Name: Esame gustativo: Un Test breve e convalidato (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-17T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 10 s
Description: Scopri un metodo rapido per misurare le risposte gustative umane con esame anatomico e test di validazione genotipica. Questa tecnica breve supporta la ricerca biomedica e le applicazioni diagnostiche in campo sensoriale.

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Premi dal National Institutes of Health supportato questa ricerca (R01DC013588 a NAC, R21DC013886 NAC e DRR e supplemento di NIDCD amministrativa ricerca per promuovere emersione del clinico-scienziati nella ricerca Chemosensory a JED). Abbiamo raccolto dati di genotipo da attrezzatura acquistata in parte con fondi NIH da OD018125.

L'Università di Pennsylvania istituzionale Review board ha approvato questo protocollo. Abbiamo escluso soggetti se erano di età inferiore a 18 anni o erano incinte.
1. cavità valutazione: Valutazione di malattia e Papilla identificazione
<ol><li>Istruire il soggetto ad aprire la bocca.</li>
	<li>
Utilizzando una sorgente di luce come una penna illuminante o un proiettore, illuminare la cavità orale ed esaminare i sette siti secondari della zona (lingua, pavimento della bocca, mucosa orale, mucosa labial, gengiva, palato duro e trigono retromolare).
	<ol>
<li>Visualizzare la superficie dorsale della linguetta. Chiedere al soggetto di sollevare la linguetta ed esaminare la superficie ventrale della lingua e pavimento della bocca, facendo attenzione ad estendere l'esame posteriormente ai molari.</li>
		<li>Utilizzando un abbassalingua, lateralize guancia del soggetto per visualizzare la mucosa orale, come pure la gengiva laterale bilateralmente che circondano i denti superiori e inferiori.</li>
		<li>Estendere l'esame anteriormente sollevando le labbra superiori e inferiori per visualizzare le superfici della gengiva anteriore e della mucosa labiale.</li>
		<li>Infine, visualizzare il palato duro e trigono retromolare.</li>
		<li>Nota le lesioni, abrasioni e masse o segni di infiammazione.</li>
		<li>Ancora una volta, chiedere al soggetto di aprire la bocca ed estendere la lingua.</li>
		<li>Utilizzare una fonte di luce per visualizzare la superficie dorsale della linguetta.</li>
		<li>Identificare la presenza o l'assenza di FP, per esempio, una superficie di lingua liscia</li>
	</ol>
</li>
	<li>Notare i risultati dell'esame cavità orale prima di procedere con il test del gusto. Se gli investigatori conducono questo test di gusto in un contesto medico, i risultati inattesi dovrebbero richiamare ulteriore work-up.</li>
</ol>2. prova gusto psico-fisico
Nota: Le risorse e le descrizioni per il gusto di psicofisica test che seguono sono anche disponibili dalla pagina web seguente: https://osf.io/hn87s/.
<ol><li>
Preparazione tastant
	<ol>
<li>Preparare soluzioni come indicato di seguito. Rendere ogni soluzione utilizzando un matraccio per garantire precisione di concentrazioni da ± 0,0002 M. Dissolve campioni utilizzando acqua ultrapura. Adattare la scelta dei composti al raggiungimento degli obiettivi di ricerca. I composti inclusi in questa sezione sono pensati come un esempio.<ol>
<li>Denatonium benzoato (amaro): preparare una soluzione stock di 4,99 x 10-3 M denatonium benzoato sciogliendo 2,228 g di denatonium benzoato in 1 L di acqua. Aggiungere 180 µ l di questa soluzione in un matraccio tarato da 500 mL. Aggiungere acqua per portare il volume a 500 mL, producendo una soluzione con una concentrazione finale di 1,8 µM.</li>
