Name: Un modello murino di gastrectomia verticale (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-12-18T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 47 s
Description: Scopri la gastrectomia verticale in topi per studiare i benefici della chirurgia bariatrica sull'obesità. Questo modello aiuta a identificare nuovi target terapeutici per il trattamento dell'obesità e delle comorbilità associate.

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Questa ricerca è stata sostenuta da R21CA195002 di NIH/NCI-01A1, del Consiglio del Presidente delle donne di Cornell e la diversità di Istituto europeo di oncologia SUNY. Laboratorio Dr. Cummings' anche ha ricevuto finanziamenti per il periodo di progetto dal programma di formazione comparativa biologia cancro Cornell ed Eli Lilly and Company.

Tutti i protocolli sperimentali sono stati approvati dal comitato di uso e Cornell University istituzionale Animal Care.
1. preparazione pre-chirurgica
Nota: Studio topi sono in genere su un fondo C57BL indotta da dieta obeso per rendere gli studi traduzionalmente pertinenti per insulino-resistenza e l'obesità umana. Topi maschi e femmine possono essere studiati come descritto nei passaggi successivi.
<ol>
	<li>Ad un'età di 2 mesi, posto topi su una dieta grassa alta 45% o 60% per 2 mesi (Vedi Tabella materiali). Nota: I topi sono alimentati una dieta grassa alta per creare un fenotipo obeso e insulino-resistente. Brevi o lunghi periodi di dieta grassa alta alimentazione possono essere utilizzati a seconda degli obiettivi dello studio.</li>
	<li>Continuare ad alimentare topi ad libitum fino alla chirurgia. Se sono necessarie misurazioni di base, dopo 7 settimane di alto contenuto di grassi dieta alimentazione, veloce topi per 6 ore o durante la notte e prendere un campione di sangue della linea di base per la misurazione dei metaboliti di interesse (ad es., glucosio).</li>
	<li>Continuare a topi su alto contenuto di grassi dieta e consentono topi una settimana per recuperare dopo il prelievo di sangue prima dell'intervento chirurgico sham o VSG. Posizionare il mouse su un liquido dieta (Vedi Tabella materiali) per 4 giorni prima dell'intervento chirurgico. Nota: I topi sono mantenuti su una dieta liquida prima e dopo chirurgia per cancellare l'apparato digerente del particolato che può compromettere la risposta di guarigione.</li>
	<li>Sterilizzare i seguenti elementi prima dell'intervento chirurgico: lamina, garza, cotone punta applicatori (CTA) e gli strumenti chirurgici (pinza emostatica, operativo a forbice, forbice iris, pinza dumont, Seghettato pinza Adson Brown, ago sonda gastrica, microneedle driver, forbici di primavera ).</li>
</ol>
2. verticale Sleeve Gastrectomy e Sham procedure
<ol>
	<li>Il giorno dell'intervento pesare topi per ottenere una misurazione di peso di base.</li>
	<li>Attrezzare la sala chirurgica con un sistema di anestesia, bagno di acqua riscaldata e rilievo di riscaldamento. Impostare il bagno di acqua a 37 ° C e utilizzarlo per riscaldare la soluzione salina allo 0,9% per l'irrigazione. Pulire il campo chirurgico con etanolo al 70% e utilizzare una tecnica sterile per aprire strumenti e chirurgia autoclavato pack. Nota: Il dissipatore di calore viene utilizzato per mantenere l'animale caldo durante l'ambulatorio ed il recupero dall'anestesia.</li>
	<li>Utilizzando una camera di induzione, anestetizzare il mouse con isoflurano 5% e il tasso di flusso di2 O di 1 L/min verificare che il mouse sia nel piano appropriato di anestesia eseguendo un pizzico di punta. Mantenere il mouse con isoflurane 1-3% e un tasso di flusso di2 O di 0,6 L/min una volta raggiunta un coerenza piano di anestesia.</li>
	<li>Una volta che il mouse è anestetizzato, posto unguento oculare (Vedi tabella materiali) sui suoi occhi per tenerli umidi durante la chirurgia. In questo momento anche amministrare un analgesico, come meloxicam (2 mg/kg per via sottocutanea). Tagliare i capelli dal umbilicus axilla premuto delicatamente la pelle per fornire tensione.
	<ol>
		<li>Come la pelle del mouse è sottile e delicata, fare attenzione a non causare lesioni cutanee quando i capelli di ritaglio. Pulire la pelle con alcool e povidone-iodio.</li>
		<li>Indossare guanti sterili e preparare il campo operatorio sterile e strumenti. Eseguire il resto della procedura utilizzando una tecnica sterile. Preparare il campo operatorio sterile mettendo teli chirurgici sterili su entrambi i lati del mouse. Utilizzare in autoclave stagnola per creare un telo chirurgico per il mouse.</li>
