Name: Procedura transuretrale instillazione in di topo maschio adulto (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-11-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 1 s
Description: Impara l'instillazione transuretrale nel topo maschio adulto per studiare patologie della vescica. Questa tecnica consente la somministrazione intravescicale di sostanze attive e la valutazione di trattamenti.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Gli autori non hanno alcun acknowledgement.

tutte le procedure con gli animali, tra cui il metodo e la durata dell'anestesia, come pure la cura postoperatoria, sono state discusse con un veterinario e approvate dalla istituzionale animale cura ed uso Committee (IACUC) presso la istituzione affiliata. In questo manoscritto, tutte le procedure sono state eseguite con 8 a di topo maschio C57BL/6 di 15-settimana-vecchio e il protocollo segue le linee guida di cura degli animali approvate dal IACUC presso l'Università del Colorado.
 1. preparazione di tubi Nota: per infondere l'inoculo, un ago inserito per i tubi di polietilene (PE) ( Figura 1A) o un piccolo calibro (&#60; 24 G) angiocatheter può essere usato ( Figura 1). L'uso di un angiocatheter non richiede preparazione diverso da sterilizzazione con 70% di etanolo (EtOH). L'inoculo è la sostanza che è instillato/iniettato/depositato nell'apparato urinario. Può trattarsi di una soluzione contenente batteri, virus o una sostanza chimica. Questo è preparato prima del tempo e per il protocollo di ricerca. Ad esempio, se lo studio mira a valutare gli effetti di e. coli infezione del tratto urinario inferiore, il ricercatore dovrà preparare l'inoculo contenente batteri, che possono essere inoculati/instillato nel tratto urinario inferiore.
<ol><li>Preparazione dell'ago collegato al tubo di PE è semplice e consiste dei seguenti: scegliere la dimensione della tubazione PE sulla base dell'organo bersaglio e l'età di un animale. Per un animale di età inferiore a 12 settimane, utilizzare un tubo di PE-10 (diametro esterno è 0,024 pollici e diametro interno è 0,011 pollici). Tubi PE-10 sono suggerito per essere applicabile per (1) la semina primario dell'inoculo nella prostata anteriore (AP) e vescicole seminali (SV), o (2) la semina primario dell'inoculo nella vescica di un animale di età inferiore a 12 settimane di età. Tubi in PE con diametro maggiore di fino alla taglia 50 PE (diametro esterno fino a 0,038 pollici e diametro fino a 0,023 pollici interno) può essere utilizzato per la semina primario dell'inoculo nella vescica dei più vecchi animali.</li>
	<li>Tagliare circa 2,5 pollici di tubi PE.</li>
	<li>Selezionare un ago che misura il diametro di PE selezionato per essere utilizzato. Un ago da 27 G può andare bene nel lume del tubo PE-10, e un ago 22G si inserisce il lume del tubo PE-50.
	<ol><li>Preparare l'ago prima dell'inserimento nel tubo PE sfregando il bordo tagliente dell'ago su una pietra ad olio disponibile in commercio ( Figura 1A -B) per renderlo noioso, o utilizzare un blunt commercialmente disponibile f.</li>
	</ol></li> <li>Introdurre l'ago sordo ( Figura 1) nel lume del tubo PE. Evitare di danneggiare il lume o entrata in un lumen falso assicurando i resti dell'ago al centro del lume. ( Figura 1 -E). Se i tubi di PE sono danneggiato durante l'inserimento dell'ago sordo, tagliare l'estremità danneggiata e riavviare il processo.</li>
	<li>Inserire i tubi di PE ago inserito nel 70% di EtOH per sterilizzazione fino al suo utilizzo per la procedura. Flush il 70% EtOH attraverso il tubo dell'ago-PE per sterilizzare il lume e garantire non c' non è nessuna perdita dal tubo PE da danni durante il processo di inserimento dell'ago. Se c'è dispersione, scartato il tubo dell'ago-PE. 
	Nota: La punta del tubo PE deve essere liscia prima del cateterismo. Per evitare problemi con l'introduzione del tubo PE nell'uretra, si consiglia di tagliare la punta del tubo PE immediatamente prima del cateterismo ( Figura 1F). La lunghezza minima consigliata del tubo PE è 1,5 pollici, che comprende la parte che circonda l'ago.</li>
</ol> 2. Procedura di cateterizzazione <ol><li>prima dell'induzione dell'anestesia, svuotare la vescica di mouse.
	<ol><li>Applicare una leggera pressione e massaggio all'addome inferiore del mouse. Queste manovre in genere causare minzione spontanea. Una vescica piena può provocare la diluizione o la perdita immediata qualsiasi infuso inoculo. 
		Nota: Un'opzione aggiuntiva per garantire una vescica vuota in un mouse è di privare l'animale d'acqua per almeno 1 ora prima dell'inizio della procedura transuretrale instillazione. Privazione dell'acqua deve essere approvata dall'istituzione come parte del protocollo animali.</li>
	</ol></li> <li>Utilizzare una macchina di anestesia con isoflurano flusso (2%) per indurre anestesia.
	<ol><li>Una volta che l'animale è anestetizzato, posizionarlo su una coperta calda riscaldamento e coprirlo con un pad blu con il naso all'interno di una punta conica per il mantenimento dell'anestesia continua.</li>