			<li>PTC (amara): introdurre 0,0135 g di PTC in un matraccio tarato da 500 mL. Aggiungere acqua per portare il volume a 500 mL. PTC è difficile da sciogliere, quindi introdurre un ancoretta nel matraccio e riscaldare la soluzione a 70 ° C su una piastra calda. Utilizzare la barra per l'agitazione per miscelare la soluzione fino a quando tutti i soluto ha dissolto (~ 15 min). Questo produce una soluzione con una concentrazione finale di 180 µM.</li>
			<li>Chinino (amaro): introdurre 0,011 g di chinino HCl diidrato in un matraccio tarato da 500 mL. Aggiungere acqua per portare il volume a 500 mL, producendo una soluzione con una concentrazione finale di 56 µM.</li>
			<li>Cloruro di sodio (salato): posto 7,5 g di cloruro di sodio in un matraccio tarato da 500 mL. Aggiungere acqua per portare il volume a 500 mL, producendo una soluzione con una concentrazione finale di 0,25 M.</li>
			<li>Saccarosio (dolce): mettere 60 g di saccarosio in un matraccio tarato da 500 mL. Aggiungere acqua per portare il volume a 500 mL, producendo una soluzione con una concentrazione finale di 0,35 M.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Soluzioni di gusto Store a 4 ° C. Alcuni comunemente utilizzati composti di gusto sono sensibili alla luce, e gli investigatori dovrebbero avvolgerli in un foglio o altri materiali per ridurre la loro esposizione alla luce.</li>
		<li>Per identificare gli errori comuni nella preparazione di soluzione, riempire una tazza di degustazione con la vecchia soluzione e uno con la nuova soluzione. Gustare ogni soluzione per verificare che sono identici per forza.</li>
		<li>Include l'acqua come una soluzione di controllo, presentata in prima posizione per verificare soggetti capire la procedura di collaudo. Presenti soggetti con ogni tastant e il controllo tastant due volte, avendo cura di evitare che presenta lo stesso tastant consecutivamente. Ad esempio, per testare cinque tastants unico, presentano dodici campioni nel questionario (Vedi 2.2): cinque tastants ed acqua, ciascuno presentato due volte. Aliquota 5 mL di acqua nei flaconi di scintillazione di vetro individuali. Etichettare i tappi del flaconcino con un adesivo blu scuro recante il numero 1.</li>
		<li>Ripetere questo processo per ogni tastant. Etichetta flaconcino tappi con un adesivo circolare secondo l'ordine di presentazione e il codice colore, esempio descritto di seguito; corrispondere le etichette del flaconcino con le etichette sul questionario di gusto (Vedi 2.2). Acqua (blu scuro) Chinina (blu chiaro) NaCl (verde) PTC (giallo) Saccarosio (arancione) Denatonium benzoato (rosso) NaCl (blu scuro) Denatonium benzoato (blu chiaro) Acqua (verde) Chinina (giallo) Saccarosio (arancione) PTC (rosso)</li>
		<li>Pacchetto campioni mettendoli in due scatole, campioni 1 – 6 e 7 – 12 nelle caselle denominate rispettivamente "scatola A" e "casella B," (Figura 1); altre strategie di packaging sono possibili.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56705/56705fig1v2.jpg"> Figura 1: gusto kit. Soggetti utilizzano il kit per intensità di gusto di tasso e la qualità dei vari tastants color-coded. Box A contiene campioni 1 – 6, 7 – 12 casella B. <a href="/files/ftp_upload/56705/56705fig1v2large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<ol start="2"><li>
Questionario di gusto
	<ol>
<li>Preparare il questionario di gusto utilizzando una scala di categoria per valutare l'intensità di gusto e una scelta forzata per identificare la qualità di gusto di ogni tastant (Figura 2).</li>
		<li>Posizionare le etichette circolari del colore appropriato e il numero accanto al campione appropriato del questionario di gusto (Vedi 2.1.6).</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56705/56705fig2.jpg"> Figura 2: voce del questionario, che comprende una scala di categoria per voto di intensità di gusto e costretto la risposta scelta per qualità tastant. Il questionario di gusto sarà compresa una voce per ciascuna del color-coded tastants testato. <a href="/files/ftp_upload/56705/56705fig2large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