		<li>Tagliare un piccolo foro nella carta stagnola per consentire l'accesso all'addome del mouse.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Praticare un'incisione della pelle dall'addome metà (ombelico) al livello della cartilagine xifoide utilizzando una forbice di iris. Identificare la linea alba e uso iris forbici per tagliare attraverso la parete del corpo lungo la linea alba. Utilizzare inviti all'azione per elevare delicatamente lo stomaco fuori l'addome e poi senza mezzi termini sezionava il maggior omento al largo di maggior curvatura dello stomaco.</li>
	<li>Legare l'arteria gastrica breve che corre tra il fondo dello stomaco e la milza inserendo due legature con sutura assorbibile monofilamento di 7-0. Usare le forbici di primavera per tagliare tra le due legature. Una volta che l'arteria è attraversata, esternare completamente lo stomaco dalla cavità addominale. Posizionare la garza sotto lo stomaco e bagnato con soluzione fisiologica per mantenere il tessuto umido.</li>
	<li>Procedura Sham
	<ol>
		<li>Per la procedura di sham, posizionare un modello continuo semplice sciolto della sutura utilizzando filo di sutura assorbibile monofilamento 6-0 con un ago conico. Iniziare 2 mm verso destra (destra del chirurgo) dell'esofago. Posizionare la linea di sutura lungo la parete gastrica ventrale e poi proseguire lungo la dorsale parete gastrica. Nota: Per tutte le manipolazioni gastriche, utilizzare solo filo di sutura monofilamento assorbibile per diminuire il rischio di infezione. Inoltre, utilizzare solo sutura con un ago conico per tutte le manipolazioni gastriche, come uso di un ago di taglio aumenta il rischio di sutura "tirare-attraverso" che conducono al danno di tessuto gastrico e deiscenza della ferita.</li>
		<li>Passare l'ago completamente attraverso una parete gastrica pur ponendo la sutura. Assicurarsi che la sutura è disteso, ma non limitando lo stomaco. Delicatamente legare la sutura fuori usando 3-4 tiri e passare al punto 2.9.</li>
		<li>Per la procedura VSG saltare punto 2.7 e procedere con passo 2.8.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Procedura di VSG
	<ol>
		<li>Per la procedura VSG, legare i rami prominenti dell'arteria gastrica e della vena con 7-0 il suturare assorbibile monofilamento con un ago conico utilizzando 3 genera per ogni nodo. Posizionare le legature appena sotto (cioè, verso poca curvatura dello stomaco) la linea prevista del transection. Nota: La linea prevista del transection inizia ~ 2 mm sopra (significato verso la grande curvatura dello stomaco) la tacca cardiaca dello stomaco e almeno 2 mm sotto la pilcatus di margo e si estende all'estremità prossimale del lobo di destra del pancreas. In genere, ci sono 4 vasi a parete gastrica che hanno bisogno di essere legato; Tuttavia, questo può variare fra i topi.</li>
		<li>Per evitare la fuoriuscita del contenuto gastrico durante la gastrectomia, posizionare una semplice linea continua di sutura passando attraverso entrambe le pareti gastriche appena sotto la linea prevista del transection utilizzando filo di sutura assorbibile monofilamento 6-0 con un ago conico. Iniziare la linea di sutura a destra del chirurgo dell'esofago e sotto il margo pilcatus e fine appena sopra il pancreas.</li>
		<li>Posto con punta sottile emostatiche sopra la linea di sutura e primavera forbici per tagliare tra la linea di sutura ed emostatiche. Rimuovere il tessuto gastrico transected dal campo operatorio sterile.</li></ol></li></ol>Utilizzare inviti all'azione per pulire sangue e digesta fuori lo stomaco.
		<li>Rafforzare l'apposizione delle pareti gastriche con sutura assorbibile monofilamento di 6-0 con un ago conico utilizzando un semplice modello discontinuo. Nota: Un modello di semplice sutura discontinuo è consigliato poiché questo fornisce una chiusura più sicura rispetto al modello semplice sutura continua.</li>
		<li>Lavare il residuo gastrico con soluzione salina durante l'intera procedura al fine di mantenere il tessuto umido e pulito. Usare un ago di sonda gastrica 20G collegato ad una siringa 20 mL per eseguire lavanda gastrica con soluzione fisiologica. Utilizzare questo formato per garantire un'adeguata pressione viene fornita senza rischio di danno di tessuto gastrico da una pressione eccessiva o danno accidentale tessuto gastrico dall'uso di un ago aguzzo regolare.</li>
		<li>Utilizzare un minimo di 20 nodi per chiudere saldamente lo stomaco; prestare attenzione alla chiusura lungo il lato dell'esofago, in quanto questo lato è più difficile accedere e quindi è spesso un sito di deiscenza.</li>
		<li>Assicurarsi che non vi siano perdite premendo delicatamente sullo stomaco con inviti all'azione. Se le perdite sono identificate, inserire ulteriori nodi semplici discontinui sulle aree di perdita e quindi le fughe nuovamente. Prova di tenuta finché non viene rilevata nessuna perdita.</li>
		<li>Fare un lavaggio approfondito finale dello stomaco con almeno 60 mL di soluzione fisiologica per garantire che nessun particelle infettive è stato lasciato alle spalle.</li>
	
