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DOI: 10.3791/56324-v
Lauren E. Woodard1,2,3, Richard C. Welch2, Felisha M. Williams2, Wentian Luo2, Jizhong Cheng3, Matthew H. Wilson1,2,3
1Department of Veterans Affairs,Tennessee Valley Healthcare System, 2Departments of Medicine and Pharmacology,Vanderbilt University Medical Center, 3Department of Medicine,Baylor University College of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Questo protocollo descrive un metodo per iniettare DNA plasmidico in rene del mouse tramite la pelvi renale per produrre l'espressione del transgene in particolare nel rene.
L'obiettivo generale di questa procedura chirurgica è quello di produrre l'espressione proteica dal DNA plasmidico nel rene del topo adulto. Questo metodo è un nuovo strumento per affrontare questioni chiave in nefrologia, come ad esempio il modo in cui l'espressione di una proteina di interesse influisce sul rene adulto. Il vantaggio principale di questa tecnica è che produce l'espressione proteica in modo riproducibile, in particolare nel rene, a differenza di altri metodi che possono produrre anche l'espressione genica in altri organi.
La dimostrazione visiva di questo metodo è fondamentale in quanto l'iniezione della pelvi renale richiede un'attenta esposizione e deve essere eseguita rapidamente affinché il DNA plasmatico possa entrare nelle cellule. Inizia risospendendo il DNA plasmidico nel tampone di consegna idrodinamico. Su un termoforo a circolazione d'acqua coperto da un pad blu, posizionare il mouse.
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