<ol start="3"><li>
Somministrazione di Test di gusto
	<ol>
<li>Fornire soggetti con scatola A, B, una bottiglia di acqua, tazza vuota, penna e carta e penna gusto questionario contenente voci per 12 campioni. Utilizzare la stessa marca di acqua minerale per tutta la durata di qualsiasi dato studio. Come alternativa a un questionario cartaceo, porta il materiale nel software sondaggio online e somministrato tramite tablet o desktop/Laptop. Un modello di esempio è disponibile presso https://osf.io/hn87s/.</li>
		<li>Indicare i soggetti che verrà chiesto di votare l'intensità e la qualità (ad es., salato, acido, amaro, dolce o nessun sapore) di ogni tastant. Inoltre, informare soggetti che non possono verificarsi tutte le qualità.</li>
		<li>Spiegare la procedura di collaudo, come segue: sciacquare la bocca due volte con acqua e sputare fuori in Coppa fornito. Versare tutto il campione 1 nella tua bocca e tenerlo lì per 5 secondi prima di sputare la soluzione nella tazza. Fare gargarismi o inghiottire la soluzione. Cerchio uno delle 13 linee verticali corrispondenti con intensità dell'esempio, su una scala da 0 a 12, da "nessuna intensità a tutti" a "estremamente intensa" e scegliere una qualità di unica per descrivere il gusto. In seguito, sciacquare la bocca con acqua due volte prima di procedere con l'esempio successivo.</li>
		<li>Osservare il soggetto di degustazione e valutazione del campione 1 (acqua). La deviazione di voto dalla "nessuna intensità a tutti" e "nessun sapore," ribadire le istruzioni questionario prima di consentire la prova procedere.</li>
		<li>Rivedere il questionario finito per completezza.</li>
		<li>Punteggio ottenuto valutazioni dell'intensità su una scala da 0 a 12 dalle linee verticali che i soggetti cerchiati. Media le due classificazioni di intensità per ogni tastant; Questo valore verrà utilizzato per l'analisi.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. genotipo
<ol><li>Raccogliere saliva da ciascun soggetto utilizzando un kit di raccolta del DNA della saliva.</li>
	<li>Purificare il DNA di genomic dal campione seguendo le istruzioni del produttore.</li>
	<li>Determinare il genotipo TAS2R38 utilizzando SNP genotyping saggi (rs713598, rs1726866, rs10246939)40.</li>
	<li>Determinare il genotipo di TAS2R19 utilizzando SNP genotyping assays (rs10772420)36.</li>
</ol>4. genotipo-fenotipo convalida
<ol><li>Rivedere i dati di controllo disponibili in pool oltre 800 soggetti genotipizzati per TAS2R38 (rs713598, rs1726866, rs10246939) e TAS2R19 (rs10772420) presso la seguente pagina web: https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/.</li>
	<li>Base al genotipo TAS2R38 di un soggetto, confrontare la propria risposta psicofisica gusto per l'amaro PTC composto con le norme per gli individui dello stesso genotipo. Le risposte devono corrispondere; Tuttavia, in rari casi, TAS2R38 genotipo non perfettamente predire PTC risultati sensoriali35.</li>
	<li>Dovrebbero risposte mostrano significativa divergenza, confrontare la risposta di gusto del soggetto per il chinino con le norme per gli individui dello stesso genotipo TAS2R19 . Risposte per intensità di chinino e genotipo devono corrispondere a36. Se tutti i risultati di gusto non corrispondono con il genotipo, è possibile che il soggetto (a) non comprende l'attività (b) è fornire valutazioni spurie o fingersi malato o (c) c'è stato un errore di raccolta dati da parte dell'investigatore.</li>
	<li>Identificazione degli outlier punto di dati e forse li esclude dall'analisi (Figura 3). Corrispondenza di risultati sensoriali con genotipizzazione obiettiva convalida l'affidabilità delle procedure di test psico-fisica.</li>
</ol>