	
	<li>Rimettere lo stomaco nella cavità addominale sotto il fegato utilizzando un CTA. Posto CTAs lungo la funzione dorsale della cavità addominale per assorbire tutto il liquido in eccesso. Utilizzando un ago 18G, iniettare la soluzione di Ringer lattato (LRS) con o senza antibiotici (0,5 mL LRS + /-20 mg/kg di enrofloxacina) direttamente nella cavità addominale, appena prima della chiusura. Nota: Questo sostituisce con esperienza durante la chirurgia di perdita di liquidi e fornisce un metodo per l'applicazione diretta di antibiotici al sito chirurgico assistere con il recupero.</li>
	<li>Chiudere lo strato del muscolo addominale utilizzando filo di sutura assorbibile monofilamento 6-0 con un ago conico in un semplice modello discontinuo. Quindi chiudere lo strato della pelle con sutura assorbibile monofilamento di 6-0 in un semplice modello di continuo.</li>
	<li>Posizionare l'adesivo del tessuto sulla pelle e piegare la pelle sopra la linea di sutura per seppellire la sutura in modo che il mouse non può interferire con la chiusura della ferita postoperatorio.</li>
	<li>Spegnere l'isoflurano e lasciare il mouse recuperare il termocuscino per 10-15 minbefore restituirlo alla sua gabbia a casa. Non lasciare l'animale incustodito finché ha ripreso conoscenza e si è in grado di muoversi.</li>
	<li>Tenere gli animali ospitati singolarmente fino a completa guarigione dall'intervento chirurgico. Nota: Se cibo accurata aspirazione misure sono ottenibili in tutto studio, topi dovrebbero continuare a essere alloggiati singolarmente in tutto Studio. C'è un rischio di ostruzione di corpo estraneo da mangiare biancheria casa gabbia. Gli animali dovrebbero essere alloggiati in gabbie gratuite della biancheria da letto tranne per materiale per fornire un arricchimento di incastramento (Vedi Tabella materiali).</li>

