Name: Metodo semplice e veloce per ottenere alta qualità tumore del DNA da campioni clinico-patologiche utilizzando Touch Imprint citologia (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-21T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 20 s
Description: Impara un metodo semplice e veloce per estrarre DNA tumorale di alta qualità da campioni clinici utilizzando la citologia da impronta. Questa tecnica facilita l'analisi genetica nel cancro.

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Ringraziamo tutto il personale medico ed accessorio dell'ospedale e i pazienti per acconsentire a partecipare. Si ringrazia Gabrielle White Wolf, PhD, dal gruppo di Esposito (www.edanzediting.com/ac) per la modifica di un progetto di questa relazione. Questo studio è stato sostenuto da una sovvenzione per il progetto di ricerca del genoma della Prefettura di Yamanashi (Y.H. e modus operandi) e una sovvenzione da The YASUDA Medical Foundation (YH).

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<li>Hirotsu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+between+two+amplicon-based+sequencing+panels+of+different+scales+in+the+detection+of+somatic+mutations+associated+with+gastric+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">Comparison between two amplicon-based sequencing panels of different scales in the detection of somatic mutations associated with gastric cancer.</a> BMC Genomics. 17 (1), 833(2016).</li>
<li>Hirotsu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrinsic+HER2+V777L+mutation+mediates+resistance+to+trastuzumab+in+a+breast+cancer+patient%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Oncol%22%5BJournal%5D)">Intrinsic HER2 V777L mutation mediates resistance to trastuzumab in a breast cancer patient.</a> Med Oncol. 34 (1), 3(2017).</li>
<li>Hirotsu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+BRCA1+and+BRCA2+germline+mutations+in+Japanese+population+using+next-generation+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Genet+Genomic+Med%22%5BJournal%5D)">Detection of BRCA1 and BRCA2 germline mutations in Japanese population using next-generation sequencing.</a> Mol Genet Genomic Med. 3 (2), 121-129 (2015).</li>
<li>Hirotsu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multigene+panel+analysis+identified+germline+mutations+of+DNA+repair+genes+in+breast+and+ovarian+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Genet+Genomic+Med%22%5BJournal%5D)">Multigene panel analysis identified germline mutations of DNA repair genes in breast and ovarian cancer.</a> Mol Genet Genomic Med. 3 (5), 459-466 (2015).</li>
<li>Lièvre, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((KRAS+mutation+status+is+predictive+of+response+to+cetuximab+therapy+in+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">KRAS mutation status is predictive of response to cetuximab therapy in colorectal cancer.</a> Cancer Res. 66 (8), 3992-3995 (2006).</li>
<li>Mok, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osimertinib+or+Platinum-Pemetrexed+in+EGFR+T790M-Positive+Lung+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Osimertinib or Platinum-Pemetrexed in EGFR T790M-Positive Lung Cancer.</a> N Engl J Med. 376 (7), 629-640 (2017).</li>
<li>Wong, S. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted-capture+massively-parallel+sequencing+enables+robust+detection+of+clinically+informative+mutations+from+formalin-fixed+tumours%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+rep%22%5BJournal%5D)">Targeted-capture massively-parallel sequencing enables robust detection of clinically informative mutations from formalin-fixed tumours.</a> Sci rep. 13 (3), 3493(2013).</li>
<li>Wong, S. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sequence+artefacts+in+a+prospective+series+of+formalin-fixed+tumours+tested+for+mutations+in+hotspot+regions+by+massively+parallel+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Med+Genomics%22%5BJournal%5D)">Sequence artefacts in a prospective series of formalin-fixed tumours tested for mutations in hotspot regions by massively parallel sequencing.</a> BMC Med Genomics. 13 (7), 23(2014).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

In questo studio, abbiamo presentato un metodo alternativo per l'ottenimento del tumore del DNA da campioni patologici clinici utilizzando le TIC. Preparazione di TIC è molto semplice e richiede meno tempo rispetto ai metodi FFPE, senza la necessità di strumenti speciali10. Tutte le procedure dalla preparazione TIC per estrazione del DNA possono essere completate entro due giorni (Figura 1). Questo metodo riduce così il tempo di turnaround per test genetici. In partic...