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</ol>

NAC e DRR sono co-inventori un brevetto in esame (terapie e diagnosi per infezione respiratoria 61/697.652, WO2013112865).

L'importanza di questo metodo è che utilizza un approccio multidisciplinare con caratteristiche da medicina (l'esame orale), psicologia sperimentale (la prova del gusto) e genetica (un passo di convalida). Informazioni di gusto sono probabilità di sviluppare come strumento diagnostico e prognostico perché gusto fornisce una finestra nella funzione delle proteine altrove nel corpo. Da un punto di vista di psicologia sperimentale, l'aggiunta di un semplice esame può identificare i soggetti che non sono appropriati per lo s...

Misure di percezione gustativa umana possono essere sia parte delle cure mediche e un obiettivo della ricerca biomedica, ma gusto ha ricevuto scarsa attenzione rispetto con udito e visione (tabella 1). Dal punto di vista medico, quando i medici valutano i pazienti lamentano della perdita di gusto, nella maggior parte dei casi la perdita effettiva è di odore1, che ha portato al licenziamento di perdita del gusto come un reclamo di presentazione raro e spesso non valido. Distorsioni del gusto (disgeusia) sono più comuni e spesso derivano dagli effetti secondari dei farmaci o del nervo periferico lesioni2,3, ma nessuna forma è un trattamento efficace (diverso da quello di arresto del farmaco). I clinici hanno ignorato anche perdita del gusto perché fino ad ora ha avuto poco valore diagnostico o prognostico in proprio. Tuttavia, anche se la misura del gusto è stato una zona isolata, può ora entrando medicina della corrente principale con la rinascita di un apprezzamento storico che gusto può essere un attrezzo diagnostico o prognostico4,5. Per esempio, percezione di amarezza può predire la funzione immune6 o la volontà di un paziente di prendere il farmaco7. Tuttavia, i ricercatori biomedici hanno in gran parte trascurato gusto. Questa disattenzione può, in parte, riflettere il fatto che i primi progressi nella comprensione di questo sistema sensoriale ha le sue radici in psicologia sperimentale8, un campo con cui quelli in medicina può essere relativamente sconosciuti. Inoltre, rinnovato interesse nel gusto ha inaugurato gusto standardizzato metodi9 che si basano sulle precedenti metodi10, che pur completa sono lunghi e inadeguato per regolazioni cliniche. Infine, fiducia nelle misure di gusto può essere debole perché soggetti relazione sulla loro esperienza e convalida delle loro osservazioni finora è mancata. La nostra speranza è che una semplice misura che gli investigatori o i clinici possono facilmente amministrare acquisterà popolarità con entrambi i costituenti. Qui descriviamo un protocollo di esame di gusto semplice che ha tre parti: una valutazione della cavità orale, la prova del gusto e un passo di convalida utilizzando genotipo innato. In primo luogo, forniamo il contesto biologico per queste procedure, che si fondono pratiche semplici in medicina, misure sensoriali dalla psicologia sperimentale e la convalida delle risposte utilizzando il genotipo e la genetica.
Percezione del gusto inizia in bocca, quindi un esame gustativo efficace deve includere una breve valutazione clinica per malattie orali ovvie, arrossamento, gonfiore e altri lo scolorimento. Cavità orale contiene sette siti secondari: la lingua, gengiva, pavimento della bocca, mucosa orale, mucosa labiale, palato duro e il trigono retromolare. Studi precedenti di gusto umano focalizzata su partecipanti in buona salute o quelli con malattie ben definite, ma come prova gusto diventa routine in esami medici, è importante registrare le condizioni della cavità orale come parte della procedura.
La lingua stessa è una struttura muscolare racchiusa nella mucosa; che punteggiano la superficie dorsale è papille, le piccole strutture rialzate che danno la lingua sua texture uniche e contengono cellule del ricevitore di gusto. Classifichiamo le papille dalla loro forma: fungiformi, filiformi, foliate e circumvallate. Papille fungiformi (FP) sono anterolaterally trova sulla lingua e rotondi, con una forma a fungo11. Gli investigatori hanno pubblicato diversi metodi utili per quantificare FP e rivolgiamo ai lettori di queste fonti per misurazione protocolli12,13,14,15,16. Papille foliate, a forma di come le pagine di un libro (folia), si trovano esclusivamente sul posteriore laterale della linguetta superficie11. Papille circumvallate, trovate i terminalis solco della base lingua, sono grandi strutture a forma di cupola, circondati da pareti mucose (Latino circum, "surround", + vallum, "parete")11. La maggior parte delle papille numerose, filiforme, sono lunghe e sottili e non contengono recettori del gusto.