3. misurazioni e cura del Mouse post-operatorio
<ol>
	<li>Tornare il mouse alla sua gabbia a casa e posizionare la gabbia su un rilievo di riscaldamento. Mantenere topi una dieta liquida per almeno 7 giorni dopo la chirurgia. Amministrare un analgesico, come meloxicam (2 mg/kg per via sottocutanea), per 2 giorni dopo la chirurgia. Nota: Si può somministrare un antibiotico, come enrofloxacina (20 mg/kg), fino a 7 giorni dopo la chirurgia. Gli antibiotici sono indicati per minimizzare il rischio di infezione dalla procedura chirurgica e possono o potrebbero non essere necessari a seconda del livello di sterilità mantenuto durante tutta la procedura. Tuttavia, se gli antibiotici sono usati, deve essere somministrati a topi tutti nello stesso studio per mantenere la coerenza.</li>
	<li>Durante il periodo post-operatorio valutare il peso corporeo, assunzione di cibo, defecazione, livello di attività e la disposizione almeno ogni giorno per garantire la corretta guarigione e recupero. Effettuare il monitoraggio post-operatorio per 14 giorni dopo l'intervento chirurgico. Nota: Guasto chirurgico è in genere visto immediatamente dopo chirurgia o entro tre giorni post-operativamente. Animali che sono non mangiando o bevendo il secondo giorno dopo l'intervento chirurgico devono essere attentamente monitorati per le complicazioni chirurgiche.</li>
	<li>Dopo il completamento del periodo post-operatorio, misurare l'ingestione di cibo e di peso di corpo regolarmente nel corso di studio per garantire il mantenimento del fenotipo appropriato.</li>
	<li>Eseguire un test di tolleranza al glucosio orale (OGTT) per valutare la tolleranza al glucosio, secrezione insulinica glucosio-mediata e svuotare la secrezione dell'ormone.
	<ol>
		<li>Eseguire l'OGTT in topi dopo il digiuno per 6 ore e poi topi sonda gastrica con soluzione di destrosio 50% ad una dose di 1 g/kg.</li>
		<li>Raccogliere i campioni di sangue di coda a 0, 2,5, 5, 15, 30, 60 e 120 minuti dopo il gavage. Misurare la glicemia con un glucometro questi intervalli di tempo. Raccogliere i campioni di siero in ogni momento per la misura di vari ormoni come l'insulina e GLP-1.</li>
		<li>Topi veloci per 6 h prima dell'eutanasia. Prendere una misura del glucosio e del campione di sangue finale. Confrontare la misura finale del glucosio per la misurazione di base. Eutanasia topi con un'iniezione intraperitoneale di pentobarbital ad una dose di 200 mg/kg.</li>
		<li>Utilizzare la linea di base ed i campioni di siero finale per misurare analiti aggiuntivi e confrontare i valori chirurgici pre- e post-operatori.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

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</ol>

Gli autori non dichiarano conflitti di interesse, tranne Dr. Cummings ha ricevuto finanziamenti da Eli Lilly e Company.

Chirurgia bariatrica è il trattamento più efficace a lungo termine per l'obesità e si traduce in benefici per la salute quali elevati tassi di tipo 2 diabete e ipertensione remissione1,9,15. Modelli murini di chirurgia bariatrica forniscono un potente strumento con cui identificare i meccanismi da cui l'ambulatorio bariatric causa miglioramenti rapidi e pronunciati in comorbilità dell'obesità. Inoltre, modelli murini della chiru...

