Tecniche chirurgiche per la disposizione del catetere e 5/6 di nefrectomia nei modelli murini di dialisi peritoneale

Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della dialisi peritoneale sulle alterazioni peritoneali o sistemiche in risposta all'esposizione ai liquidi in condizioni uremiche o non uremiche. I principali vantaggi di questa tecnica sono che grandi quantità di liquido possono essere iniettate per via intraperitoneale per un lungo periodo di trattamento e che consente l'uso di animali geneticamente modificati. Le implicazioni di questa tecnica si estendono alla terapia e alla diagnostica del deterioramento peritoneale strutturale e funzionale, in quanto facilita i potenziali test strategici terapeutici e la valutazione dei biomarcatori.

Abbiamo avuto l'idea di questo metodo quando abbiamo anticipato la necessità di utilizzare topi geneticamente modificati per avviare i segnali molecolari coinvolti nel danno peritoneale. Per il posizionamento del catetere, dopo aver rasato i fianchi e la schiena destri di ciascun animale, confermare la mancanza di risposta al pizzicamento delle dita dei piedi e applicare un unguento sugli occhi dell'animale. Quindi, posizionare il primo animale sul fianco sinistro sul tavolo chirurgico e disinfettare la pelle esposta con una soluzione di clorexidina gluconato all'1%.

Usa le forbici smussate per fare un'incisione cutanea di 0,5 centimetri sul fianco destro del corpo. Quindi, separare accuratamente la pelle dallo strato muscolare adiacente fino a quando la pelle che copre l'intera schiena dell'animale è ben separata. Praticare un'incisione di un millimetro di diametro nello strato muscolare attraverso l'incisione cutanea e inserire la punta del catetere e il primo anello di plastica nell'incisione muscolare.

Sutura strettamente la parete peritoneale attorno al catetere con la sutura non assorbibile 5-0 o 6-0, con un anello di plastica all'interno della cavità peritoneale e l'altro tra il muscolo e la pelle. Le suture devono essere preparate prima di eseguire l'incisione e il muscolo non deve essere rilasciato fino all'inserimento del catetere. In caso contrario, poiché l'incisione è molto piccola, potrebbe essere difficile ritrovarla.

Inserire la porta di accesso nello spazio sottocutaneo verso la coda del topo e chiudere la ferita con una seconda sutura. Quindi, rimetti l'animale nella sua gabbia dopo la completa decubito sternale. Da quattro a sette giorni dopo, per iniziare il trattamento di dialisi peritoneale, caricare prima un siringo con due millilitri di liquido per dialisi peritoneale e disinfettare la pelle che circonda la porta con una soluzione di clorexidina gluconato all'1%.

Quindi usa una mano per trattenere l'animale per la coda e la porta di accesso e inietta il fluido nella porta con l'altra mano usando un ago smussato. Per una nefrectomia 5/6 e il posizionamento del catetere, dopo aver preparato gli animali per l'intervento chirurgico, come dimostrato, praticare un'incisione cutanea di 0,5 centimetri sul lato sinistro dell'animale vicino alla parte inferiore delle costole. Aprire una piccola incisione nel muscolo per estrarre il rene sinistro dal peritoneo e rimuovere la capsula e la ghiandola surrenale.

Utilizzare un cauterizzatore per bruciare e tagliare le estremità del rene e riportare il rene nella cavità peritoneale. Quindi, chiudere le ferite muscolari e cutanee con suture insolubili 5-0 o 6-0 e riportare l'animale nella sua gabbia quando si è completamente ripreso. Il giorno successivo, praticare un'incisione cutanea di 0,5 centimetri sul lato destro dell'animale e separare la pelle sul retro dell'animale dal muscolo, come dimostrato.

Praticare un'incisione da 0,3 a 0,4 centimetri nel muscolo ed estrarre il rene destro dalla cavità peritoneale. Rimuovere la capsula e la ghiandola surrenale e utilizzare una sutura 5-0 o 6-0 non assorbibile per legare la vena renale, l'arteria e l'uretere. Ora rimuovete completamente il rene e inserite il catetere in modo che il muscolo si mantenga tra i due anelli di plastica, come dimostrato, prima di chiudere la ferita muscolare.

Introdurre la porta di accesso nello spazio sottocutaneo e chiudere la pelle, come dimostrato. Quindi riportare l'animale nella sua gabbia con monitoraggio fino al completo recupero e lasciare che l'animale si riprenda per almeno 10 giorni prima di somministrare il fluido iperosmotico, come dimostrato. I tessuti peritoneali periali di topo, ottenuti dall'area più distante del catetere, dimostrano un aumento dello spessore e del reclutamento cellulare durante la dialisi che è ulteriormente aggravato negli animali nefrectomizzati.

Le cellule epiteliali del timo presentano anche una morfologia alterata a causa della degradazione dell'unione intercellulare indotta dalla dialisi peritoneale. I campioni di siero di topi nefrectomizzati indicano che una nefrectomia 5/6 induce uno stato uremico, aumentando i livelli di azoto ureico durante il corso dell'esperimento, rispetto al basale. Inoltre, quando i reni sono completamente funzionali, i livelli di azoto ureico rimangono simili allo stato basale, anche nei topi esposti al liquido di dialisi peritoneale.

Queste tecniche possono essere completate in cinque-sette minuti. Senza nefrectomia, da 15 a 20 minuti. Per la cauterizzazione del rene sinistro, da 20 a 25 minuti.

Per la corretta rimozione del rene e il posizionamento del catetere, se la sua metodologia viene eseguita correttamente. Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della dialisi peritoneale per esplorare le opzioni terapeutiche per la conservazione peritoneale nei pazienti renali sottoposti a trattamento di dialisi peritoneale.