La gente differisce in anatomia di lingua. Mentre le fonti di questa variazione anatomica sono sconosciute, è determinato in parte dalla variazione genetica innata, con gli investigatori reporting 31% concordanza di anatomia di lingua tra dizigoti gemelli e 60% concordanza tra gemelli monozygotic17. Densità papillare si differenzia anche tra la gente, e anche se raro, almeno una malattia genetica (Disautonomia familiare) si traduce in un'assenza congenita di gusto papille18,19,20. Così, prima di eseguire test psico-fisico, è utile confermare la presenza di FP come parte della valutazione di breve e di notare la dimensione relativa e il colore della linguetta e prova della malattia orale.
Le papille del gusto contengono il sensoriali cellule che se stimolati avviano gusto sensazione. Gli esseri umani sono in grado di rilevare almeno cinque classi di gusto: salato, acido, amaro, dolce e umami. Mentre salato, dolce e umami gusti segnalare la presenza di fonti di cibo prezioso contenente cloruro di sodio, glucosio e aminoacidi, rispettivamente, amarezza e acidità segnalano la presenza di potenziali tossine e acidi dalla decomposizione batterica di cibo, rispettivamente e indurre il comportamento avversivo21. I gusti salati e acidi transduced attraverso l'attivazione di canali ionici trovato in alcuni tipi di cellule gustative, anche se la comprensione della trasduzione del sale è in continua evoluzione e può richiedere tipo I le celle anche22,23. Dolce, amaro e umami derivano dall'attivazione di recettori accoppiati a G-proteine sulle cellule di tipo II gusto, ognuno in sintonia con un gusto particolare. Eterodimeri di subunità di tre particolari recettori trasducono dolce e umami mentre composti amari attivano un gruppo di 25 diversi recettori amaro24. Questi recettori amari possono rispondere a molteplici composti amari, e un singolo composto amaro stimola spesso più di un recettore25. Nonostante la recente espansione delle conoscenze sulle basi molecolari del gusto, nuovi percorsi26 e nuove scoperte oltre le qualità di cinque gusto tradizionali (ad es., calcio27 o acido grasso28 percezione) possono ci attendono.
Ci sono almeno due aspetti sorprendenti delle famiglie dei ricevitori di gusto: geni che codificano per questi recettori possono differiscono notevolmente nella sequenza del DNA e quindi funzionare tra le persone, e molti tessuti del corpo esprimere questi geni21,29 , 30 , 31. questi siti extraorali comprendono il cervello, tiroide, superiore e inferiore delle vie respiratorie e del tratto gastrointestinale, tra molti altri21,29,30,31. Mentre i recettori del gusto a queste posizioni non partecipano nella percezione del gusto in senso tradizionale, probabilmente percepiscono l'ambiente chimico locale29,32. Ad esempio, l'epitelio ciliato delle vie respiratorie superiore esprime il recettore amaro T2R38 (amaro gusto recettore 38), che risponde ai composti chimici prodotti da batteri e influenza la risposta immunitaria innata32, come aumentando la clearance mucociliare e livelli di peptidi anti-microbica e l'ossido di azoto. Ciò che trova ha implicazioni mediche per la rinosinusite cronica, una malattia di infezione batterica cronica e infiammazione delle vie respiratorie superiori e seni paranasali.
Di particolare rilevanza per il gusto esame che descriviamo qui è che il recettore del sapore amaro T2R38, codificato dal gene TAS2R38 , esibisce la variabilità genetica e la sensibilità di gusto quindi variabile. Differenze percettive per l'amaro composto Feniltiocarbammide (PTC) furono descritti per la prima volta dal chimico Arthur Fox33; più tardi questo composto è stato identificato come un agonista del recettore T2R3834. Differenze individuali derivano dalla sequenza del DNA del gene TAS2R38 , che ha tre polimorfismi a singolo nucleotide, ogni cedimento sostituzioni dell'amminoacido (A49P, A262V e I296V; R: alanina, p: prolina, v: valina, isoleucina I:). Due aplotipi comuni risultato, Pad e AVI, con Pad/Pad individui altamente sensibile a PTC ("assaggiatori"), essendo relativamente insensibile ("non-assaggiatori") gli individui AVI/AVI ed eterozigoti AVI/Pad essere più variabile nella loro sensibilità 35. ci sono altri esempi di variazioni genetiche che influenzano la percezione di amaro, per esempio, del ricevitore di gusto T2R19, codificata dal gene TAS2R19 , allo stesso modo esibisce variabilità genetica e differenti sensibilità di gusto per il composto amaro chinino36. Allo stesso modo, la variazione TAS2R31 influenza l'amarezza percepita di uno dei dolcificanti ad alta potenza37,38,39.
Qui descriviamo un metodo rapido per caratterizzare il senso di un paziente del gusto che si basa su protocolli ad alto rendimento in medicina clinica, la psicologia sperimentale e la genetica.