Come l'epidemia di obesità continua a crescere in tutto il mondo chirurgia bariatrica ha guadagnato popolarità come è il trattamento più efficace a lungo termine per l'obesità1. Purtroppo, perdita di peso di dieta ed esercizio fisico è difficile da raggiungere e relativamente inefficace sopra il lungo termine2,3. Chirurgia bariatrica, come la gastrectomia verticale (VSG), è definita come la manipolazione del tratto gastrointestinale allo scopo di peso perdita1,4. Anche se la perdita di peso è un importante risultato della chirurgia bariatrica, la chirurgia bariatrica fornisce altri benefici per la salute come migliorare comorbidities obesità ed estendere la durata della vita5. Ad esempio, chirurgia bariatrica comporta elevati tassi di remissione del diabete di tipo 2 e ipertensione e le riduzioni del rischio di vita dello sviluppo di alcuni tipi di cancro1,6,7. Di nota, l'effetto della chirurgia bariatrica causando remissione del diabete di tipo 2 e ipertensione è spesso osservato subito dopo intervento chirurgico e prima di peso perdita8,9. Questo mette in evidenza il concetto che ci sono meccanismi indipendenti di peso corporeo contribuendo a benefici per la salute osservati dopo la chirurgia. Modelli animali di chirurgia bariatrica sono state sviluppate e sono utilizzate per studiare i meccanismi da cui questi benefici per la salute si presentano10,11,12.
Abbiamo convalidato un modello murino di VSG, che abbiamo applicato ai vari modelli di topi geneticamente modificati per studiare i meccanismi con cui la chirurgia bariatrica migliora comorbidities obesità come il diabete di tipo 2, ipertensione e cancro colorettale10 , 11 , 12. modelli roditore permettono il controllo più sperimentale e la capacità di eseguire manipolazioni genetiche o farmaceutici per definire il ruolo di specifici geni o vie di segnalazione di interesse. Ci stiamo concentrando principalmente sulla VSG perché VSG è la procedura bariatrica più comunemente effettuata nella clinica nei Stati Uniti13. Inoltre, VSG è un semplice modello chirurgico con meno modifiche anatomiche rispetto ad altre procedure quali deviazione di bypass o biliopancreatic gastrico Roux-en-Y.
Il nostro modello del topo del VSG ricapitola i seguenti effetti della chirurgia bariatrica osservata in esseri umani: perdita di peso, ridotto apporto di cibo, regolamento migliore del glucosio, ha migliorato la funzione dell'isolotto, aumentata secrezione postprandiale glucagone-like peptide-1 (GLP-1), ha ridotto la pressione arteriosa e una maggiore circolazione dell'acido di bile concentrazioni10,11,12,13,14,15. Pertanto, questo è un modello ideale per studiare i corpo peso dipendenti ed indipendenti meccanismi mediante il quale VSG migliora o risolve i comorbidities obesità. Inoltre, è un modello affidabile che può essere combinato con altre procedure chirurgiche, che consente per l'indagine dell'impatto del VSG in varie condizioni di malattia con maggiore comprensione meccanicistica12.