Prossima generazione tecnologia di sequenziamento ha fornito i ricercatori significativi progressi nell'analisi delle informazioni sul genoma in variazioni genetiche, malattia mendeliana, predisposizione ereditaria e cancro 1,2,3 . Il Cancer Genome Atlas (TCGA) e International Cancer Genome Consortium (ICGC) hanno perseguito l'identificazione delle alterazioni genetiche in parecchi tipi di comuni tumori4. Centinaia di cancro essenziali driver geni è stati identificati correttamente, e alcune di queste molecole sono presi di mira per droga sviluppo1,5,6.
In ambito clinico, FFPE esemplari sono comunemente usati per la diagnosi patologica e la prova molecolare per varie malattie, compreso il cancro. Tuttavia, durante il processo di fissazione in formalina, cross-linking del DNA-proteine o DNA-DNA si verifica e viene indotta la frammentazione del DNA. Così, i campioni del DNA FFPE non sono sempre adatti per l'analisi genetica a causa della bassa qualità e la quantità di DNA7,8,9. Inoltre, ci vogliono diversi giorni per preparare i campioni FFPE e abilità tecnica è necessario preparare accuratamente le sezioni. Pertanto, è auspicabile sviluppare un metodo semplice e rapido per ottenere alta qualità DNA intatto.
La citologia è un metodo alternativo per la diagnosi patologica. Preparazione del campione citologico è un più semplice, meno costoso e più rapido approccio rispetto al FFPE preparazione10. La tecnica TIC è stata eseguita il linfonodo sentinella e marginali tessuti da pazienti di cancro al seno per la diagnosi rapida intraoperative per alcuni anni11,12. Tuttavia, ci sono pochi rapporti che hanno esaminato se il DNA genomic di alta qualità può essere estratto dai campioni TIC e utilizzato per la successiva analisi genetica. Campioni citologici sono comunemente macchiati con colorazione di Giemsa o di Papanicolaou (Pap), e precedentemente abbiamo segnalato che la quantità e la qualità del DNA estratto dagli esemplari TIC (soprattutto Giemsa-macchiata campioni) sono superiori a campioni ottenuti da FFPE tessuti13. Rispetto al Pap colorazione, colorazione Giemsa ha un vantaggio in che richiedono meno procedure di colorazione. In Pap colorazione, dopo i campioni sono stati fissati e macchiati, devono essere montati con montaggio medio (per esempio, Malinol) per distinguere i contenuti di esempio, come le cellule del tumore, le cellule normali e cellule infiammatorie sotto un microscopio. Se il campione di Pap è preparato senza la fase di montaggio, è quasi impossibile osservare le cellule al microscopio perché l'esemplare è asciugato. In confronto, colorazione Giemsa possono essere osservati nello stato secco, di conseguenza, il passo di montaggio non è necessario per la rapida valutazione cellulare. Per microdissezione, colorazione Giemsa è più adatto perché richiede campioni asciutti.
In questo rapporto, introduciamo un metodo semplice e rapido per preparare campioni TIC con colorazione Giemsa e dimostrare che il TIC è una fonte migliore per DNA rispetto agli esemplari FFPE.

