Name: Procedure di fumigazione di laboratorio per il controllo dei parassiti con Gas di ossido di azoto (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-11-24T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 58 s
Description: Impara le procedure di fumigazione con ossido di azoto per il controllo dei parassiti post-raccolta. Questo metodo dimostra come mantenere condizioni di ultra-basso ossigeno e misurare i residui per garantire sicurezza ed efficacia.

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Questa ricerca è stata sostenuta in parte da TASC sovvenzioni da USDA Foreign Agricultural Services.

Nota: fumigazione di ossido di azoto dei prodotti freschi inizia stabilendo ossigeno bassissima condizioni nelle camere di fumigazione, seguito dall'iniezione di NO e che tiene gli alloggiamenti di fumigazione a determinate temperature per tutta la durata di un trattamento specifico e quindi è terminato lo svuotamento con N2 per diluire NO prima dell'apertura delle camere di fumigazione come illustrato (Figura 3). Misura di n.2 in spazio di testa di fumigazione chambers e nitrato e nitrito in campioni liquidi non utilizzando il modello 405 nm nessun monitor2/NO/NOx e analizzatore di ossido di azoto NOA, fare riferimento ai manuali utente dai produttori per dettagliate procedure di funzionamento.
Attenzione: l'ossido di azoto è un forte agente ossidante e reagisce con ossigeno spontaneamente per produrre biossido di azoto. Sia l'ossido di azoto e biossido di azoto sono tossici. Si prega di fare riferimento a loro MSDS per la manipolazione sicura e utilizzare. Per la sicurezza personale, tutti i passaggi di esperimenti di fumigazione di piccola scala che comportano un'esposizione di movimentazione e potenziale a NO o NO2 devono avvenire in una cappa aspirante. Un personal nessun allarme2 deve essere utilizzato per condurre grande scala niente esperimenti di fumigazione.
1. preparazione dei materiali e degli strumenti
<ol><li>
Strumenti, parti e materiali necessari per nessuna fumigazione
	<ol>
<li>Fare una busta di alluminio con una presa di tubatura per No.<ol>
<li>Sigillare l'apertura di una busta di alluminio attorno ad un tubo di politetrafluoroetilene (PTFE) utilizzando un sigillatore di calore.</li>
			<li>Quindi utilizzare colla a resina epossidica per sigillare le cuciture e giunto intorno al tubo di politetrafluoroetilene (PTFE) per produrre il sacchetto di stagnola.</li>
			<li>Aggiungere un rubinetto all'estremità del tubo. Nota: Foil borse con tubazione non sono commercialmente disponibili. Ma può essere fatto facilmente in laboratorio con i sacchetti di lamina da fonti commerciali utilizzando un sigillatore di calore. Nota: Azoto: azoto industria regolari in compressi cilindri ha una purezza del ≥99.99% ed è adatto per nessuna fumigazione. Due o più cilindri con regolatori possono essere impostati per avere prese diverse pressioni e collegati tra loro. Il cilindro con la più alta pressione di uscita verrà utilizzato per primo prima che il cilindro con la più bassa pressione di uscita verrà utilizzato. Questo sarà utile a fumigazione grandi prove.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Camere di fumigazione ermetico. Nota: Ermeticità è fondamentale per non fumigazione perché NO reagirà con O2 trapelato nella camera. Questo ridurrà NO disponibile per controllo dei parassiti e anche produrre nessun2 che possono danneggiare i prodotti freschi.<ol>
<li>Vetro vaso chambers: ingrassare il bordo del coperchio leggermente con vaselina. Quindi sigillare il vaso con il coperchio che ha due punti vendita dopo il caricamento di oggetti quali prodotti infestati dell'insetto nel barattolo. Nota: Ogni coperchio del vaso ha due punti vendita e uno dei punti vendita ha un tubo di plastica esteso alla parte inferiore del vaso per aumentare l'efficienza del ricambio d'aria.</li>
			<li>Camere in pentole a pressione: ingrassare il bordo dell'alloggiamento con vaselina. Prodotti e insetti nel vano di carico e sigillarlo con il coperchio.</li>
			<li>Camere di fumigazione grande: ingrassare la guarnizione leggermente con vaselina. Quindi caricare i prodotti in aula. Chiudere la porta. Stringere i morsetti se necessario per mantenere una tenuta ermetica. Nota: Nessun gas è altamente volatile, pertanto non esiste nessuna necessità di avere un fan in una camera di fumigazione per mantenere l'aria nella camera di misto.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. definizione delle condizioni ULO in camere di fumigazione
<ol><li>Collegare un alloggiamento per la linea2 N e un analizzatore di2 O. Nota: Un connettore a T con un'estremità va all'analizzatore e l'altra estremità dotata di una valvola di ritegno unidirezionale può essere utilizzata per rilasciare l'aria per evitare ad alta portata per l'analizzatore di2 O.</li>
	<li>Uscita N2 attraverso un misuratore di portata per svuotare la camera per rimuovere l'ossigeno.</li>
	<li>Ridurre il tasso di flusso di N2 a 0,5 - 1 L/min quando O il livello2 è vicino a 30 ppm.</li>
</ol>3. iniezione di Gas non
<ol><li>
Riempire il sacchetto senza gas.
	<ol>
<li>Riempire il sacchetto con N2 prima e poi il vuoto l'aria fuori per lavare fuori O2 dal sacchetto.</li>
		<li>Quindi non rilasciare nessun gas nel sacchetto in una cappa aspirante.</li>
		<li>Appendere il sacchetto in una cappa per essere utilizzato per nessuna fumigazione. Nota: Dopo un uso prolungato, la borsa può diventare degradata e il tubo può diventare fragile a causa degli effetti corrosivi di NO2. Così, le borse dovrà essere sostituito periodicamente.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Iniettare NO negli alloggiamenti di fumigazione.
	<ol>
<li>Lavare la siringa e attaccato tubi con N2 per scovare O2.</li>
		<li>Prelevare un campione di n da nella custodia di alluminio NO e iniettarla nelle camere di fumigazione.</li>
		<li>Dopo l'iniezione, svuotare la siringa e attaccato tubi con N2.</li>
		<li>Posto camere di fumigazione a 2 ° C per tutta la durata del trattamento di fumigazione.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. non misurare la concentrazione di in una camera di fumigazione
Nota: Non vi erano concentrazioni di fumigazione per controllo dei parassiti possono variare da 2.000 ppm (0,2%) a 50.000 ppm (5%). Questa gamma è "out of range" di corrente NO controlla. Ma, non ci sono livelli ancora può essere misurato nei campioni diluiti o utilizzando un dispositivo di diluizione.
<ol><li>
Fumigazioni di piccola camera
	<ol>
<li>Diluire i campioni di aria da vasetti di trattamento alla fine della fumigazione:<ol>
<li>Stabilire condizioni di ULO a ≤ 30 ppm O2 in vasetti.</li>
			<li>Prelevare campioni di gas da vasetti di trattamento a loro iniettare i barattoli ULO.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Misurare i livelli di2 NO e NO nei campioni prediluiti facendo circolare l'aria attraverso un monitor di gas di scarico.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Fumigazioni camera grande: le procedure sono illustrate nella Figura 4.
	<ol>
<li>Impostare un sistema di diluizione.</li>
		<li>Misurare i livelli di2 NO e NO.<ol>
<li>Accendere il monitor di gas di scarico e sciacquarlo con N2.</li>