<table><tbody><tr><td>Torcia diagnostica monouso</td><td>Primacare</td><td>DL-9223</td><td></td></tr><tr><td>UltraLite Pro faro</td><td>Integra LifeSciences</td><td>AX2100BIF</td><td></td></tr><tr><td>Millipore Sistema di purificazione dell'acqua Q-Gard 2</td><td>EMB Millipore</td><td>QGARD00D2</td><td></td></tr><tr><td>Denatonium benzoate&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D5765</td><td></td></tr><tr><td>Feniltiocarbamide</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P7629</td><td></td></tr><tr><td>Chinino cloridrato diidrato</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Q1125</td><td></td></tr><tr><td>Cloruro di sodio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S1679</td><td></td></tr><tr><td>Saccarosio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S0389</td><td></td></tr><tr><td>Fiale di scintillazione in vetro</td><td>Thomas Scientific</td><td>1230L59</td><td>Come il catalogo Wheaton n. 986580</td></tr><tr><td>Oragene Discover OGR-500 Kit di raccolta del DNA</td><td>DNA Genotek</td><td>OGR-500</td><td></td></tr><tr><td>prepIT L2P Reagenti</td><td>del protocollo DNA Genotek</td><td>PT-L2P-5</td><td></td></tr><tr><td>rs713598 TaqMan Saggio di genotipizzazione SNP</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___8876467_10</td><td></td></tr><tr><td>rs1726866 TaqMan Saggio di genotipizzazione SNP</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___9506827_10</td><td></td></tr><tr><td>rs10246939 TaqMan Saggio di genotipizzazione SNP</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___9506826_10</td><td></td></tr><tr><td>rs10772420 TaqMan Saggio di genotipizzazione SNP</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>C___1317426_10</td><td></td></tr></tbody></table>