		<li>Confermare che l'animale è in anestesia controllando il riflesso pedale (pizzico di punta).</li>
	</ol></li> <li>Una volta che il pedale riflesso è assente, procedere ritraendo il prepuce.
	<ol><li>Stampa la regione pubica con il pollice e il dito indice di una mano ( figure 2A e 2B) e tirare fuori il pene di ghiandole utilizzando il pollice e il dito indice di altra mano ( Figura 2). Quando questa operazione viene eseguita correttamente, il prepuzio, glande e il corpo del pene rimangono esposte. ( Figura 2D e Figura 2F). Non utilizzare pinze per tirare fuori il pene di ghiandole come questo si tradurrà in danni al tessuto.</li>
	</ol></li> <li>Lubrificare la punta del catetere e il glande con lubrificante chirurgico sterile prima dell'inserimento del catetere. Questo faciliterà l'inserimento della tubazione PE. 
	Nota: Singolarmente confezionati piazze di lubrificante chirurgico, invece di un condotto più largo, sono consigliate per ogni uso, per mantenere condizioni di sterilità.</li>
	<li>Premere delicatamente la punta del pene usando il forcipe noioso e spremere delicatamente il glande per causare il meato uretrale aprire.</li>
	<li>Tenere la siringa con l'ago inserito PE-tubazione o PE della tubazione stessa e inserire il tubo di PE tramite il meatus uretra. 
	Nota: Per stabilità, è consigliabile una presa treppiede della siringa con l'ago inserito PE-tubazione o il PE tubi se stessa utilizzando il pollice, indice e le barrette centrali. 
	Nota: Il percorso di cateterizzazione dovrebbe essere curvato dovuto alla naturale curvatura dell'uretra circondato dal pene di glans e il corpo del pene nel topo maschio adulto, come mostrato in Figura 3A e 3B di figura. I tubi di PE cateterizzato possono incontrare la resistenza durante la cateterizzazione, pertanto, si raccomanda di regolare l'angolo inclinando il tubo verso l'alto o verso il basso per aiuto anticipato i tubi di PE a seguito dell'organo bersaglio. Se necessario, i tubi di PE possono essere leggermente ruotato per aiutarlo manovra attraverso i vari tornanti dell'uretra. Quando c'è troppa resistenza, il tubo dovrebbe essere tirato indietro e quindi avanzare di nuovo con una pressione minima. Tirando il PE-tubo fuori completamente e usando maggiore lubrificazione può essere utile.</li>
	<li>Eseguire instillazione dell'inoculo, una volta che il PE-tubo ha raggiunto l'organo desiderato premendo lo stantuffo dell'ago per instillare il volume desiderato dell'inoculo (5-200 µ l di volume è suggerito).
	<ol><li>Per instillazione dell'inoculo nella vescica urinaria, avanzare la tubazione PE sino a circa 0,75 pollici di tubi di PE è inserita ( Figura 3A). 
		Nota: per instillazione dell'inoculo in AP e SV, generalmente, the inserita la tubazione incontra resistenza una volta che raggiunge il punto di apertura nella prostata anteriore. Regolando l'angolo inclinando il tubo verso l'alto o verso il basso, i tubi di PE avanzerà ulteriormente fino a circa 1 pollice di tubi di PE è stato inserito ( Figura 3B).</li>
	</ol></li></ol> 3. In Vivo Imaging del tratto urinario inferiore e reni Nota: lo scopo dell'imaging in vivo in questo manoscritto è: (1) per confermare la localizzazione spaziale dell'inoculo; e (2) per valutare l'incidenza del reflusso dell'inoculo per la reni. Per questo scopo, può essere utilizzato sia un mouse anestetizzato o euthanized.
<ol><li>Per visualizzare il tratto urinario inferiore di un topo maschio adulto, eseguire inferiore laparotomia mediana addominale per esporre la vescica, prostata e vescicole seminali.
	<ol><li>Incise la pelle nel midline dall'osso pubico appena sotto il processo xifoideo utilizzando forbici.</li>
		<li>Elevare la pelle di dosso il tessuto sottocutaneo.</li>
		<li>Identificare la linea avascolare alba situata nel midline ed incise per entrare nella cavità peritoneale, dove si trovano tutti gli organi.</li>
		<li>Confermare la localizzazione spaziale da visualizzazione del colorante blu o un altro agente di rilevamento adatto.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Lee, S., Yang, G., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prostatic+inflammation+induces+urinary+frequency+in+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Prostatic inflammation induces urinary frequency in adult mice.</a> PLoS One. 10 (2), e0116827(2015).</li>
<li>Wong, L., Hutson, P. R., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prostatic+inflammation+induces+fibrosis+in+a+mouse+model+of+chronic+bacterial+infection%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Prostatic inflammation induces fibrosis in a mouse model of chronic bacterial infection.</a> PLoS One. 9 (6), e100770(2014).</li>
<li>Elkahwaji, J. E., Zhong, W., Hopkins, W. J., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+bacterial+infection+and+inflammation+incite+reactive+hyperplasia+in+a+mouse+model+of+chronic+prostatitis%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate%22%5BJournal%5D)">Chronic bacterial infection and inflammation incite reactive hyperplasia in a mouse model of chronic prostatitis.</a> Prostate. 67 (1), 14-21 (2007).</li>