			<li>Attivare il flusso di gas campione per misurare i livelli di2 NO e NO.</li>
			<li>Terminare la misurazione disattivando il flusso di gas campione.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. non terminare fumigazione
<ol><li>
Fumigazione di insetti solo
	<ol>
<li>Posto camere di fumigazione in una cappa aspirante.</li>
		<li>Aprire gli alloggiamenti.</li>
		<li>Recuperare gli insetti per la valutazione di mortalità. Nota: Gli insetti in genere si svolgono in una camera climatica durante la notte dopo fumigazione per consentire tutti gli insetti vivi recuperare prima che venga segnata per la mortalità.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Fumigazione di prodotti freschi
	<ol>
<li>Spostare camere di fumigazione in una cappa aspirante (per piccoli alloggiamenti).</li>
		<li>Lavare le camere di fumigazione con N2 per consentire uno scambio di aria numero specifico.</li>
		<li>Non monitorare nessun livello presso la porta di scarico. Nota: Il monitor di gas di scarico consente di non monitorare livelli durante lo svuotamento di2 N. In genere, siamo a filo camere di fumigazione per ridurre il livello di NO inferiore a 200 ppm prima di aprire gli alloggiamenti all'aria ambiente.</li>
		<li>Recuperare gli insetti per la valutazione di mortalità (se gli insetti sono inclusi).</li>
		<li>Conservare i prodotti sottoposte a fumigazione per la valutazione di qualità di analisi e post-trattamento dei residui. Nota: Consentire fumigati prodotti abbastanza tempo nella cappa fumi per NO e NO2 dissipare prima di spostarli per deposito. Prodotti fumigati vengono solitamente memorizzati a bassa temperatura insieme a controlli in un secchiello per un certo periodo prima di essere valutato per postharvest qualità e possibili lesioni.</li>
	</ol>
</li>
</ol>6. analisi dei residui
<ol><li>
Misurazione del biossido di azoto (NO2) utilizzando una 405 nm n.2/n/NOX monitorare
	<ol>
<li>Attivare e consentire la 405 nm n.2/n/NOX monitorare per riscaldarsi per circa 20-30 min.</li>
		<li>Chiudere la camera di fumigazione contenente il prodotto. Nota: Dopo la fumigazione, fumigazione alloggiamenti erano aperti e posizionati ad una certa temperatura per consentire non2 dissipare. Al momento quando non è misurato rilascio di2 , tenuta la camera chiusa ermeticamente con un coperchio con due porte dotate di rubinetto di arresto. Una temperatura di 20 ° C è stata utilizzata nella dimostrazione del procedimento.</li>
		<li>Collegare il monitor di2 NO alla camera per far circolare l'aria attraverso il monitor2 NO.</li>
		<li>Avviare immediatamente la registrazione dati su NO2 monitorare e raccolgono dati per 1 min.</li>
		<li>Scollegare la camera dal monitor e mantenere la camera sigillata. Nota: La registrazione dei dati può essere avviata tramite MENU -> Dat -> Log sul monitor2 NO, o tramite il Software di grafico su un computer.</li>
		<li>Tenere le camere stagne a 20 ° C per 1 h, quindi ripetere il passaggio di raccolta dati. Nota: L'intervallo di tempo può essere regolata a seconda del tasso di rilascio di NO2 da fumigato prodotti.</li>
		<li>Calcolare la differenza tra i due non2 concentrazioni e convertire i dati in mg/kg/h.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Nitrato e nitrito misurazioni con un analizzatore di NO GE Sievers 280i Nota: Fare riferimento al manuale del produttore e la carta21 da Yang e Liu (2017) per informazioni dettagliate.<ol>
<li>Preparazione del campione<ol>
<li>Omogeneizzare campioni di prodotto in un frullatore.</li>
			<li>15 g di campione omogeneizzato di trasferimento dal frullatore in una fiala.</li>
			<li>Aggiungere 100 mL di acqua distillata di H2O a stabilirsi per 10 minuti nel flaconcino.</li>
			<li>Filtrare il campione e conservare la soluzione filtrata a 2 ° C fino all'utilizzo.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Preparazione di agente riducente per la misura di nitrati con analizzatore di ossido di azoto Nota: Fare riferimento al manuale del produttore per informazioni dettagliate.<ol>
<li>Aggiungere 0,8 g di cloruro di vanadio (VCl3) in un pallone.</li>
			<li>Lentamente aggiungere 100 mL di acido di 1 M cloridrato (HCl) in un matraccio con la VCl3, la boccetta di cap e agitare più volte.</li>
			<li>Filtrare la soluzione utilizzando un imbuto e carta da filtro e sigillare la bottiglia di soluzione filtrata con carta stagnola e conservarlo in frigorifero.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Misurazione di nitrato e nitrito con analizzatore di ossido di azoto Nota: Fare riferimento al manuale del produttore per informazioni dettagliate.<ol>
<li>Preriscaldare il sistema a bagnomaria a 95 ° C. Aggiungere 4-6 mL di nitrato riducente in un vaso di spurgo e regolare la portata di gas inerte ad un livello adeguato. Nota: Il gas inerte era lui. N2 gas può anche essere utilizzato.</li>
			<li>Iniettare 5 µ l di soluzione di esempio usando una siringa nel contenitore per l'eliminazione dei fogli inceppati.</li>
			<li>Procedere con la successiva iniezione del campione quando il picco di campione è finito.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Misurazione di nitrito con analizzatore di ossido di azoto Nota: Fare riferimento al manuale del produttore per informazioni dettagliate.<ol>
<li>Regolare la valvola sulla nave di eliminazione dei fogli inceppati di avere 1-2 psi di pressione per gas inerte.</li>
			<li>Aggiungere 4-6 mL di acido acetico concentrato per riempire la prima lampadina del vaso di spurgo.</li>
			<li>Pesare 50 mg di ioduro di sodio (NaI) e dissolverlo in 1-2 mL H2O.</li>
			<li>Aggiungere la soluzione di NaI alla nave di eliminazione dei fogli inceppati e consentire la miscelazione per 1-2 minuti.</li>
			<li>Aumentare il tasso di flusso di gas inerte ad un livello adeguato.</li>
			<li>Iniettare 5 µ l di soluzione di esempio usando una siringa nel contenitore per l'eliminazione dei fogli inceppati.</li>
			<li>Procedere con la successiva iniezione del campione quando è finito il picco del campione.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>7. valutazione postharvest qualità di frutta e verdura
Nota: Lesioni prodotto da nessuna fumigazione possono presentarsi immediatamente dopo fumigazione (Figura 5). Tuttavia, la qualità del prodotto viene valutata solitamente dopo 1-2 settimane di conservazione a freddo post-trattamento. Sintomi di lesioni progrediranno nel tempo e possono essere meglio identificati nella valutazione della qualità. Procedure per la valutazione di diversi prodotti freschi possono differire sostanzialmente. Solo le procedure per la valutazione della qualità di lattuga sono dimostrate qui come un esempio di utilizzo delle procedure stabilite5.
<ol><li>Rimuovere lattuga da conservazione frigorifera due settimane dopo la fumigazione. Impacchi di rimuovere e ispezionare superfici per le macchie e lo scolorimento per tutti i trattamenti inclusi i controlli.</li>
	<li>Punteggio e record esterno di qualità visiva per tutti i trattamenti basati su procedure stabilite8.</li>
	<li>Tagliate la lattuga in metà e ispezionare eventuali macchie e discromie per tutti i trattamenti.</li>
	<li>Punteggio ottenuto e registrare punteggi di qualità visiva interna per tutti i trattamenti.</li>
</ol>