esame gustativo: un test breve e convalidato

Taste Exam: A Brief and Validated Test

L'importanza emergente del gusto nella medicina e nella ricerca biomedica e nuove conoscenze sulle sue basi genetiche, ci ha spinto a integrare i metodi classici di degustazione in due modi. Innanzitutto, spieghiamo come fare una breve valutazione della bocca, compresa la lingua, per garantire che le papille del gusto sono presenti e notare la prova della malattia in questione. In secondo luogo, vogliamo disegnare sulla genetica per convalidare i dati di test di gusto da rapporti di confronto dei genotipi di recettore innato e amarezza percepita intensità. Discordanza tra misure obiettive del genotipo e rapporti soggettivi di esperienza di gusto può identificare errori di raccolta dati, soggetti distratti o coloro che non hanno capito o seguite le istruzioni. La nostra aspettativa è che prove di assaggio veloce e valido possono convincere i ricercatori e i clinici per valutare il gusto regolarmente, rendendo la prova gusto comune come test per la vista e dell'udito. Infine, perché molti tessuti del corpo esprimono recettori del gusto, sapore risposte possono fornire un proxy per la sensibilità del tessuto altrove nel corpo e, quindi, servire come un rapido, point-of-care test per diagnosi di guida e uno strumento di ricerca per la valutazione del ricevitore di gusto funzione della proteina.

I risultati del test di gusto hanno messo in comune per tutti i soggetti valutati (n = 840) e si sono presentati dopo la segregazione dal genotipo. L'insieme completo di dati è accessibile a https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/ e può essere esaminata per valutare ogni tastant e per genotipi TAS2R38 e TAS2R19 . Risultati confermano l'esistenza di differenze di gusto percettivo per PTC fra gli oggetti raggruppati per genotipo del ricevitore di TAS2R38 (<st...

Questo protocollo misura risposte gusto umano e include una breve valutazione anatomica, un test breve assaggio e un metodo di convalida utilizzando segnalato sensazione e gusto genotipo del ricevitore del soggetto.

Esame gustativo: Un Test breve e convalidato

The emerging importance of taste in medicine and biomedical research, and new knowledge about its genetic underpinnings, has motivated us to supplement ...

Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave in campo medico e sensoriale sul senso del gusto di ogni persona. Il vantaggio principale di questa tecnica è la sua brevità e idoneità alla ricerca biomedica. Le implicazioni di questa tecnica si estendono alla diagnosi e al trattamento della sinusite cronica da rinoceronte perché i recettori del gusto fanno parte del sistema immunitario innato.Dimostrerò la procedura sul nostro laboratorio, membro David e Lauren prepareranno le soluzioni di gusto. Inizia istruendo il soggetto ad aprire la bocca. Usa una luce per illuminare la cavità orale ed esamina i sette sottositi dell'area.Qui la lingua dorsale è facilmente visibile. Usando un abbassalingua per premere la lingua, la faringe posteriore diventa visibile. Successivamente, la lateralizzazione della lingua consente l'esposizione del trigono retromolare sinistro e della mucosa vestibolare sinistra.Qui vengono visualizzate la gengiva anteriore e la mucosa labiale. Quando la lingua del soggetto viene sollevata, la superficie ventrale della lingua diventa visibile. E questo consente l'esame del pavimento della bocca dei soggetti.La lingua viene quindi nuovamente lateralizzata per esaminare il trigono retromolare destro e la mucosa vestibolare destra. E infine vengono visualizzati il palato duro e molle. Notare lesioni, abrasioni e masse o segni di infiammazione.Utilizzare una fonte di luce per visualizzare la superficie dorsale della lingua e identificare la presenza o l'assenza di papille fungiformi o superficie liscia della lingua. Infine, annotare i risultati dell'esame del cavo orale prima di procedere con il test del gusto. Iniziare preparando le soluzioni gustative utilizzando un matraccio tarato per ciascuna per garantire la precisione delle concentrazioni.Sciogliere i campioni utilizzando acqua ultra pura. Avvolgere le soluzioni sensibili alla luce con un foglio per ridurre l'esposizione alla luce. Quindi conservare le soluzioni gustative a quattro gradi Celsius.Per identificare gli errori comuni nella preparazione della soluzione, riempire una tazza di degustazione con la vecchia soluzione e una con la nuova soluzione. Assaggia ogni soluzione per verificare che siano identiche in forza. Successivamente, etichettare i tappi delle fiale con un adesivo circolare in base all'ordine di presentazione e un codice colore.Per abbinare le etichette delle fiale con le etichette del questionario sul gusto. Imballare i campioni inserendoli nei rispettivi corrieri. Successivamente, prepara il questionario sul gusto utilizzando una scala di categorie per valutare l'intensità del gusto e una scelta obbligata per identificare la qualità del gusto di ciascun sapore.Infine, posiziona le etichette circolari del colore e del numero appropriati accanto al campione appropriato nel questionario sul gusto. Fornisci al soggetto la scatola del campione, una bottiglia d'acqua, una tazza vuota, una penna e un questionario sul gusto contenente le voci per 12 campioni. Spiegare la procedura di test e informare il soggetto che gli verrà chiesto di valutare sia l'intensità che la qualità di ciascun sapore.Fai loro sapere che potrebbero non sperimentare tutte le qualità. Inizia il test chiedendo al soggetto di sciacquarsi la bocca due volte con acqua e di sputarla nella tazza fornita. Chiedi loro di versare tutto il campione uno in bocca e di tenerlo lì per cinque secondi prima di sputare la soluzione nella tazza.Dì loro di non fare gargarismi o ingoiare la soluzione. Quindi istruisci il soggetto a cerchiare una delle 13 linee verticali corrispondenti all'intensità del campione. Su una scala da 0 a 12.Da nessuna intensità a estremamente intensa. E scegli una sola qualità per descriverne il gusto. Quindi chiedi al soggetto di sciacquarsi la bocca con acqua due volte prima di procedere al campione successivo.Osservare il soggetto che assaggia e valuta un campione d'acqua. Se la valutazione si discosta da nessuna intensità e nessun sapore, ripetere le istruzioni del questionario prima di consentire al test di procedere. Dopo che tutti i campioni sono stati assaggiati, rivedere il questionario finito per verificarne la completezza.Infine, assegna un punteggio alle valutazioni di intensità su una scala da 0 a 12 dalle linee verticali cerchiate dal soggetto. E fare la media dei due valori di intensità per ogni sapore per un'analisi successiva. I risultati del test del gusto confermano l'esistenza di differenze di gusto percettive per il composto amaro, feniltiocarbamide o PTC tra soggetti raggruppati in base al genotipo del recettore TAS2R38.Le valutazioni dell'intensità di PTC sono significativamente diverse tra i tre genotipi. La motivazione alla base di questo studio era quella di cercare di valutare o sviluppare un esame rapido del punto di servizio che potevamo fare in clinica per valutare la funzione di questo recettore che riteniamo svolga un ruolo nello sviluppo della sinusite cronica. L'idea qui è che potremmo usare questo test del gusto per prevedere quali dei nostri pazienti sono ad alto rischio di sviluppare la sinusite e, cosa più importante, quali pazienti sono buoni candidati chirurgici su cui eseguire la nostra chirurgia del seno, o quali faranno male con la nostra chirurgia del seno.Quindi stiamo cercando di utilizzare questo test del gusto per prognosticare la malattia sinale-nasale del paziente. Una volta che abbiamo superato tutti i test del gusto, lo abbiamo confermato genotipizzando i pazienti. E come si può vedere nella figura tre, per la maggior parte il genotipo del paziente segue lo schema del suo fenotipo.Ciò significa che più amaro assaggiavano, tendevano ad essere dominanti per questo recettore. Tuttavia, ci sono alcuni valori anomali. Dimostrando che ci sono omozigoti funzionali, PAV/PAV che hanno detto di non aver assaggiato PTC e il rovescio della medaglia c'erano alcuni individui AVI / AVI non funzionali che hanno assaggiato PTC con amarezza.Ciò significa che, qualunque sia il test del gusto che sviluppiamo, se ci sono pazienti che non soddisfano le nostre aspettative, probabilmente vogliamo confermare il test del gusto genotipizzandoli per il T2R38. Una volta padroneggiato, l'esame e il test del gusto possono essere eseguiti in meno di 30 minuti. Dopo aver visto questo video dovresti aver capito come eseguire un esame orale, annotare le prove di malattia ed eseguire un breve test del gusto.

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