<li>Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+bacterial+inflammation+of+the+mouse+prostate%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate%22%5BJournal%5D)">Acute bacterial inflammation of the mouse prostate.</a> Prostate. 72 (3), 307-317 (2012).</li>
<li>Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+inflammation+of+the+lower+urinary+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Models of inflammation of the lower urinary tract.</a> Neurourol Urodyn. 30 (5), 673-682 (2011).</li>
<li>Thai, K. H., Thathireddy, A., Hsieh, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transurethral+induction+of+mouse+urinary+tract+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Transurethral induction of mouse urinary tract infection.</a> J Vis Exp. (42), (2010).</li>
<li>Bjorling, D. E., Wang, Z. Y., Boldon, K., Bushman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+cystitis+is+accompanied+by+increased+peripheral+thermal+sensitivity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Bacterial cystitis is accompanied by increased peripheral thermal sensitivity in mice.</a> J Urol. 179 (2), 759-763 (2008).</li>
<li>Hopkins, W. J., Gendron-Fitzpatrick, A., Balish, E., Uehling, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+and+host+responses+to+Escherichia+coli+urinary+tract+infection+in+genetically+distinct+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Time course and host responses to Escherichia coli urinary tract infection in genetically distinct mouse strains.</a> Infect Immun. 66 (6), 2798-2802 (1998).</li>
<li>Dinis, P., Charrua, A., Avelino, A., Cruz, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravesical+resiniferatoxin+decreases+spinal+c-fos+expression+and+increases+bladder+volume+to+reflex+micturition+in+rats+with+chronic+inflamed+urinary+bladders%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">Intravesical resiniferatoxin decreases spinal c-fos expression and increases bladder volume to reflex micturition in rats with chronic inflamed urinary bladders.</a> BJU Int. 94 (1), 153-157 (2004).</li>
<li>Cayan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Botulinum+toxin+type+A+may+improve+bladder+function+in+a+rat+chemical+cystitis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Urol+Res%22%5BJournal%5D)">Botulinum toxin type A may improve bladder function in a rat chemical cystitis model.</a> Urol Res. 30 (6), 399-404 (2003).</li>
<li>Jerde, T. J., Bjorling, D. E., Steinberg, H., Warner, T., Saban, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+mouse+bladder+inflammatory+response+to+E.+coli+lipopolysaccharide%5BTitle%5D)+AND+%22Urol+Res%22%5BJournal%5D)">Determination of mouse bladder inflammatory response to E. coli lipopolysaccharide.</a> Urol Res. 28 (4), 269-273 (2000).</li>
<li>Saban, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LPS-sensory+peptide+communication+in+experimental+cystitis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">LPS-sensory peptide communication in experimental cystitis.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 282 (2), F202-F210 (2002).</li>
<li>Schilling, J. D., Mulvey, M. A., Vincent, C. D., Lorenz, R. G., Hultgren, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+invasion+augments+epithelial+cytokine+responses+to+Escherichia+coli+through+a+lipopolysaccharide-dependent+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Bacterial invasion augments epithelial cytokine responses to Escherichia coli through a lipopolysaccharide-dependent mechanism.</a> J Immunol. 166 (2), 1148-1155 (2001).</li>
<li>Saban, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discriminators+of+mouse+bladder+response+to+intravesical+Bacillus+Calmette-Guerin+%28BCG%29%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Immunol%22%5BJournal%5D)">Discriminators of mouse bladder response to intravesical Bacillus Calmette-Guerin (BCG).</a> BMC Immunol. 8, 6(2007).</li>
<li>Bjorling, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+acrolein-induced+cystitis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">Acute acrolein-induced cystitis in mice.</a> BJU Int. 99 (6), 1523-1529 (2007).</li>
<li>Sadler, K. E., Stratton, J. M., Kolber, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urinary+bladder+distention+evoked+visceromotor+responses+as+a+model+for+bladder+pain+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Urinary bladder distention evoked visceromotor responses as a model for bladder pain in mice.</a> J Vis Exp. (86), (2014).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Questo manoscritto descrive in dettaglio un metodo di transurethral instillazione in di topo maschio adulto. Differenziale zona primaria di semina è raggiungibile utilizzando PE tubi di diverso diametro. PE-50 è consigliato per raggiungere con successo il lume della vescica urinaria, mentre un più grande diametro che PE-10 viene utilizzato per raggiungere l'AP e SV (Figura 3A-B). Oltre alla scelta del formato della tubazione PE e organo bersaglio per inoculazione, altri fatt...

