17 agosto 2018
Questo protocollo misura risposte gusto umano e include una breve valutazione anatomica, un test breve assaggio e un metodo di convalida utilizzando segnalato sensazione e gusto genotipo del ricevitore del soggetto.
Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave in campo medico e sensoriale sul senso del gusto di ogni persona. Il vantaggio principale di questa tecnica è la sua brevità e idoneità alla ricerca biomedica. Le implicazioni di questa tecnica si estendono alla diagnosi e al trattamento della sinusite cronica da rinoceronte perché i recettori del gusto fanno parte del sistema immunitario innato.
Dimostrerò la procedura sul nostro laboratorio, membro David e Lauren prepareranno le soluzioni di gusto. Inizia istruendo il soggetto ad aprire la bocca. Usa una luce per illuminare la cavità orale ed esamina i sette sottositi dell'area.
Qui la lingua dorsale è facilmente visibile. Usando un abbassalingua per premere la lingua, la faringe posteriore diventa visibile. Successivamente, la lateralizzazione della lingua consente l'esposizione del trigono retromolare sinistro e della mucosa vestibolare sinistra.
Qui vengono visualizzate la gengiva anteriore e la mucosa labiale. Quando la lingua del soggetto viene sollevata, la superficie ventrale della lingua diventa visibile. E questo consente l'esame del pavimento della bocca dei soggetti.
La lingua viene quindi nuovamente lateralizzata per esaminare il trigono retromolare destro e la mucosa vestibolare destra. E infine vengono visualizzati il palato duro e molle. Notare lesioni, abrasioni e masse o segni di infiammazione.
Utilizzare una fonte di luce per visualizzare la superficie dorsale della lingua e identificare la presenza o l'assenza di papille fungiformi o superficie liscia della lingua. Infine, annotare i risultati dell'esame del cavo orale prima di procedere con il test del gusto. Iniziare preparando le soluzioni gustative utilizzando un matraccio tarato per ciascuna per garantire la precisione delle concentrazioni.
Sciogliere i campioni utilizzando acqua ultra pura. Avvolgere le soluzioni sensibili alla luce con un foglio per ridurre l'esposizione alla luce. Quindi conservare le soluzioni gustative a quattro gradi Celsius.
Per identificare gli errori comuni nella preparazione della soluzione, riempire una tazza di degustazione con la vecchia soluzione e una con la nuova soluzione. Assaggia ogni soluzione per verificare che siano identiche in forza. Successivamente, etichettare i tappi delle fiale con un adesivo circolare in base all'ordine di presentazione e un codice colore.
Per abbinare le etichette delle fiale con le etichette del questionario sul gusto. Imballare i campioni inserendoli nei rispettivi corrieri. Successivamente, prepara il questionario sul gusto utilizzando una scala di categorie per valutare l'intensità del gusto e una scelta obbligata per identificare la qualità del gusto di ciascun sapore.
Infine, posiziona le etichette circolari del colore e del numero appropriati accanto al campione appropriato nel questionario sul gusto. Fornisci al soggetto la scatola del campione, una bottiglia d'acqua, una tazza vuota, una penna e un questionario sul gusto contenente le voci per 12 campioni. Spiegare la procedura di test e informare il soggetto che gli verrà chiesto di valutare sia l'intensità che la qualità di ciascun sapore.
Fai loro sapere che potrebbero non sperimentare tutte le qualità. Inizia il test chiedendo al soggetto di sciacquarsi la bocca due volte con acqua e di sputarla nella tazza fornita. Chiedi loro di versare tutto il campione uno in bocca e di tenerlo lì per cinque secondi prima di sputare la soluzione nella tazza.
Dì loro di non fare gargarismi o ingoiare la soluzione. Quindi istruisci il soggetto a cerchiare una delle 13 linee verticali corrispondenti all'intensità del campione. Su una scala da 0 a 12.
Da nessuna intensità a estremamente intensa. E scegli una sola qualità per descriverne il gusto. Quindi chiedi al soggetto di sciacquarsi la bocca con acqua due volte prima di procedere al campione successivo.
Osservare il soggetto che assaggia e valuta un campione d'acqua. Se la valutazione si discosta da nessuna intensità e nessun sapore, ripetere le istruzioni del questionario prima di consentire al test di procedere. Dopo che tutti i campioni sono stati assaggiati, rivedere il questionario finito per verificarne la completezza.
Infine, assegna un punteggio alle valutazioni di intensità su una scala da 0 a 12 dalle linee verticali cerchiate dal soggetto. E fare la media dei due valori di intensità per ogni sapore per un'analisi successiva. I risultati del test del gusto confermano l'esistenza di differenze di gusto percettive per il composto amaro, feniltiocarbamide o PTC tra soggetti raggruppati in base al genotipo del recettore TAS2R38.
Le valutazioni dell'intensità di PTC sono significativamente diverse tra i tre genotipi. La motivazione alla base di questo studio era quella di cercare di valutare o sviluppare un esame rapido del punto di servizio che potevamo fare in clinica per valutare la funzione di questo recettore che riteniamo svolga un ruolo nello sviluppo della sinusite cronica. L'idea qui è che potremmo usare questo test del gusto per prevedere quali dei nostri pazienti sono ad alto rischio di sviluppare la sinusite e, cosa più importante, quali pazienti sono buoni candidati chirurgici su cui eseguire la nostra chirurgia del seno, o quali faranno male con la nostra chirurgia del seno.
Quindi stiamo cercando di utilizzare questo test del gusto per prognosticare la malattia sinale-nasale del paziente. Una volta che abbiamo superato tutti i test del gusto, lo abbiamo confermato genotipizzando i pazienti. E come si può vedere nella figura tre, per la maggior parte il genotipo del paziente segue lo schema del suo fenotipo.
Ciò significa che più amaro assaggiavano, tendevano ad essere dominanti per questo recettore. Tuttavia, ci sono alcuni valori anomali. Dimostrando che ci sono omozigoti funzionali, PAV/PAV che hanno detto di non aver assaggiato PTC e il rovescio della medaglia c'erano alcuni individui AVI / AVI non funzionali che hanno assaggiato PTC con amarezza.
Ciò significa che, qualunque sia il test del gusto che sviluppiamo, se ci sono pazienti che non soddisfano le nostre aspettative, probabilmente vogliamo confermare il test del gusto genotipizzandoli per il T2R38. Una volta padroneggiato, l'esame e il test del gusto possono essere eseguiti in meno di 30 minuti. Dopo aver visto questo video dovresti aver capito come eseguire un esame orale, annotare le prove di malattia ed eseguire un breve test del gusto.
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Questo protocollo misura le risposte gustative umane e include una breve valutazione anatomica, un breve test del gusto e un metodo di validazione utilizzando la sensazione riportata dal soggetto e il genotipo del recettore del gusto. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo medico e sensoriale sul senso del gusto di ogni persona.
This method enables rapid, point-of-care assessment of taste receptor function, which serves as a proxy for tissue sensitivity in biomedical research. By linking subjective taste perception to objective genotype data, it supports mechanistic de-risking in target validation for sensory and immune-related pathways. The brevity and reproducibility of the test facilitate integration into discovery workflows where taste receptor modulation is a therapeutic hypothesis.
The method fits within early discovery to validate taste receptor targets, supports screening readiness via standardized tastant delivery, and informs translational decisions through genotype-phenotype correlation.