<table><tbody><tr><td>Dieta ricca di grassi al 45%</td><td>Diete di ricerca</td><td>D12451</td><td></td></tr><tr><td>Dieta ricca di grassi al 60%</td><td>Diete di ricerca</td><td>D12492</td><td></td></tr><tr><td>Boost</td><td>Nestlé</td><td>160-67538</td><td>ricco sapore di cioccolato</td></tr><tr><td>6-0 Suture</td><td>Ethicon</td><td>Z432</td><td>monofilamento assorbibile/conico</td></tr><tr><td>7-0 Sutura</td><td>Covidien</td><td>8866127-01</td><td>monofilamento assorbibile/conico</td></tr><tr><td>Cotton Pels</td><td>Fisherbrand</td><td>23-400-118</td><td>piccoli</td></tr><tr><td>Cotton Swab Fisherbrand</td><td></td><td>233-400-101</td><td></td></tr><tr><td>grande Garza</td><td>Vari</td><td></td><td>4x4 a 4 veli e 2x2 4 veli</td></tr><tr><td>Foglio Vari</td><td></td> Teli chirurgici Vari <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Soluzione salina allo 0,9%</td><td>Vari</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LRS</td><td>Hospira</td><td>170RX</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Vari</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alcool</td><td>Vari</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Unguento per gli occhi</td><td>Paralube&reg; Unguento veterinario</td><td>17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Adesivo tissutale</td><td>Vetbond</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Meloxicam (Metacam)</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>141-213</td><td>5 mg/ml</td></tr><tr><td>Enrofloxacina</td><td>Baytril</td><td>08713254-186599</td><td>22,7 mg/ml</td></tr><tr><td>Emostatici a punta sottile Strumenti per</td> la scienza fine <td>13021-12</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Forbice Metzenbaum</td><td>Strumenti per la scienza fine</td><td>14018-18</td><td></td></tr><tr><td>Forbici Iris</td><td>Strumenti per le scienze</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>Dumont Forcipe</td><td>Strumenti per le scienze fini</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Forcipe seghettata</td><td>Strumenti per le scienze fini</td><td>11020-12</td><td></td></tr><tr><td>Ago per sonda Gavage</td><td>Strumenti per le scienze fini</td><td>18060-20</td><td></td></tr><tr><td>Driver per microaghi</td><td>Strumenti per le scienze fini</td><td>12075-14</td><td></td></tr><tr><td>Forbice a molla</td><td>Fine Science Tools</td><td>15396-00</td><td></td></tr><tr><td>Siringa da insulina</td><td>Varie</td><td></td><td></td></tr><tr><td>siringhe da 1 ml</td><td>Varie</td><td></td><td></td></tr><tr><td>siringhe da 20 ml</td><td>Vari</td><td></td><td></td></tr><tr><td>glucometri (one touch ultra mini)</td><td>Lifescan</td><td>70021208</td><td></td></tr><tr><td>Kit multiplex per insulina e GLP-1</td><td>Meso Scale Discovery</td><td>K15171C-1</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 6.00</td><td>GraphPad Software</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nestlets</td><td>Ancare</td><td>NES3600</td><td></td></tr></tbody></table>

un modello murino di gastrectomia verticale

A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy

Chirurgia bariatrica, come la gastrectomia verticale (VSG), è un intervento chirurgico del tratto gastrointestinale che viene eseguito ai fini della perdita di peso. Chirurgia bariatrica è attualmente il trattamento più efficace a lungo termine per l'obesità. Oltre alla perdita di peso, la chirurgia bariatrica produce benefici per la salute supplementari come la remissione del diabete di tipo 2, remissione di ipertensione e diminuzione del rischio di sviluppare alcuni tipi di cancro. I meccanismi di là di perdita di peso per questi benefici rimangono in modo incompleto definiti. Pertanto, modelli animali di chirurgia bariatrica sono essere sviluppato e validato per identificare i meccanismi che portano a questi benefici, con l'obiettivo di migliorare la comprensione della fisiologia gastrointestinale e identificare nuovi bersagli terapeutici. VSG è diventata la procedura bariatrica più comunemente effettuata nella clinica negli Stati Uniti perché è altamente efficace nel produrre la perdita di peso e miglioramento metabolico ed è più semplice da eseguire rispetto altre procedure bariatriche. Di conseguenza, abbiamo sviluppato e validato un modello murino di VSG. Questo modello murino di VSG ricapitola molti degli effetti di VSG visto negli esseri umani, compreso il regolamento del glucosio e pressione sanguigna migliorata. Il metodo si basa sull'isolamento dello stomaco, la legatura dei vasi gastrici e rimozione del 70% dello stomaco transecting lungo la maggior curvatura dello stomaco. Abbiamo applicato con successo questo protocollo chirurgico con varie linee di topi geneticamente modificati per definire i contributori meccanicistici ai benefici del VSG. Inoltre, questo modello murino di VSG è stato combinato con altre tecniche chirurgiche, per raggiungere la più profonda comprensione meccanicistica. Pertanto, questo è un modello semplice e versatile per lo studio della fisiologia gastrointestinale e benefici per la salute della chirurgia bariatrica.

