopio elettronico a trasmissione</td></tr><tr><td>1,5 ml Provette per microcentrifuga</td><td>Taizhou Weierkang Medical Supplies co., LTD</td><td>Bilancia microanalitica W603</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Shenzhen Qun long Instrument Equipment Co,. LTD</td><td>EX125DZH</td><td></td></tr><tr><td>Agitatore ad ultrasuoni</td><td>Shanghai Yuhao strumento scientifico co., LTD</td><td>YH-200DH</td><td>Per sospendere le nanoparticelle di CoCrMo</td></tr><tr><td>Trasmissione Microscopio elettronico</td><td>FEI</td><td>Tecnai G20</td><td></td></tr><tr><td>SimplePCI software</td><td>Compix Inc.</td><td>Versione 6.6</td><td>Per calcolare il diametro medio e la distribuzione granulometrica.</td></tr><tr><td>Vasca di sterilizzazione ad alta portata</td><td>QIULONGYIQI</td><td>KYQL-100DS</td><td>Per decontaminare l'endotossina</td></tr><tr><td>Limulus Amebocyte Lysate (LAL) Saggio</td><td>Charles River</td><td>R13025</td><td>Per rilevare l'endotossina&nbsp;</td></tr><tr><td>Provette per microcentrifuga da 15 ml</td><td>Taizhou Suyi Medical</td><td>B122</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione salina tamponata con fosfato</td><td>Boster Tecnologia biologica</td><td>AR0030</td><td>Solvente di nanoparticelle CoCrMo soluzione stock</td></tr><tr><td>Pentobarbital Sodico</td><td>Sigma</td><td>P3761</td><td>Per anestetizzare i topi</td></tr><tr><td>Soluzione salina normale</td><td>SACKLER</td><td>SR8572EP-15</td><td>Per prevenire la secchezza degli occhi dei topi</td></tr><tr><td>75% Etanolo</td><td>Nanjing Reagente</td><td>C0691560275</td><td>Disinfezione</td></tr><tr><td>Batuffolo di cotone medico</td><td>Shuitao</td><td>1278298933</td><td>Rasoio per disinfezione</td></tr><tr><td></td><td>Kemei</td><td>KM-3018</td><td>Per radere la pelliccia</td></tr><tr><td>Forbice</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>S12005-10</td><td>Per incidere la pelle</td></tr><tr><td>Sutura</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>F34001-01</td><td>Per suturare la pelle</td></tr><tr><td>Porta ago</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>F33001-01</td><td>Per suturare la pelle</td></tr><tr><td>Ago</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>R14003-12</td><td>Per suturare la pelle</td></tr><tr><td>Pinze per vasi</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>F22003-09</td><td>Per suturare la pelle</td></tr><tr><td>Bisturi</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>S31010-01</td><td>Per raccogliere pinzette calvaria</td></tr><tr><td></td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>F12006-10</td><td>Per raccogliere calvaria</td></tr><tr><td>100 &micro; L pipette</td><td>Eppendorf</td><td>3120000240</td><td>Per incorporare particelle in sospensione nel calvatias</td></tr><tr><td>100 &micro; L puntali per pipette</td><td>AXYGEN</td><td>T-200-Y</td><td>Per incorporare la sospensione di particelle nelle calvatias</td></tr><tr><td>5 ml Microprovette</td><td>Taizhou Weierkang Medical Supplies co., LTD</td><td>W621</td><td></td></tr><tr><td>4% Paraformaldeide</td><td>Servicebio</td><td>G1101</td><td>Fissazione</td></tr><tr><td>Micro Tomografia computerizzata&nbsp;</td><td>SkyScan</td><td>SkyScan1176</td><td></td></tr><tr><td>Acido etilendiammina tetraacetico</td><td>Servicebio</td><td>G1105</td><td>Decalcificazione</td></tr><tr><td>Paraffina</td><td>Servicebio</td><td>#0001</td><td></td></tr><tr><td>Affettatrice per paraffina</td><td>Leica</td><td>RM2125RTS</td><td></td></tr><tr><td>Vetrino</td><td>Servicebio</td><td>G6004</td><td></td></tr><tr><td>Vetro di copertura</td><td>Servicebio</td><td>200</td><td></td></tr><tr><td>Kit di colorazione HE</td><td>Servicebio</td><td>#1-5</td><td>Microscopio</td></tr><tr><td>ottico</td> di colorazione HE <td>Nikon</td><td>E200</td><td></td></tr></tbody></table>

costruzione e valutazione di un modello murino osteolysis calvarial tramite l'esposizione a particelle di cocrmo in allentamento asettico

Construction and Evaluation of a Murine Calvarial Osteolysis Model by Exposure to CoCrMo Particles in Aseptic Loosening