L'approccio di instillazione transuretrale è stato utilizzato negli studi precedenti come uno dei metodi per creare modelli del roditore di vescica patologie1,2,3,4 e può essere utilizzato per valutare la efficacia dei trattamenti localmente trasportati nei topi. Anche se i modelli animali non possono completamente ricapitolare patologie umane, identificazione dei meccanismi sottostanti negli studi sugli animali fornisce una migliore comprensione dei disordini LUT umani come la sindrome di dolore di cistite interstiziale, neurogena cistite, cistite autoimmune e infiammazione prostatica5.
La procedura transurethral instillazione effettuata su un topo maschio adulto è tecnicamente più complessa rispetto all'instillazione intravescicale in un topo adulto femmina6. L'anatomia naturalmente curva dell'uretra maschio insieme al suo piccolo diametro lo rendono tecnicamente difficile da realizzare l'inserzione di un catetere transuretrale. Di conseguenza, istruzioni dettagliate per l'induzione transuretrale di di infezione delle vie urinarie del mouse6 e LUT infiammazione7,8,9,10,11 , 12 , 13 , 14 , 15 via catetere della vescica-inserito precedentemente sono stati delineati per topi femmina solo. Questo manoscritto mira a fornire una descrizione dettagliata della tecnica per instillazione transuretrale di sostanze in di topo maschio, compreso la video clip, immagini e illustrazioni. Transuretrale instillazione procedure in un topo maschio adulto possono essere eseguite con variabile inoculates simile a quello precedentemente descritto in mouse femminile7 e si fuse con altre tecniche quali registrazioni di elettromiografia di visceromotor risposte (VMR)16.

