Applicazione di microscopia di velocità ad alta velocità super-risoluzione in Live cilio primario

L'obiettivo generale di questo esperimento è identificare le vie di trasporto delle proteine nelle ciglia primarie. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo delle ciglia, come le differenze di percorso di trasporto delle proteine nelle ciglia normali e disfunzionali. Il vantaggio principale di questa tecnica è che ha una risoluzione sufficientemente alta per vedere le vie di trasporto delle proteine di subdiffrazione nelle cellule vive.

Per iniziare, scongelare le celle NIH-3T3 appositamente ingegnerizzate a 37 gradi Celsius, una settimana e mezza prima dell'esperimento. Trasferire le cellule scongelate in un pallone di coltura cellulare quadrato di 25 centimetri contenente tre millilitri di terreno preriscaldato. Mantenere le celle a 37 gradi Celsius in un incubatore al 5% di anidride carbonica.