Osteolisi indotta da particelle di usura sono delle principali cause di allentamento asettico in un arthroplasty fallimento, ma il meccanismo di fondo rimane poco chiaro. A causa del lungo follow-up necessari al rilevamento ed avvenimento sporadico, è difficile per valutare l'osteolisi indotta da ofparticle patogenesi nei casi clinici. Quindi, modelli animali ottimale sono richiesti per ulteriori studi. Il modello murino di osteolysis calvarial stabilito tramite l'esposizione a particelle di CoCrMo è uno strumento efficace e valido per valutare le interazioni tra particelle e varie cellule nella mobilizzazione asettica. In questo modello, CoCrMo particelle sono state ottenute da tre elettrodi ad alto vuoto corrente e risospesi in tampone fosfato salino ad una concentrazione di 50 mg/mL. Quindi, 50 µ l della sospensione risultante è stato applicato alla metà del calvaria murino dopo separazione del periostio cranico di dissezione. Dopo due settimane, i topi sono stati sacrificati, e sono stati raccolti campioni di calvaria; valutazioni qualitative e quantitative sono state eseguite da ematossilina ed eosina e micro tomografia computata. I punti di forza di questo modello includono procedura semplicità, la valutazione quantitativa di perdita dell'osso, la rapidità di sviluppo di osteolisi, uso potenziale transgenico o Knock e un costo relativamente basso. Tuttavia, questo modello non può essere utilizzato per valutare la forza meccanica ed effetti cronici delle particelle in allentamento asettico. Modello murino osteolisi calvarial generato tramite l'esposizione a particelle di CoCrMo è uno strumento ideale per valutare le interazioni tra le particelle di usura e varie cellule, ad es., macrofagi, fibroblasti, osteoblasti e osteoclasti, in allentamento asettico.

Le particelle di CoCrMo in-house prodotta su scala nanometrica erano circa 50 nm (errore standard di 3,56) di diametro, come quantificato dal TEM (Figura 2). Dopo l'esposizione del mouse calvarias a particelle di CoCrMo, gli animali (n = 6 per ogni gruppo) sono stati mantenuti per un altro due settimane. Entro le due settimane, l'incisione calvarial era completamente guarito e la sutura può cadere. Qualsiasi infezione locale o non sindacale può influire sulla...

Questo manoscritto descrive un modello murino calvarial osteolisi da esposizione a particelle di CoCrMo, che costituisce un modello animale ideale per valutare le interazioni tra le particelle di usura e varie cellule nella mobilizzazione asettica.

Costruzione e valutazione di un modello murino Osteolysis Calvarial tramite l'esposizione a particelle di CoCrMo in allentamento asettico

Wear particle-induced osteolysis is a major cause of aseptic loosening in arthroplasty failure, but the underlying mechanism remains unclear. Due to long ...

L'obiettivo generale di questa procedura è costruire e valutare il modello di osteolisi calvarica murina mediante esposizione a nanoparticelle di cobalto-cromo-molibdeno. L'osteolisi indotta da particelle di usura è una causa importante del allentamento asettico nel fallimento dell'artroplastica, ma i meccanismi sottostanti non sono chiari. A causa del lungo periodo di follow-up e della comparsa sporadica, è difficile esplorare la patogenesi dell'allentamento asettico nei casi clinici.Pertanto, è necessario un modello animale di usura per ulteriori studi. Nel nostro laboratorio, un modello murino di osteolisi calvarica indotta da particelle di lega al cobalto rappresenta un modello efficace per lo studio della patogenesi del allentamento asettico. Questo viene realizzato generando innanzitutto particelle nanometriche di cromo-cobalto-molibdeno a partire da protesi in lega al cobalto e risospendendole in soluzione salina tamponata al fosfato a una concentrazione di 15 milligrammi per millilitro.Il passo successivo consiste nell'identificare la posizione dell'incisione lungo una linea tra i due punti medi tra occhi e orecchie, rispettivamente. Successivamente, rimuovere il periostio

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Creazione di un modello di difetto della cavità scatolare nell'osso corticale del femore di ratto

Il modello di lesione del midollo osseo murino è uno strumento utile per studiare l'osteogenesi postnatale attraverso l'ossificazione intramembranosa. Questo protocollo chirurgico semplificato descrive la procedura di ablazione del midollo osseo per la valutazione a valle della formazione di nuovo osso e delle risposte cellulari dopo la lesione.

Metodologia migliorata per lo studio dell'osteogenesi postnatale tramite ossificazione intramembranosa in un modello di lesione del midollo osseo murino

Impara a costruire e valutare un modello murino di osteolisi calvarica esponendo il tessuto a nanoparticelle di CoCrMo. Questo metodo permette di studiare le interazioni tra particelle di usura e cellule nell'allentamento asettico.

Costruzione e valutazione di un modello murino Osteolysis Calvarial tramite lesposizione a particelle di CoCrMo in allentamento asettico (Video) | JoVE Journal

Costruzione e valutazione di un modello murino Osteolysis Calvarial tramite l'esposizione a particelle di CoCrMo in allentamento asettico

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