<table><tbody><tr><td>BD INTRAMEDIC Tubo in polietilene/ PE 10</td><td>BD Medical</td><td>63019-004</td><td></td></tr><tr><td>BD INTRAMEDIC Tubo in polietilene/ PE 50</td><td>BD Medical</td><td>63019-048</td><td></td></tr><tr><td>BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath</td><td>BD Medical</td><td>311411</td><td></td></tr><tr><td>Etanolo (EtOH)</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP2818500</td><td></td></tr><tr><td>BD Ago Solo 22 Calibro (G) 1 pollice</td><td>Becton Dickson</td><td></td><td></td>205155</tr><tr><td>Ago BD Solo 27 Gauge (G) 1/2 pollice</td><td>Becton Dickson</td><td>305129</td><td></td></tr><tr><td>Luer stub, 22 G X 0,5 pollici / Ago smussato</td><td>Instech</td><td>LS22</td><td></td></tr><tr><td>Luer stub, 27 G X 0,5 pollici / Ago smussato</td><td>Instech</td><td>LS27</td><td></td></tr><tr><td>6" Lungo x 2" Largo x 1" Spesso, Pietra per affilare in ossido di alluminio / Pietra ad olio</td><td>Norton</td><td>40204034</td><td></td></tr><tr><td>Lubrificante chirurgico Sterile Batteriostatico Folilpac</td><td>Surgilube</td><td>281020543</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Fluriso</td><td>13985-528-60</td><td></td></tr><tr><td>Sistema di anestesia a basso flusso SomnoSuite</td><td>Kent Scientific</td><td>SS-01</td><td></td></tr><tr><td>Pinze da dissezione, curve</td><td>vwr</td><td>82027-392</td><td></td></tr><tr><td>BD Siringa da 1 ml</td><td>BD Medical</td><td>309626</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione di inchiostro indiano., 0,2% in tampone PBS</td><td>Alfa Aesar</td><td>J61007</td><td></td></tr><tr><td>maschio C57B/6 di 8~12 settimane Topi</td><td>Jackson Lab</td><td>#000664</td><td></td></tr></tbody></table>

