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JoVE Journal Biology
Live Cell Fluorescence Microscopy to Observe Essential Processes During Microbial Cell Growth

Vivere la microscopia di fluorescenza delle cellule per osservare i processi essenziali durante la crescita delle cellule microbiche

Full Text
16,647 Views
07:28 min
November 24, 2017

DOI: 10.3791/56497-v

Matthew Howell1, Jeremy J. Daniel1, Pamela J.B. Brown1

1Division of Biological Sciences,University of Missouri

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Capire la funzione dei processi essenziali nei batteri è complesso. Microscopia a fluorescenza con target-specifici coloranti possa fornire spunti preziosi per progressione di crescita e ciclo cellulare delle cellule microbiche. Qui, Agrobacterium tumefaciens è usato come un batterio modello per evidenziare i metodi per l'imaging di cellule vive per la caratterizzazione dei processi essenziali.

L'obiettivo generale di questo approccio basato sulla microscopia è quello di osservare un processo centrale durante la crescita delle cellule batteriche. Questo metodo ci consente di affrontare importanti questioni in batteriologia, come ad esempio il modo in cui i processi essenziali vengono coordinati durante la crescita e la divisione delle cellule batteriche. Il vantaggio principale di questa tecnica è che siamo in grado di utilizzare reagenti fluorescenti per visualizzare le superfici e le strutture delle cellule batteriche nelle cellule viventi.

In questo caso, utilizziamo questo metodo per fornire informazioni sui processi essenziali dell'Agrobacterium tumefaciens. Tuttavia, questo processo potrebbe essere adottato anche ad altri batteri per studiarne la crescita. Per iniziare, utilizzare un bastoncino di legno sterile o la punta di una pipetta per inoculare tre millilitri di ATGN Growth Medium, con una singola colonia di un ceppo wild-type o mutante di A.Tumifaciens.

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Microbiologia problema 129 Agrobacterium essenzialità microscopia time-lapse pastiglie di agarosio fluorescenti d-amminoacidi macchiatura del DNA membrana macchiatura epifluorescenza

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