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</ol>

Mantenere O2 dalla camera di fumigazione è fondamentale per il successo NO fumigazione per controllo dei parassiti. Camere di fumigazione necessario hanno guarnizioni di tenuta d'aria e linee di connessione devono essere svuotati con N2 o altri gas inerti per rimuovere O2 prima di essere utilizzato per non rilasciare nessun gas nelle camere di fumigazione. Un altro aspetto critico di nessuna fumigazione è diluizione di NO con un N2 a filo alla fine della fumigazione. Questo previene la produzione di eccesso NO2 e relative possibili lesioni ai prodotti freschi. Come prodotti freschi diversi hanno diversi livelli di tolleranza a nessuna esposizione di2 , un trattamento di fumigazione NO può prevedere diversi livelli di N2 flush per prevenire gli infortuni. Perché NO2 ha un alto punto di ebollizione di circa 21 ° C e anche reagisce con acqua per formare acidi, nessuna produzione di2 sarà probabile risultato in aumentato di n.2 sui prodotti sottoposti a fumigazione come residuo e aumenti di nitrato e/o nitriti che vengono convertiti da NO2.
Il tipo di prodotti per essere sottoposto a fumigazione può anche complicare il processo di fumigazione, ad esempio un'operazione di scaricamento iniziale con N2 per stabilire condizioni ULO e un lavaggio finale con N2 per terminare il trattamento di fumigazione. Ortaggi a foglia grande in perforato gli involucri di plastica come lattuga testa avvolto rappresentano una grande barriera di ventilazione dell'aria e quindi una sfida per stanare O2 con N2 all'inizio della fumigazione e vampate di calore fuori n con N2 alla fine di fumigazione. Per questi prodotti, è preferibile non utilizzare combinazioni di inferiore concentrazioni e tempi di trattamento più lunghi per controllare i parassiti perché è più sicuro per qualità del prodotto.
Non monitoraggio livelli di in camere di fumigazione è un'altra sfida nella non conduzione fumigazione. Maggior parte degli strumenti non è possibile misurare l'alta senza concentrazioni utilizzate in nessuna suffumigi per controllo dei parassiti. Ci sono alcuni dispositivi di diluizione commercialmente disponibili, ma non è noto se essi saranno adatti senza fumigazione. Tuttavia, un dispositivo di diluizione può essere fatto come sopra descritto e utilizzato per alcun monitoraggio utilizzando un monitor di gas non dotato di un sensore NO.
Potranno subire ulteriori modifiche alle procedure per il monitoraggio non vi erano concentrazioni negli alloggiamenti di fumigazione. Ad esempio, un campione di aria in una camera di fumigazione può essere diluito in una busta di alluminio con un certo volume di azoto. Il campione diluito aria quindi non può essere distribuito attraverso un canna fumaria gas monitor dotato di un'alta concentrazione nessun sensore per non misurare la concentrazione di. Tuttavia, sarà difficile evitare l'ossidazione di NO nel processo e la diluizione processo probabilmente porterà in alcune perdite di NO. Di conseguenza, non calcolato basato sulla misurazione dell'aria diluita campioni da fumigazione chambers sarà probabilmente non inferiore rispetto l'attuale nessun livelli nelle camere di fumigazione.
Il processo di stabilire condizioni ULO in camere di fumigazione possono anche essere modificate basato su quali tipi di alloggiamenti di fumigazione sono disponibili. Per le camere di fumigazione che possono essere utilizzate in condizioni di vuoto, condizioni ULO possono essere stabilite tramite il processo di aspirazione ripetuta seguita dalla camera di riempimento con gas azoto. Questo processo sarà più efficiente nella creazione di condizioni di ULO rispetto il normale processo di consuntivazione descritto sopra. Per prodotti conservati, CO2 può anche essere utilizzato invece di N2 per stabilire condizioni ULO per nessuna fumigazione.
Per analisi dei residui, il 405 nm n2/n/nessun monitor dix è stato selezionato per non misurare rilascio di gas2 da campioni fumigati negli spazi testa e l'analizzatore di ossido di azoto è stato impostato per rilevare nitrati e nitriti nei campioni liquidi. Tuttavia, altri tipi di strumenti sono disponibili con adeguata sensibilità e specificità per misurazione n.2 in ci e nitrati e nitriti nei campioni di liquidi di misurazione. Di conseguenza, le procedure per le misure di residui possono essere modificate sulla base della disponibilità degli strumenti.
Come NO è altamente volatile con un punto di ebollizione di-152 ° C e reagisce immediatamente con O2, non è previsto che non sarebbe rimasto come residuo sui prodotti fumigati dopo fumigazione. Di conseguenza, solo n.2 è stata misurata in spazio di testa dei prodotti sottoposti a fumigazione. NO2 ha un alto punto di ebollizione di 21 ° C e dissipa molto più lentamente da prodotti e pertanto è probabile rimanere sui prodotti sottoposti a fumigazione per qualche tempo dopo fumigazione.
Per ortaggi a foglia, se NO fumigazione non viene svuotata con N2 alla fine, non avrebbe reagito con O2 per la produzione di NO2 e può causare la persistenza di n.2 per qualche tempo come prodotti freschi vengono in genere archiviati a basse temperature. Pertanto, dal punto in piedi di abbreviare il periodo di tempo reentering dopo fumigazione, fumigazione non deve essere lavata anche con N2 alla fine di fumigazione. Non monitoraggio rilascio di2 è, quindi, importante per determinare quanto tempo e come molto NO2 rimarranno sui prodotti dopo fumigazione. NESSUN livello2 su prodotti fumigati influirà potenzialmente come i prodotti fumigati saranno gestiti o archiviati.
Nitrato esiste naturalmente nel suolo e piante di frutta e verdura.  Alcune verdure di radice possono raccogliere le alte concentrazioni di nitrati. Le verdure sono la principale fonte dietetica di nitrati. Ad esempio, spinaci e lattuga fresca hanno livelli di nitrato medio di 786-1.080 e 1.420-3.400 mg/kg. Regolamento della Commissione europea imposta i livelli massimi di nitrato per lattuga e spinaci a 2.500-4.500 e 2.000-3.000 mg/kg13. Nitrito e nitrato sono anche frequentemente aggiunto ai salumi come pancetta, prosciutto, salsicce e hot dog e sono consumati come essi sono utilizzati come conservante in questi prodotti di carne. Misurazioni di nitrato e nitrito come residui di nessuna fumigazione erano destinati a fornire informazioni sull'entità che NO fumigazione possa alterare i livelli in fumigato prodotti e non può avere alcuna attinenza con la sicurezza alimentare. Pertanto, misure di nitrato e nitrito come residui dovrebbero essere considerate come optional a meno che non sono tenuti dalle agenzie regolatorie nella registrazione di NO come fumigante o altri processi normativi. Procedure dettagliate per le misurazioni di nitrati e nitriti sono anche disponibili21.
Fumigazione di ossido nitrico presenta i vantaggi di alta efficacia contro tutti gli stadi vitali degli insetti e degli acari e senza residui nocivi rispetto a molti altri fumiganti, come discusso in precedenza6,7,9. Dato che c'è una critica mancanza di efficaci alternative alla fumigazione di bromuro di metile per controllo dei parassiti post-raccolta e fumiganti alternativi più lasciano residui tossici in prodotti fumigati, fumigazione non garantisce molto estesa ricerca, sviluppo, e sforzi di registrazione per portare questa soluzione di controllo dei parassiti postharvest sicuro ed efficace sul mercato. Eppure, a causa della complessità e requisiti rigidi per condizioni ULO delle procedure di fumigazione, addestramento può essere richiesto per molti ricercatori non avviare nessuna ricerca di fumigazione. È nostra intenzione di fornire informativa e facile da seguire le procedure per il laboratorio alcun trattamento di fumigazione postharvest Pest controllo freschi e prodotti agricoli immagazzinati. I principi delle procedure possono essere utilizzati non sviluppare protocolli per su larga scala suffumigi per applicazioni pratiche.