procedura transuretrale instillazione in di topo maschio adulto

Transurethral Instillation Procedure in Adult Male Mouse

Transuretrale instillazione può essere utilizzato per fornire diverse soluzioni con principi attivi (ad es., farmaci, sostanze chimiche, batteri e virus) localmente nella vescica urinaria a indurre modelli animali di patologie della vescica o valutare la efficacia dei trattamenti intravesical. Più modelli di roditori di inferiore del tratto urinario (LUT) patologie sono indotte nei topi femmina dovuta alla facilità di instillazione intravescicale delle sostanze tramite l'uretra femminile. Tuttavia, a causa di differenze anatomiche fra il LUT maschili e femminili, transurethral instillazione in un topo maschio è stato considerato una procedura molto impegnativa, e non è stata precedentemente descritta. In questo manoscritto, forniamo una descrizione dettagliata di come preparare i tubi di polietilene (PE) per il successivo inserimento nell'uretra di un topo maschio. In più, discutiamo i tipi ideali di tubi PE da utilizzare a seconda del sito di inoculazione desiderato. Inoltre, descriviamo punto per punto come preparare un animale per un successo instillazione transuretrale evitare lesioni all'uretra e garantire la consegna della soluzione nella posizione desiderata. La procedura viene avviata da ritrarre il prepuzio e il glande per esporre l'apertura del meato uretrale. Successivamente, il glande sono afferrati dal forcipe smussato non schiacciare per stabilizzare il pene e i tubi di PE. I tubi di PE prima viene inserito nel meato uretrale parallelo al corpo animale, quindi l'angolo è regolato inclinando il catetere per manovrare per seguire la naturale curvatura dell'uretra. Questa tecnica può essere utilizzata per indotti modelli murini di patologie della vescica e/o valutare l'efficacia dei trattamenti intravesical in di topo maschio.

Transuretrale instillazione di colorante blu tramite tubazione PE 50 provocato instillazione del colorante nella vescica urinaria (Figura 4A) e via PE 10 tubi in colorazione della SV e AP (Figura 4B), rispettivamente. Per valutare se l'instillazione transuretrale eseguito provoca un reflusso istantanea dell'inoculo ai reni o non, del rene e dell'uretere sono stati osservati seguita da instillazione di 100 µ l del colorante blu e ...

Instillazione transuretrale è una procedura difficile e non è stato ben descritto nella letteratura. Lo scopo di questo manoscritto è quello di descrivere una tecnica per transuretrale inserzione di un catetere per consegna intravescicale di liquidi con sostanze attive nella vescica urinaria e/o della prostata nei topi del maschio adulto.

Procedura transuretrale instillazione in di topo maschio adulto

Transurethral instillation can be used to deliver different solutions with active ingredients (e.g., drugs, chemicals, bacteria, and viruses) locally into ...

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di utilizzare l'inserimento di un catetere transuretrale per la somministrazione intravescicale di sostanze attive nella vescica urinaria e/o nella prostata di topi maschi adulti. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della patologia della vescica su come studiare i meccanismi sottostanti coinvolti nella malattia del tratto urinario inferiore negli uomini. I principali vantaggi di questa tecnica sono che può essere utilizzata per indurre modelli animali di patologia vescicale e per valutare l'efficacia del trattamento intravesicolare.L'instillazione transuretrale nel maschio è impegnativa a causa della curvatura naturale dell'uretra, della sottigliezza della parete uretrale e della necessità di instillazione ripetitiva di sostanze attive. Prima di iniziare la procedura, selezionare la dimensione del tubo in PE in base all'organo bersaglio e all'età dell'animale e tagliare un pezzo lungo circa 2,5 pollici dal tubo. Smussare il bordo affilato di un ago di dimensioni compatibili su una pietra olearia disponibile in commercio e introdurre con cautela l'ago nel lume di un'estremità del tubo.Quindi, immergere l

transurethral-instillation-procedure-in-adult-male-mouse

Research

Ricerca

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologia e Infezioni

Questo video dimostra metodi per indurre transurethrally infezioni del tratto urinario del mouse e quantificare l'entità delle infezioni che ne derivano.

Induzione transuretrale di infezioni del tratto urinario mouse

Fonte: Luyts, N., et al. Follow-up longitudinale delle infezioni delle vie urinarie e il loro trattamento nei topi tramite imaging bioluminescenze. J. Vis. Esp. (2021).Questo video dimostra l'induzione e il tracciamento dell'infezione delle vie urinarie in un modello murino utilizzando E. coli bioluminescente iniettate nella vescica, dove avvengono l'adesione, l'invasione e la replicazione intracellulare batterica. La luce emessa dall'operone bioluminescente funge da indicatore in tempo reale...