La farsa e VSG procedure sono illustrate nella Figura 1. Figura 1A Mostra dove la linea di sutura è posizionata lungo le pareti gastriche durante la procedura di sham. Questa stessa area è dove lo stomaco viene tagliato durante l'intervento chirurgico VSG. Figura 1B Mostra il residuo tubolare della sinistra di stomaco dopo la performance di VSG.
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Quanto segue descrive le prestazioni della gastrectomia verticale nei topi. Si tratta di un tipo di chirurgia di perdita di peso che comporta l'asportazione di circa il 70% dello stomaco.

Un modello murino di gastrectomia verticale

Bariatric surgery, such as vertical sleeve gastrectomy (VSG), is a surgery of the gastrointestinal tract that is performed for the purpose of weight loss. ...

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di modellare i benefici per la salute della gastrectomia a manica verticale nei topi. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nella ricerca sull'obesità sui meccanismi attraverso i quali la chirurgia bariatrica migliora l'obesità e le comorbidità dell'obesità. Il vantaggio di questa tecnica è che fornisce un modello per lo studio di questi meccanismi che faciliterà l'identificazione di nuovi bersagli per il trattamento dell'obesità e delle sue comorbidità.Prima di iniziare la procedura, applicare un unguento veterinario sugli occhi di un topo anestetizzato e posizionare il mouse su un termoforo. Rimuovere i peli dall'ombelico all'ascella tenendo delicatamente la pelle insegnata per evitare lesioni cutanee e utilizzare applicatori a punta di cotone per disinfettare in sequenza la pelle esposta con iodio povidone ed etanolo. Indossando guanti sterili e utilizzando una tecnica sterile, posizionare teli chirurgici sterili su entrambi i lati dell'animale.Taglia un piccolo foro nella pellicola per consentire l'accesso all'addome del topo e usa un pezzo di foglio di alluminio autoclavato come telo chirurgico. Praticare un'incisione cutanea dalla metà dell'addome alla cartilagine xifoidea. Sotto un microscopio da dissezione, usa le forbici dell'iride per tagliare la parete del corpo lungo la linea alba.E usa i nuovi applicatori con punta di cotone per sollevare delicatamente lo stomaco fuori dall'addome. Sezionare senza mezzi termini l'omento maggiore dalla maggiore curvatura dello stomaco. Quindi utilizzare suture riassorbibili in monofilamento 7-0 per posizionare due legature attorno all'arteria gastrica corta che corre tra il fondo dello stomaco e la milza.Quando entrambe le legature sono state posizionate, utilizzare le forbici a molla per tagliare tra le due suture ed esteriorizzare completamente lo stomaco dalla cavità addominale. Metti una garza sotto lo stomaco e idrata l'organo con soluzione salina. Per una procedura fittizia, utilizzare una sutura assorbibile monofilamento 6-0 con un ago conico per posizionare un modello continuo semplice a partire da due millimetri a destra dell'esofago lungo la parete gastrica ventrale e continuando lungo la parete gastrica dorsale.Assicurati che la sutura sia piatta senza restringere lo stomaco e usa tre o quattro lanci per legare delicatamente la sutura. Per una procedura di gastrectomia a manica verticale, utilizzare una sutura assorbibile monofilamento 7-0 con un ago conico per legare i rami prominenti dell'arteria gastrica e della vena appena sotto la linea di transezione prevista. Posizionare una semplice linea continua di sutura assorbibile in monofilamento 6-0 attraverso entrambe le pareti gastriche appena sotto la linea di trassezione prevista per evitare la fuoriuscita del contenuto gastrico.Posizionare gli emostatici a punta sottile sopra la linea di sutura e utilizzare le forbici a molla per tagliare tra la linea di sutura e gli emostatici. Rimuovere il tessuto gastrico sezionato dal campo chirurgico sterile e utilizzare applicatori con punta di cotone fresco per pulire il sangue e il digestato dallo stomaco. Utilizzare una sutura assorbibile in monofilamento 6-0 con un ago conico per rafforzare l'apposizione delle pareti gastriche in un semplice schema discontinuo.Utilizzando un ago da sonda gastrica calibro 20 collegato a una siringa da 20 millilitri, eseguire la lavanda gastrica con soluzione fisiologica fresca e chiudere saldamente lo stomaco con un minimo di 20 nodi. Quindi premere delicatamente lo stomaco con un applicatore di cotone per verificare la presenza di perdite. Se non vengono rilevate perdite, lavare lo stomaco con almeno altri 60 millilitri di soluzione salina fresca per rimuovere eventuali particelle infettive.Dopo entrambe le procedure, utilizzare un applicatore con punta di cotone per riportare lo stomaco sotto il fegato all'interno della cavità addominale e posizionare un applicatore lungo l'aspetto dorsale della cavità addominale per assorbire il liquido in eccesso. Utilizzare un ago smussato calibro 18 per iniettare la soluzione di Ringer lattato con o senza antibiotici direttamente nella cavità addominale e utilizzare suture assorbibili in monofilamento 6-0 per chiudere lo strato muscolare addominale in un semplice schema discontinuo e lo strato cutaneo in un semplice schema continuo. Quindi posizionare l'adesivo in tessuto sulla pelle e piegare la pelle sulla linea di sutura per proteggere la sutura dall'interruzione da parte dell'animale.I topi alimentati con gastrectomia a manica verticale, alimentati con dieta ricca di grassi, mostrano un apporto energetico e un peso corporeo ridotti rispetto ai topi alimentati ad libitum, alimentati con sham. La gastrectomia a manica verticale migliora la tolleranza al glucosio, aumenta la secrezione di insulina stimolata dal glucosio e aumenta la secrezione postprandiale del peptide glucagone-simile rispetto ai topi di controllo alimentati ad libitum in modo fittizio, coerenti con i risultati osservati nell'uomo e in altri modelli di roditori di chirurgia bariatrica. Una volta padroneggiata, questa procedura dovrebbe essere eseguita in 90 minuti.Durante l'apprendimento di questa procedura, è importante ricordare di essere delicati quando si manipola il tratto gastrointestinale. Il tratto gastrointestinale è un organo molto sensibile nei topi e la manipolazione accidentale dell'intestino tenue può portare alla stasi gastrointestinale. Dopo aver appreso con successo questa procedura, i ricercatori possono applicare manipolazioni genetiche o farmaceutiche a vari modelli di malattia per studiare i meccanismi attraverso i quali la chirurgia bariatrica migliora la salute.