L'ossido nitrico è una molecola messaggero cellulare onnipresente in tutti i sistemi biologici2. È rilasciata in grandi quantità come un inquinante comune della combustione di combustibili fossili da centrali elettriche e veicoli a motore e prodotto in grandi quantità come prodotto intermedio nella produzione di fertilizzanti. Intensa ricerca sul NO negli ultimi 20 anni ha prodotto una grande quantità di conoscenza sulla sua importanza, funzioni e meccanismi nella regolazione di processi biochimici e fisiologici in vari sistemi biologici. Questa conoscenza ha provocato varie applicazioni mediche di NO per il trattamento di malattie respiratorie e cardiache14,15,16. In agricoltura, NO è stato utilizzato più di 100 anni fa su prodotti carnei trasformati per pigmento rosso conservazione3. NO inoltre prolungano la durata e migliora la qualità post-raccolta di un'ampia varietà di prodotti freschi11,12,17,18,19,20. Più recentemente, non è stato trovato per essere un potente fumigante per postharvest pest controllo6.
NON è stato dimostrato di essere efficace contro tutti gli stadi vitali degli insetti testati (Figura 1). La specie di parassita testata rappresentano diversi tipi e stadi di vita dei parassiti e indicare il grande potenziale di nessuna fumigazione per controllare specie di parassiti diversi. L'efficacia di nessun fumigazione contro parassiti di insetto è simile a quello di fumigazione di bromuro di metile. Tuttavia, nessuna fumigazione possa essere condotte a temperature di conservazione frigorifera. Fumigazione di bromuro di metile richiede il riscaldamento del freddi prodotti immagazzinati e, pertanto, può influenzare la qualità del prodotto. Ad esempio, tripide occidentale fiore, Frankliniella occidentalise afide della lattuga, Nasonovia ribisnigri, può essere non controllato in 2 e 3 h con 2,0% e 1,0% fumigazione, rispettivamente, al 2 ° C6. Fumigazione non è anche molto più veloce di fumigazione di fosfina che è il trattamento contabile alternativo principale bromuro di metile e può prendere più di dieci giorni per controllare alcuni parassiti4,6,9,10.
Fumigazione di ossido di azoto è efficace contro insetti d'alimentazione interna ed esterna. Spotted ala Drosophila, Drosophila suzukii, larve in ciliege infestate sono controllate in 8 h con 2,5% NO fumigazione9. Larve di carpocapsa, Cydia pomonella, nelle mele infestate sono completamente controllate in una fumigazione di 24h con 5% NO a 2 ° C9,10. L'efficacia di nessun fumigazione aumenta con l'aumento di concentrazione, tempo di trattamento e temperatura6. Questi fattori possono essere utilizzati per non ottimizzare alcun trattamento di fumigazione per diverse specie di insetti sulle varie materie prime.
Tuttavia, non reagisce con O2 spontaneamente per produrre NO21. Questo non solo consuma NO, ma può anche causare danni ai prodotti freschi come la lattuga (Figura 2). Pertanto, nessuna fumigazione dovrà svolgersi in condizioni di bassissima ossigeno (ULO) per preservare NO. Per prodotti freschi, nessun fumigazioni devono anche essere terminato da vampate di calore con N2 per diluire NO prima di esporre i prodotti sottoposti a fumigazione all'aria ambiente per ridurre la loro esposizione al n.2. Questi severi requisiti aumentano la complessità e il costo senza fumigazione. Tuttavia, nessuna fumigazione dovrebbe essere tecnicamente fattibile e conveniente7. Tutti i componenti della grande non scala fumigazione o sono disponibili in commercio o può essere fatto in commercio tra cui attrezzature di generazione di azoto, NO alimentazione, apparecchiature di monitoraggio (O2 analyzer, senza indicatore) e fumigazione ermetici chambers. Conservazione in atmosfera controllata (CA) e spedizione sotto atmosfera di2 basso O sono stati utilizzati commercialmente. Il costo energetico della generazione N2 per nessuna fumigazione è anche modesto e varia a seconda posizione7.
Fumigazione di ossido di azoto è anche sicuro da frutta fresca e verdure quando terminato correttamente mediante flussaggio con N2 per diluire NO prima prima di esporre i prodotti all'ambiente aria8. Fumigazione non ha dimostrato di essere sicuro di tutte le frutta fresca e verdura testato fino ad oggi, tra cui la lattuga, broccoli, cetrioli, peperoni, pomodori, fragole, mele, pere, arance e limoni8. Una fumigazione di 4h con 1% NO a 2 ° C per il controllo dei tripidi occidentale fiore migliora anche la qualità della fragola. Una settimana dopo la fumigazione, trattate fragole sono più solide e hanno colore più luminoso e più ricco e, di conseguenza, meglio postharvest qualità rispetto il controllo8.
Fumigazione di ossido di azoto inoltre non lascia residui nocivi fumigato prodotti freschi. Come non reagisce con O2 per la produzione di NO2, fumigazione non può provocare deposizione di n.2 sui prodotti a causa del punto di ebollizione di 21 ° C di n.2. In presenza di acqua, NO2 idrolizza per formare l'acido nitrico (HNO3). Di conseguenza, nessuna fumigazione potrebbero potenzialmente in nitrati (NO3–) e nitriti (NO.2–) come residui sulle materie prime trattate. Quando fumigazione è terminato con N2 non svuotare, nessun risultato di fumigazione in nessuna o scarsa aumenti in nitrato o nitrito come residui a 24 h dopo fumigazione in materie prime fresche9,21.
La natura reattiva del NO con O2 richiede anche procedure rigorose per tenere fuori O2 durante il processo di non condurre alcun trattamento di fumigazione. La complessità e procedure rigorose sono meglio illustrate visivamente e dovrebbero essere seguite e masterizzate. In questa presentazione video journal, senza fumigazione di prodotti freschi è stato spiegato, illustrato e dimostrato per consentire altri ricercatori a non condurre nessuna ricerca di fumigazione e non sviluppare alcun trattamento di fumigazione per controllo dei parassiti post-raccolta. Questi sforzi verranno aiuterà ad per accelerare l'uso commerciale di nessuna fumigazione per controllare i parassiti post-raccolta su prodotti freschi e conservati.