Visualizzazione dell'infezione delle vie urinarie in un modello murino utilizzando la bioluminescenza

In questo video, descriviamo la procedura intravescicale di rilascio di cellule tumorali nella vescica di un modello murino. Questa procedura aiuta a generare un modello di tumore ortotopico della vescica che può essere utilizzato per sviluppare strategie terapeutiche.

Modellazione del tumore ortotopico della vescica in un modello murino: una procedura per la somministrazione intravescicale di cellule tumorali nella vescica murina

In questo video, descriviamo la tecnica per la somministrazione intravescicale di batteri uropatogeni per generare un modello di infezione del tratto urinario nei topi. Questo modello può essere utilizzato per comprendere la diffusione dell'infezione batterica uropatogena all'interno del sistema urinario e i meccanismi che determinano la suscettibilità alle infezioni delle vie urinarie.

Generazione di un modello di infezione del tratto urinario: una tecnica per somministrare batteri uropatogeni nel topo per sviluppare un modello di infezione del tratto urinario

Questo video dimostra l'instaurazione di un'infezione uropatogena da Escherichia coli in una vescica di topo femmina attraverso l'instillazione di catetere transuretrale. I batteri iniettati stabiliscono con successo un'infezione del tratto urinario all'interno della vescica, fornendo una preziosa piattaforma per lo studio delle malattie associate all'assistenza sanitaria correlate al tratto urinario.

Cateterismo transuretrale e inoculazione batterica per generare un modello di infezione del tratto urinario nei topi maschi

Istituzione di un modello di infezione del tratto urinario nei topi femmina

La capacità di modellare le infezioni del tratto urinario (UTI) è fondamentale per essere in grado di comprendere la patogenesi batterica e generare lo sviluppo di nuove terapie. L'obiettivo di questo lavoro è dimostrare modelli murini di UTI sperimentali e UTI associate a catetere che ricapitolano e predicono i risultati osservati negli esseri umani.

Istituzione e caratterizzazione di UTI e CAUTI in un modello murino

Il modello stabilito di cateterizzazione transuretrale dei topi permette lo studio delle patologie della vescica, compreso l'infezione delle vie urinarie, ma può essere eseguito solo nelle femmine. Un nuovo modello di maschio instillazione transuretrale, qui presentato, consentirà la ricerca in un'area segnata da forti differenze cliniche ed epidemiologiche tra i sessi.

Infezione di apparato urinario in un modello animale piccolo: cateterizzazione transuretrale di topi maschi e femmine

Descriviamo un metodo novello per la consegna del plasmide del DNA nelle cellule uroteliali del mouse della vescica in vivo tramite cateterizzazione dell'uretra e l'elettroporazione. Offre un modo veloce e conveniente per la generazione di modelli murini autoctoni di malattie di vescica.

Nuovo metodo di consegna plasmide DNA Urothelium della vescica del Mouse mediante elettroporazione

Descriviamo l'uso di ultrasuoni ad alta frequenza con imaging a contrasto come un metodo per misurare il volume della vescica, lo spessore della parete della vescica, la velocità delle urine, il volume del vuoto, la durata del vuoto e il diametro uretrale. Questa strategia può essere utilizzata per valutare la disfunzione di vuoto e l'efficacia del trattamento in vari modelli murini di disfunzione del tratto urinario inferiore (LUTD).

Ultrasonografia del tratto urinario maschile adulto per test funzionali urinari

Questo manoscritto descrive la somministrazione intravescicale di batteri uropatogeni con un operone lux per indurre un'infezione del tratto urinario nei topi e la successiva analisi longitudinale in vivo della carica batterica utilizzando l'imaging a bioluminescenza.

Follow-up longitudinale delle infezioni del tratto urinario e loro trattamento nei topi utilizzando l'imaging a bioluminescenza

Impara l'instillazione transuretrale nel topo maschio adulto per studiare patologie della vescica. Questa tecnica consente la somministrazione intravescicale di sostanze attive e la valutazione di trattamenti.

Procedura transuretrale instillazione in di topo maschio adulto

Esplora altri video