<table><tbody><tr><td>FINE FROST white20 micro vetrino</td><td>scorrevole Matsunami Glass ind, Ltd</td><td>SFF-011</td><td></td></tr><tr><td>Arcturus PEN Membrana vetrini</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>LCM0522</td><td></td></tr><tr><td>Cyto Quick A soluzione</td><td>Muto Pure Chemicals</td><td>20571</td><td></td></tr><tr><td>Cyto Quick B soluzione</td><td>Muto Pure Chemicals</td><td>20581</td><td></td></tr><tr><td>May-Grunwald Soluzione</td><td>Muto Pure Chemicals</td><td>15053</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione Giemsa</td><td>Muto Pure Chemicals</td><td>15002</td><td></td></tr><tr><td>Kit di tessuti QIAamp DNA FFPE</td><td>Qiagen</td><td>56404</td><td></td></tr><tr><td>TaqMan Fast Advanced Master Mix</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4444557</td><td></td></tr><tr><td>Kit di reagenti per la rilevazione di RNasi P TaqMan</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4316831</td><td></td></tr><tr><td>TaqMan Assay da FFPE DNA QC Assay v2</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4324034</td><td></td></tr><tr><td>MicroAmp Piastra di reazione ottica veloce a 96 pozzetti&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4346907</td><td></td></tr><tr><td>Pellicola adesiva ottica MicroAmp</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4311971</td><td></td></tr><tr><td>MicroMixer E36</td><td>TITEC</td><td>0027765-000</td><td></td></tr><tr><td>ViiA 7 Sistema PCR in tempo reale</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>VIIA7-03</td><td></td></tr><tr><td>Himac CF16RXII</td><td>Hitachi-koki</td><td>CF16RII</td><td></td></tr><tr><td>Libreria ionica Kit di quantificazione TaqMan</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4468802</td><td></td></tr><tr><td>Ion AmpliSeq Cancer Hotspot Panel v2</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4475346</td><td></td></tr><tr><td>Ion AmpliSeq Library Kit 2.0</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4480442</td><td></td></tr><tr><td>Ion Xpress Adattatori per codici a barre 1-16 Kit</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4471250</td><td></td></tr><tr><td>Ion PGM Hi-Q View Kit di sequenziamento (200 base)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A30044</td><td></td></tr><tr><td>Ion Chef System</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4484177</td><td></td></tr><tr><td>Veriti 96-well Thermal Cycler</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>Veriti200</td><td></td></tr><tr><td>Ion 318 Chip Kit v2 BC</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4488150</td><td></td></tr><tr><td>Ion PGM System</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>PGM11-001</td><td></td></tr><tr><td>Ion PGM Wash 2 Bottle kit</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A25591</td><td></td></tr><tr><td>Agencourt&commercio; AMPure&commercio; XP Kit</td><td>Beckman Coulter</td><td>A63881</td><td></td></tr><tr><td>Supporto magnetico a 16 posizioni</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4457858</td><td></td></tr><tr><td>Provette per microfuge antiaderenti prive di RNasi, 1,5 ml (provetta a basso legame</td> )<td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AM12450</td><td></td></tr><tr><td>Acqua priva di nucleasi</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AM9938</td><td></td></tr><tr><td>MicroAmp& Piastre di reazione ottiche a 96 pozzetti</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4306737</td><td></td></tr><tr><td>MicroAmp&trade; Pellicola adesiva trasparente</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4306311</td><td></td></tr><tr><td>Agencourt&trade; AMPure&commercio; XP Kit</td><td>Beckman Coulter</td><td>A63881</td><td></td></tr><tr><td>Etanolo (99,5)</td><td>Nacalai Tesque</td><td>08948-25</td><td></td></tr><tr><td>Idrossido di sodio (10M)</td><td>Sigma</td><td>72068</td><td></td></tr><tr><td>DTU-Neo</td><td>TAITEC</td><td>0063286-000</td><td></td></tr><tr><td>E-36</td><td>TAITEC</td><td>0027765-000</td><td></td></tr><tr><td>ECLIPSE Ci-L</td><td>Nikon</td><td>704354</td><td></td></tr><tr><td>Pipet-Lite LTS Pipetta Pipetta L-2XLS+</td><td>METTLER TOLEDO</td><td>17014393</td><td></td></tr><tr><td>Pipet-Lite LTS L-10XLS+</td><td>METTLER TOLEDO</td><td>17014388</td><td></td></tr><tr><td>Pipetta Pipet-Lite LTS L-20XLS+</td><td>METTLER TOLEDO</td><td>17014392</td><td></td></tr><tr><td>Pipetta Pipet-Lite LTS L-100XLS+</td><td>METTLER TOLEDO</td><td>17014384</td><td></td></tr><tr><td>Pipetta Pipet-Lite LTS L-200XLS+</td><td>METTLER TOLEDO</td><td>17014391</td><td></td></tr><tr><td>Pipetta Pipet-Lite LTS L-1000XLS+</td><td>METTLER TOLEDO</td><td>17014382</td><td></td></tr><tr><td>petit-change</td><td>WAKEN</td><td>MODEL8864</td><td>Mini centrifuga</td></tr><tr><td>petit-incubator</td><td>WAKEN</td><td>WKN-2290</td><td>Incubatore ad aria</td></tr><tr><td>SensiCare Guanti da esame in nitrile senza polvere MEDLINE</td><td>SEM486802</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Garza sterile</td><td>Osaki</td><td>11138</td><td></td></tr><tr><td>Frigorifero MediCool</td><td>SANYO</td><td>MPR-312DCN-PJ</td><td></td></tr> FEATHER <tr><td>FEATHER</td><td></td><td>FEATHER No.130</td><td></td></tr><tr><td>FEATHER TRIMMING BLAD</td><td>FEATHER</td><td>No.260</td><td></td></tr><tr><td>FEATHER S</td><td>FEATHER</td><td>FA-10</td><td></td></tr><tr><td>Vortex Genius 3</td><td>IKA</td><td>41-0458</td><td>Miscelatore Vortex</td></tr><tr><td>Pincette</td><td>NATSUME</td><td>A-5</td><td></td></tr><tr><td>microprovetta da 1,5 mL</td><td>BIOBIK</td><td>RC-0150</td><td></td></tr></tbody></table>