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Ricerca

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Biologia

In questo video, viene eseguita una procedura di gastrectomia a manica verticale su un modello murino sperimentale. Questa procedura aiuta a rimuovere una parte significativa dello stomaco lungo la sua maggiore curvatura.

Gastrectomia a manica verticale murina: una procedura chirurgica per ridimensionare lo stomaco in modelli murini sperimentali

Questo video descrive una procedura di chirurgia bariatrica-Roux-en-Y. Ciò comporta il taglio del digiuno, la parte centrale dell'intestino, per generare due arti intestinali. L'arto biliare è attaccato all'ansa intestinale esistente e l'arto alimentare è attaccato allo stomaco, creando un bypass gastrico. Il bypass gastrico creato qui aiuta a ridurre l'assorbimento dei nutrienti e riduce efficacemente il peso corporeo.

Procedura di bypass gastrico Roux-en-Y: una procedura chirurgica bariatrica per la resezione gastrica in modello murino

La chirurgia bariatrica è il modo più efficace per ridurre il peso corporeo e le complicanze metaboliche mortali (diabete, obesità e dislipidemia) spesso associate all'obesità patologica. I modelli murini di chirurgia bariatrica rappresentano una risorsa unica per decifrare i meccanismi molecolari alla base degli effetti benefici di questi interventi chirurgici su diabete, ipertensione e dislipidemia.

Tecniche di sleeve gastrectomy e modificata Roux-en-Y bypass gastrico nei topi

La prevalenza del diabete e dell'obesità è in continuo aumento in tutto il mondo. I meccanismi tra diabete, obesità e mortalità e co-morbidità associati devono essere ulteriormente studiati. Qui, presentiamo un protocollo per la gastrectomia manica (SG) negli animali come modello preclinico semplice di chirurgia bariatrica.

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