<table><tbody><tr><td>Gas di ossido nitrico</td><td>Praxair</td><td>UN1660</td><td>99,5% di purezza</td></tr><tr><td>Gas azoto</td><td>Praxair</td><td>UN1066</td><td></td></tr><tr><td>Camera di fumigazione</td> di grado industriale <td>(su misura)</td><td></td> <td>Dimensioni: 30 "x30" x30"; realizzato in acciaio inossidabile con kit di gas in gomma lungo il bordo. La camera è sigillata fissando il coperchio al kit del gas ingrassato con vaselina. La camera è dotata di più porte per il lavaggio della camera e per il prelievo di campioni d'aria.</td></tr><tr><td>Analizzatore di ossido nitrico</td><td>GE Scientific</td><td>Analizzatore NOA 280i</td><td>Misura NO più NO2, nitrati e nitriti</td></tr><tr><td>Modello 405nm Monitor NO2/NO/Nox</td><td>2B Technologies Inc</td><td></td><td>Intervalli: NO (0-2ppm), NO2+NO (0-10ppm)</td></tr><tr><td>Monitor di gas Kane 900+</td><td>Kane International</td><td></td><td>Con sensori NO, NO2, CO, O2</td></tr><tr><td>Flussimetro e controller</td><td>Omega Engineering</td><td></td><td>Intervalli di flusso: 0-1, 0-5, 0-20 LPM</td></tr><tr><td>Tubi, connettori, rubinetti</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>Tubi: nylon e teflon, misure: 1/8" e 5/32" (4 mm); Si adattano a connettori e rubinetti&nbsp;</td></tr><tr><td>Analizzatore di ossigeno</td><td>Illinois Instruments</td><td>Modello 810</td><td>Sensore Ziconia, sensibilità: 0,1 ppm, intervallo: 0-100%</td></tr><tr><td>NO2 allarme personale</td><td>SENSIT Technologies</td><td>Sensit P100</td><td>Deve essere utilizzato per condurre fumigazioni NO su larga scala al di fuori di una cappa aspirante</td></tr><tr><td>Flussometro e controller</td><td>Omega Engineering</td><td></td><td>Intervalli di flusso: 0-1, 0-5, 0-20 LPM</td></tr><tr><td>Siringhe a tenuta di gas</td><td>SGE Scienza analitica</td><td></td> Siringhe a tenuta di gas <td>da 10 ml, 100 ml</td></tr><tr><td></td><td>Hamilton Company</td><td></td><td>10uL</td></tr><tr><td>Tubi, connettori, rubinetti</td><td>Cole-Parmer</td><td></td><td>Tubi: nylon e teflon, misure: 1/8" e 5/32" (4 mm); Si adattano a connettori e rubinetti&nbsp;</td></tr><tr><td>Ioduro di sodio</td><td>Fisher Chemical</td><td>S324-100</td><td></td></tr><tr><td>Acido acetico, Fisher Chemical glaciale</td><td></td><td>UN2789</td><td>&ge; Purezza 99,7%</td></tr><tr><td>Acido cloridrico</td><td>Cole-Parmer</td><td>SA48-500</td><td>1,0</td></tr><tr><td>Normale Cloruro di vanadio (III)</td><td>Acros Organics</td><td>197000250</td><td>97% di purezza</td></tr><tr><td>Idrossido di sodio</td><td>Fisher Chemical</td><td>BPSS266-1</td><td>1 M</td></tr><tr><td>SAHARA S3 Circolatore a bagno riscaldato in acciaio inox</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SC 100 Circolatore</td> <td>a imerrioni digitaliThermoFisher Scientific Oxygen</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>Praxair</td><td>*001043</td><td>99,5-100% di purezza</td></tr><tr>Sistemi <td>di sorbente</td><td>a ganasce calde</td><td>Sigillatrice termica per sacchetti in Mylar</td>Sacchetti in Mylar Sistemi di assorbente Gruppi di filtrazione Flipmate Cole-Parmer EW-35202-29 Tubo in polipropilene da 15 ml Falcon <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Carta da filtro P5</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Blender</td><td>Waring</td><td>Blender 7010G</td><td>Modello WF2211212</td></tr><tr><td>Dispositivo di diluizione</td><td>Realizzato nel nostro laboratorio</td><td></td><td>Combina le estremità di quattro microtubi in teflon di uguale lunghezza in un unico connettore e disponi di un connettore per ciascuna estremità dei quattro microtubi.</td></tr></tbody></table>

procedure di fumigazione di laboratorio per il controllo dei parassiti con gas di ossido di azoto

