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Quantificazione assoluta dei livelli di MicroRNA del Plasma nella scimmia cynomolgus, mediante tr...
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JoVE Journal Biology
Absolute Quantification of Plasma MicroRNA Levels in Cynomolgus Monkeys, Using Quantitative Real-time Reverse Transcription PCR

Quantificazione assoluta dei livelli di MicroRNA del Plasma nella scimmia cynomolgus, mediante trascrizione d'inversione quantitativa Real-Time PCR

Full Text
12,012 Views
10:23 min
February 12, 2018

DOI: 10.3791/56850-v

Takuma Iguchi1, Noriyo Niino1, Satoshi Tamai1, Ken Sakurai1, Kazuhiko Mori1

1Medicinal Safety Research Laboratories,Daiichi Sankyo Co., Ltd.

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Questo rapporto descrive un protocollo per misurare i livelli assoluti di miRNA al plasma, usando trascrizione d'inversione quantitativa Real-Time PCR, con o senza pre-amplificazione. Questo protocollo offre una migliore comprensione della quantità di plasma Mirna e permette la valutazione qualitativa dei dati corrispondenti da diversi studi o laboratori.

L'obiettivo generale di questa procedura è misurare i livelli assoluti di microRNA plasmatici utilizzando la PCR quantitativa a trascrizione inversa in tempo reale. Questo metodo può aiutare a valutare la quantità di microRNA plasmatici, anche se il loro livello di espressione è basso. Il vantaggio principale di questa tecnica è che i dati misurati possono essere confrontati con altri provenienti da diversi studi o laboratori.

Le implicazioni di questa tecnica si estendono ai campioni di altre specie perché una curva standard può essere generata utilizzando l'RNA sintetico o il nucleotide. Questo metodo può fornire informazioni sulla ricerca traslazionale per studiare promettenti biomarcatori di sicurezza. Innanzitutto, scongelare i campioni di plasma congelati ottenuti dalla vena femorale delle scimmie Cynomolgus su ghiaccio.

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Biologia molecolare problema 132 microRNA biomarcatore al plasma reazione a catena della polimerasi quantitativa (qPCR) quantificazione assoluta pre-amplificazione

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