Stenosi della Vena Cava inferiore: un modello murino di trombosi venosa profonda

L'obiettivo generale di questa procedura chirurgica è quello di creare una stenosi della vena cava inferiore per imitare la distorsione del flusso sanguigno per l'inizio della trombosi venosa profonda. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della trombosi venosa sui meccanismi dell'inizio della trombosi venosa profonda. Il vantaggio principale di questa tecnica è che simula il disturbo del flusso sanguigno, un meccanismo chiave dell'inizio della trombosi nelle vene.

La dimostrazione visiva di questo metodo è fondamentale in quanto separare la vena cava inferiore dall'aorta e praticare il foro tra questi tessuti è difficile da spiegare verbalmente. Inizia radendo l'addome di un topo anestetizzato di 8-12 settimane da 19 a 25 grammi e posiziona il mouse in posizione supina su un termoforo. Utilizzare un batuffolo di cotone sterile per disinfettare la pelle esposta tre volte con una soluzione antibatterica.

Confermare il livello appropriato di sedazione in caso di mancata risposta al pizzicamento delle dita dei piedi e coprire il topo con un telo sterile con un foro sul sito chirurgico. Sotto un microscopio da dissezione, praticare un'incisione lungo la linea mediana addominale, iniziando da 1,5 centimetri sotto lo sterno e utilizzare dei cotton fioc per esteriorizzare l'intestino sul lato sinistro dell'animale. Coprire il tessuto intestinale con una garza sterile imbevuta di soluzione salina a 37 gradi Celsius.

Posizionare i divaricatori di tessuto per espandere l'incisione e individuare la vena cava inferiore, o IVC, e i suoi rami laterali caudali alla vena renale sinistra. Usando una pinza, tira su il tessuto adiposo che circonda i rami laterali, quindi usa una seconda pinza per scavare un tunnel sotto il ramo. E legare tutti i rami laterali il più vicino possibile all'IVC con suture in prolene inerte 7-0.

Tenendo i tessuti circostanti con una pinza, tirare l'IVC verso l'alto e lasciarlo per produrre tensione nella piccola area tra l'IVC e l'aorta, precisamente tra l'IVC e la vena renale sinistra. Inserire un secondo paio di pinze tra l'aorta e l'IVC e aprire e chiudere la pinza non più di tre o cinque volte per fare un foro. È molto importante fare il foro proprio nel punto in cui l'IVC converge con la vena renale sinistra.

Usando la mano sinistra, posizionare un pezzo di due centimetri di sutura in prolene inerte 7-0 nel lato sinistro della cavità peritoneale, vicino all'IVC, e tirare l'IVC verso l'alto e di nuovo a sinistra. Inserire la seconda pinza nel foro tra l'aorta e l'IVC in modo che le punte appaiano sull'altro lato dell'IVC e tirare indietro la sutura attraverso il foro. Fai un nodo provvisorio allentato e posiziona un distanziatore dell'ago calibro 30, piegato in un gancio, nel nodo.

Dopo aver stretto il nodo, rimuovere il distanziatore e utilizzare un batuffolo di cotone per riportare l'intestino nella cavità peritoneale. Utilizzando anelli continui, chiudere il peritoneo con una sutura VICRYL 6-0 e chiudere la pelle con graffette metalliche. Iniettare per via sottocutanea nel topo 0,5 millilitri di glucosalina a 37 gradi Celsius.

Quindi, posizionare il topo in una gabbia individuale in una camera a 25 gradi Celsius contenente cibo e acqua in gel con monitoraggio fino al completo recupero. L'induzione della stenosi nell'IVC avvia una distorsione e un ristagno del flusso sanguigno con conseguente sviluppo di un trombo che è strutturalmente simile ai trombi venosi profondi osservati nell'uomo e che è facilmente visualizzabile macroscopicamente. Inoltre, in questo modello di stenosi IVC si osserva un elevato D-dimero, un prodotto della degradazione della fibrina, indicando la presenza di un processo trombotico attivo simile a quello osservato nell'uomo.

Sebbene la maggior parte degli animali da esperimento abbia prodotto trombi in questo modello, uno dei principali svantaggi è la variabilità all'interno delle dimensioni dei trombi osservata tra gli animali. Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere completata in 15 minuti se eseguita correttamente. Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della trombosi venosa per esplorare i meccanismi della TVP in un modello murino.