Procedures of Laboratory Fumigation for Pest Control with Nitric Oxide Gas

Ossido nitrico (NO) è un fumigante recentemente scoperto per controllo dei parassiti post-raccolta. Questo documento fornisce protocolli dettagliati per lo svolgimento senza fumigazione su prodotti freschi e le procedure per la valutazione di qualità di prodotto e analisi di residui. Una camera di fumigazione ermetico contenente frutta e verdura fresca viene svuotata prima con azoto (N2) per stabilire un ambiente di ossigeno bassissima (ULO) seguito dall'iniezione di NO. La camera di fumigazione è poi tenuta a bassa temperatura di 2-5 ° C per un periodo di tempo specificato necessaria per uccidere un parassita di destinazione per completare un trattamento di fumigazione. Alla fine di un trattamento di fumigazione, la camera di fumigazione viene svuotata con N2 per diluire NO prima dell'apertura della camera di aria ambiente per impedire la reazione tra n e O2, che produce NO2 e può danneggiare i delicati prodotti freschi. In tempi diversi dopo senza fumigazione, n.2 in spazio di testa e nitrato e nitrito in campioni liquidi sono stati misurati come residui. Qualità del prodotto è stata valutata dopo 2 settimane di conservazione a freddo post-trattamento per determinare gli effetti del NO fumigazione sulla qualità del prodotto. Impedisce di reagire con NO O2 è fondamentale per non fumigazione ed è una parte importante dei protocolli. NON ci sono livelli di misurazione è impegnativo e viene fornita una soluzione pratica. Protocollo possibili modifiche sono suggerite anche per non misurare livelli di in camere di fumigazione così come i residui. Fumigazione non ha il potenziale per essere un'alternativa pratica alla fumigazione di bromuro di metile per controllo dei parassiti post-raccolta su prodotti freschi e conservati. Questa pubblicazione è destinata per aiutare altri ricercatori a non condurre nessuna ricerca di fumigazione per controllo dei parassiti post-raccolta e accelerare lo sviluppo di nessuna fumigazione per applicazioni pratiche.

Fumigazione di ossido di azoto per prodotti freschi deve essere terminato con un N2 a filo per diluire NO prima apertura camere di fumigazione per esporre i prodotti all'aria ambiente. Quando un trattamento di fumigazione è terminato aprendo direttamente la camera di aria ambiente senza un N2 a filo, la reazione tra n e O2 si tradurrà in nessuna produzione di2 e l'esposizione di prodotti freschi a NO2 provoca spesso lesioni tra cui macchie marroni, decolorazione e macchie di tessuto morto8. Frutta e verdura come lattuga, zucchine e pere delicata è soggette a danni di NO2. Quando nessuna fumigazione viene terminato correttamente con un N2 a filo, il trattamento di fumigazione ha dimostrato di essere sicuro senza danni alla qualità del prodotto (Figura 6 e Figura 7). Infatti, fumigazione per controllo dei parassiti non è stato trovato per migliorare la qualità post-raccolta dei prodotti freschi rispetto ai comandi unfumigated come dimostrato sulle fragole. Fragole fumigate con n per il controllo dei tripidi occidentale fiore mantengono il colore più luminoso e più ricco e sono anche meno morbida e una settimana dopo fumigazione rispetto il controllo8. Teste di lattuga avvolte in plastica maniche potrebbero subire lesioni alle foglie superficie direttamente sotto i fori di ventilazione di avvolge a causa della reazione di NO con O2 per produrre NO2 se fumigazione non è terminato correttamente.
Flushing con N2 alla fine del senza fumigazione non colpite rilascio di2 da fumigato prodotti. Quando nessuna fumigazione è stata terminata con N2 a filo, non c'erano differenze significative in nessun tasso di rilascio2 fra il trattamento ed il controllo. NESSUN trattamento di fumigazione lavato con l'aria alla fine di fumigazione, tuttavia, ha avuto un più alto nessun tasso di rilascio di2 rispetto al controllo e il rilascio di n.2 è diminuito nel corso del tempo.
Per i prodotti più freschi tra cui lattuga, broccoli, fragola, mela, arancia, ecc., non c'erano differenze significative in n.3– o livelli di NO2– tra il trattamento che è stato terminato con un N2 incasso e il controllo. Solo quando nessun trattamento di fumigazione è stato terminato mediante flussaggio con aria normale, c'erano significativamente più alti NO3– e non vi erano concentrazioni2– in tutti i prodotti sottoposti a fumigazione che sia il controllo e N2 svuotate fumigazione prodotti. NESSUNA concentrazione di2– in generale non era rilevabile in entrambi sottoposti a fumigazione e controllo prodotti (tabella 1 e tabella 2). Di conseguenza, non c'erano nessun livelli significativi di residui non fumigato prodotti freschi a 24 h dopo fumigazione quando fumigazione è stata terminata correttamente con flussaggio di azoto.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig1.jpg"> Figura 1: gli effetti del NO fumigazione su insetti ed acari. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56309/56309fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig2.jpg"> Figura 2: Dimostrazione delle lesioni alla lattuga da n.2 dalla reazione fra n e O2 <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56309/56309fig2large.jpg" target="_blank">. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig3.jpg"> Figura 3: Diagramma di flusso delle procedure senza fumigazione. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56309/56309fig3large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig4.jpg"> Figura 4: Metodo di utilizzo di un dispositivo di diluizione e un gas influenza non monitorare senza sensore per non misurare nessun livello in larga scala nessun test di fumigazione. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56309/56309fig4large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig5.jpg"> Figura 5: Confrontare gli effetti dei trattamenti di fumigazione terminati da N2 sciacquare e aria a filo su postharvest qualità di frutta e verdura fresca. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56309/56309fig5large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig6.jpg"> Figura 6: Postharvest qualità di lattuga, broccoli e mele da tre trattamenti (C, T1, T2) 14 giorni dopo la fumigazione con controllo che rappresentano C, T1 e T2, fumigazione è terminato con un N2 a filo e fumigazione terminato con aria a filo, rispettivamente. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56309/56309fig6large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56309/56309fig7.jpg"> Figura 7: Postharvest qualità di arance, pere e pesche da tre trattamenti (C, T1, T2) 14 giorni dopo la fumigazione con controllo che rappresentano C, T1 e T2, fumigazione è terminato con un N2 a filo e fumigazione terminato con aria a filo, rispettivamente. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56309/56309fig7large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>


<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>Prodotto</td>
			<td>NO (%)</td>
			<td>Trattamento</td>
			<td>Nessun3– (mg/100 g)</td>
			<td>NO2– (mg/100 g)</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Apple</td>
			<td>5.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>1.60±0.12 un</td>
			<td>0.50±0.16 un</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>1.36±0.13 ab</td>
			<td>0.03±0.01 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>0.76±0.28 b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Albicocca</td>
			<td>3.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>1.84±0.14 un</td>
			<td>0.21±0.02 un</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>0.92±0.17 b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>0.54±0.01 b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Asparagi</td>
			<td>3.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>2.19±0.13 un</td>
			<td>0.08±0.04 un</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>0.70±0.03 b</td>
			<td>0 un</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>0.84±0.07 b</td>
			<td>0 un</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Mirtillo</td>
			<td>3.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>2.74±0.46 un</td>
			<td>0.14±0.02 un</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>1.24±0.19 b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>1.22±0.15 b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Broccolo</td>
			<td>3.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>18.69±3.75 un</td>
			<td>0.17±0.06 un</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>18.51±3.42 un</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>12.26±2.31 un</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Ciliegia</td>
			<td>3.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>1.75±0.11 un</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>0.56±0.09 b</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>0.65±0.08 b</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Aglio</td>
			<td>3.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>5.05±0.45 un</td>
			<td>0.14±0.02 un</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>4.45±0.79 un</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>5.01±0.69 un</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Uva</td>
			<td>3.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>6.32±0.68 un</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>2.38±0.43 b</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>2.74±0.25 b</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Pepe</td>
			<td>3.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>9.26±0.35 un</td>
			<td>0.71±0.12 un</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>6.75±0.68 b</td>
			<td>0.02±0.01 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>6.23±0.72 b</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Kiwi</td>
			<td>3.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>1.66±0.55 un</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>1.25±0.09 un</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>1.41±0.31 un</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Lattuga</td>
			<td>2.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>112.85±20.17a</td>
			<td>7.99±2.02 un</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>38.97±5.87 b</td>
			<td>0.1±0.1 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>40.64±10.81B</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Orange</td>
			<td>3.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>1.22±0.13 un</td>
			<td>0.27±0.05 un</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>1.05±0.05 un</td>
			<td>0.02±0.01 b</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>1.24±0.22 un</td>
			<td>0 b</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Prugna</td>
			<td>3.0</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>1.04±0.08 un</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>0.63±0.04 b</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>0.84±0.11 ab</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Fragola</td>
			<td>2.5</td>
			<td>NO-aria</td>
			<td>6.01±0.62 un</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>NO-N.2
</td>
			<td>5.30±0.77 un</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Controllo</td>
			<td>6.16±1.06 un</td>
			<td>0</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabella 1: livelli di nitrato e nitrito come residui a 24 h dopo fumigazione di ossido nitrico 16 h su frutta e verdura fresca. Per ogni prodotto, sono significativamente differenti valori seguiti da diverse lettere basato su Tukey HSD test gamma multipla (P ≤ 0.05). Ristampato da Yang e Liu (2017).

Questo articolo descrive l'ossido nitrico (NO) protocolli di fumigazione per controllo dei parassiti post-raccolta. Camere di fumigazione vengono scaricate con azoto (N2) stabilire condizioni di bassissima di ossigeno prima di NO viene iniettato. Alla fine, alloggiamenti vengono scaricate con N2 per diluire NO prima di esporre i prodotti all'aria ambiente per evitare l'esposizione a n.2.

Procedure di fumigazione di laboratorio per il controllo dei parassiti con Gas di ossido di azoto

Nitric oxide (NO) is a newly discovered fumigant for postharvest pest control. This paper provides detailed protocols for conducting NO fumigation on ...

L'obiettivo generale di questo video è quello di presentare l'uso della fumigazione con ossido nitrico per il controllo dei parassiti post-raccolta e dimostrare come misurare i residui sui prodotti fumigati. L'ossido nitrico è un nuovo fumigante per il controllo dei parassiti post-raccolta. Tuttavia, a causa della sua natura reattiva con l'ossigeno, la fumigazione con ossido nitrico deve essere condotta in condizioni di ossigeno ultra-basso e ha un requisito rigoroso per le procedure di fumigazione.A dimostrare le procedure saranno il Dr.Xiangbing Yang, che è il post-doc nel mio laboratorio, e anche Tiffany Masuda, che è un tecnico nel mio laboratorio. Per iniziare, caricare le camere con insetti o prodotti. Ungere le guarnizioni con vaselina e sigillare ermeticamente le camere.Durante la fumigazione con ossido nitrico è importante mantenere le camere sigillate ermeticamente all'aria, quindi assicurati di ingrassare adeguatamente le guarnizioni della camera e di mantenere i coperchi ben chiusi. Quindi, collegare un'uscita a un analizzatore di ossigeno tramite un connettore a T con una valvola di ritegno e la seconda uscita a un regolatore di flusso, collegato a una bombola di azoto. Ora, lava la camera con azoto per creare un'atmosfera a bassissimo contenuto di ossigeno.Inizia con una portata elevata, quindi quando i livelli di ossigeno sono vicini a 30 parti per milione, riduci la portata tra 0,5 e 1 L al minuto. Quando l'ossigeno scende abbastanza in basso, chiudere i rubinetti di arresto per sigillare la camera. Successivamente, preparare la siringa e il microtubo collegato che vengono utilizzati per erogare l'ossido nitrico nella camera.Per prima cosa, sciacquare l'ossigeno con azoto gassoso. Quindi, caricare la siringa e il tubo con l'ossido nitrico dal sacchetto di alluminio. A questo punto, collegare il microtubo alla prima camera e aprire brevemente il rubinetto di arresto per iniettare il gas.Ripetere questo processo per ogni camera da trattare. Quindi, trasferire la fumigazione in una cabina a temperatura controllata per tutta la durata del trattamento. Quando si fumigano insetti senza prodotti, aprire la camera di una cappa aspirante per terminare la fumigazione.Dopo almeno 30 minuti di ventilazione, trasferire gli insetti in una camera ambientale durante la notte prima di segnare la loro mortalità. Per terminare la fumigazione dei prodotti freschi, prima lavare la camera con circa 10 ricambi d'aria di azoto. Quindi, aprire la camera e ventilarla per un'ora o più.Quindi, conservare i prodotti in frigorifero per una valutazione futura. Posizionare la camera grande in un refrigeratore walk-in dotato di un sistema di scarico. Portare sempre con sé un rilevatore di biossido di azoto quando si lavora con l'ossido nitrico all'esterno di una cappa aspirante.Ingrassare la guarnizione e sigillarla. Quindi, lavare la camera con azoto come prima. Stabilire condizioni di ossigeno ultra-basso nella camera grande può richiedere molto tempo.Ipoteticamente sarebbero necessari 13 ricambi d'aria di azoto per ridurre l'ossigeno al di sotto di 30 parti per milione. È possibile stimare il tempo necessario in base alla portata e al volume della camera. Dopo l'iniezione, collegare un sacchetto di alluminio per bilanciare la pressione.Quindi, impostare il dispositivo di diluizione del campione e il monitor del gas per misurare la concentrazione di ossido nitrico. Preparare un grande sacchetto di alluminio caricato con azoto con una striscia di connettori, tutti uniti in un unico tubo. Includere un monitor dei gas di combustione con una pompa e collegare questo gruppo alla camera.Utilizzare il monitor per misurare i livelli di ossido nitrico nella camera. Ora, eseguire il processo di terminazione della fumigazione con ossido nitrico. Attivare il flusso di azoto per lavare la camera, accendere il sistema di scarico e aprire la valvola.Ora, segui il protocollo descritto per completare il processo di terminazione della fumigazione con ossido nitrico. Una volta terminato il lavaggio con azoto, ovvero quando il livello di ossido nitrico scende al di sotto di 200 ppm, aprire la camera. Per misurare il rilascio di biossido di azoto dai prodotti fumigati, riscaldare prima il monitor di gas di ossido di azoto a 405 nanometri.Quindi, chiudere la camera di fumigazione con i prodotti all'interno. Quindi, collegare il monitor alla camera e far circolare l'aria della camera attraverso il monitor. Raccogli i dati di base per un minuto.Quindi, scollegare il monitor dalla camera e tenerla sigillata per un'ora. Un'ora dopo, raccogli un altro minuto di dati per calcolare il tasso di rilascio del biossido di azoto. Per misurare i residui di prodotto fumigato, preparare prima un campione di prodotto omogeneizzato, mescolare 15 grammi di campione omogeneizzato in 100 ml di acqua distillata e lasciare che la miscela si depositi.Quindi, filtrare sottovuoto i campioni e conservare il filtrato a 2 gradi Celsius. Per misurare la concentrazione di nitriti di un campione sottoposto a fumigazione, aggiungere da 4 a 6 mL di acido acetico concentrato al primo bulbo dell'analizzatore di ossido nitrico. Quindi, impostare un recipiente di spurgo con la pressione del gas inerte intorno a 1 o 2 psi.Quindi, sciogliere 50 mg di ioduro di sodio in 1 o 2 ml di acqua e aggiungerlo al primo bulbo del recipiente di spurgo. Lasciare mescolare le soluzioni per qualche minuto. Regolare la portata del gas per rendere la pressione delle celle compresa tra 4 e 7 Torr.Ora, iniettare 5 mcL di soluzione campione nel recipiente di spurgo e quindi trovare il livello di nitrito sullo schermo del computer. Si prega di fare riferimento al protocollo di testo per la misurazione del livello combinato di nitrati e nitriti a 95 gradi Celsius. Tre trattamenti di fumigazione di vari tipi di frutta e verdura dimostrano il danno causato senza il lavaggio dell'azoto gassoso prima di esporre il prodotto all'aria ambiente.La riga superiore rappresenta lo stato del controllo. Nella seconda fila, la fumigazione con ossido nitrico è stata terminata correttamente con il lavaggio con azoto gassoso. La riga inferiore mostra i risultati terminando la fumigazione con un lavaggio ad aria, che spesso provoca macchie o scolorimenti.24 ore dopo una fumigazione di 16 ore, i prodotti sono stati analizzati mediante analisi dei residui. Per la maggior parte dei prodotti, non ci sono state differenze significative nei livelli di NO3 e NO2 tra il trattamento che è stato terminato con il lavaggio con azoto e il controllo; tuttavia, quando non c'era lavaggio con l'azoto prima dell'esposizione ai gas atmosferici, i livelli di NO3 e NO2 aumentavano nei prodotti fumigati. Gli aspetti più critici di queste procedure di fumigazione sono mantenere la camera di fumigazione sigillata a tenuta d'aria e stabilire e mantenere una condizione di ossigeno ultra-basso, nonché la camera di lavaggio con l'azoto alla sua estremità.È importante ricordare che il tempo necessario per stabilire la condizione di ossigeno ultra-basso può variare drasticamente, a seconda del tipo di prodotti e della quantità di prodotti da fumigare. Diversi prodotti freschi hanno una diversa tolleranza al biossido di azoto. Questo determina la quantità di azoto che la camera di fumigazione deve essere lavata con l'azoto prima di aprire la camera per esporre il prodotto all'aria ambiente.Anche qui è possibile modificare il tempo di procedura. Ad esempio, il vuoto può essere utilizzato in combinazione con il lavaggio con azoto per stabilire in modo più efficiente condizioni di ossigeno ultra-basso. Si prega di prendere precauzioni di sicurezza nell'esecuzione della fumigazione con ossido nitrico.L'ossido nitrico non è gas esilarante. È un potente fumigante.

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Tecniche analitiche per il saggio Bioattività Ossido Nitrico

L'azoto è un fluido supercritico efficace per processi di estrazione o di essiccazione a causa della sua piccola dimensione molecolare, alta densità nel regime supercritico quasi liquido, e inerzia chimica. Presentiamo un protocollo di essiccazione azoto supercritico per il trattamento di purificazione dei reattivi, materiali porosi.

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Questa procedura descrive come incapsulare citocromo c (cit. C) in silicio (SiO 2) sol-gel, processo questi gel per formare bioaerogels, e utilizzare questi bioaerogels di riconoscere rapidamente l'ossido nitrico (NO) attraverso una reazione in fase gassosa. Questo tipo di protocollo può essere di aiuto nel futuro sviluppo di biosensori o altri dispositivi bioanalitici.

incapsulante citocromo<em&gt; c</em&gt; In Silica Aerogel nanoarchitetture senza metallo nanoparticelle, pur mantenendo bioattività gas-phase

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I biofilm sulle superfici possono essere rimossi in modo efficace e rapido utilizzando un getto periodico di aerosol di anidride carbonica senza uno spurgo di azoto.

La rimozione biofilm utilizzando spray di anidride carbonica senza azoto Purge

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Misurazione nitriti e nitrati, metaboliti in ossido nitrico Pathway, nei materiali biologici utilizzando il metodo chemiluminescenza

Lavori precedenti suggeriscono che la composizione isotopica dell'azoto degli ossidi di azoto atmosferici potrebbe distinguere l'influenza di diverse fonti nell'ambiente. Riportiamo un metodo automatizzato, mobile e basato sul campo per l'elevata efficienza di raccolta dell'NOx atmosferico per l'analisi isotopica dell'N con una risoluzione oraria.

Automatizzato, ad alta risoluzione mobile sistema di raccolta per l&#39;analisi isotopica di azoto di NO<sub&gt; x</sub

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Misurazione dei tassi potenziali di riduzione del nitrato dissimiliva all'ammonio sulla base di 14NH4/15NH4- Analisi tramite conversione sequenziale in N2O

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Saggi basati sulla chemiluminescenza per la rilevazione di ossido nitrico e suoi derivati da autoxidazione e composti nitrosi

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Misurazione della produzione di ossido nitrico nelle colture cellulari epiteliali tracheali del topo differenziate all'interfaccia aria-liquido

Impara le procedure di fumigazione con ossido di azoto per il controllo dei parassiti post-raccolta. Questo metodo dimostra come mantenere condizioni di ultra-basso ossigeno e misurare i residui per garantire sicurezza ed efficacia.

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