metodo semplice e veloce per ottenere alta qualità tumore del dna da campioni clinico-patologiche utilizzando touch imprint citologia

Simple and Rapid Method to Obtain High-quality Tumor DNA from Clinical-pathological Specimens Using Touch Imprint Cytology

È fondamentale per determinare lo stato mutazionale nel cancro prima amministrazione e trattamento di farmaci a bersaglio molecolare specifici per malati di cancro. In ambito clinico, formalina-fisso tessuti di paraffina (FFPE) sono ampiamente utilizzati per i test genetici. Tuttavia, FFPE DNA generalmente è danneggiata e frammentato durante il processo di fissazione in formalina. Di conseguenza, FFPE DNA non è a volte adeguata per test genetici a causa della bassa qualità e quantità di DNA. Qui presentiamo un metodo di citologia di impronta di tocco (TIC) per ottenere il DNA genomico da cellule tumorali, che può essere osservato sotto un microscopio. I numeri di cellulare delle cellule di morfologia e cancro possono essere valutati utilizzando campioni di TIC. Inoltre, l'estrazione del DNA genomico da campioni TIC può essere completato entro due giorni. Totale quantità e qualità di TIC DNA ottenuto utilizzando questo metodo era superiore a quella del DNA FFPE. Questo metodo rapido e semplice permette ai ricercatori per ottenere alta qualità DNA per test genetici (ad es., analisi di sequenziamento di prossima generazione, digital PCR e PCR quantitativa in tempo reale) e di abbreviare i tempi per riportare i risultati.

La figura 1 Mostra l'intero processo, dalla preparazione campioni TIC per estrazione del DNA. In particolare, la procedura richiede solo due giorni per ottenere il DNA di genomic dai campioni di TIC. Abbiamo valutato tutti gli effetti di deposito del tumore prima dell'elaborazione di diapositiva. Abbiamo trovato che le cellule del tumore erano attaccate su lastra di vetro quando gli esemplari del tessuto sono stati toccati immediatamente il vetrino, e quando ...

L'ottenimento di DNA genomico di alta qualità dai tessuti del tumore è un primo passo essenziale per analizzare le alterazioni genetiche mediante sequenziamento di nuova generazione. In questo articolo, presentiamo un metodo semplice e rapido per arricchire le cellule del tumore e ottenere DNA intatto dal tocco impronta campioni citologici.

Metodo semplice e veloce per ottenere alta qualità tumore del DNA da campioni clinico-patologiche utilizzando Touch Imprint citologia

It is critical to determine the mutational status in cancer before administration and treatment of specific molecular targeted drugs for cancer patients. ...

L'obiettivo generale di questo protocollo è ottenere DNA tumorale di alta qualità da campioni clinici. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nella scienza di base e clinica come la ricerca sul cancro, la diagnosi e le decisioni terapeutiche. Il vantaggio principale di questa tecnica è che possiamo ottenere il DNA tumorale in modo più semplice e rapido rispetto ai metodi precedenti.Per iniziare il protocollo, toccare più volte la superficie tumorale di un tessuto precedentemente preparato e resecato su un normale vetrino con le mani guantate. Confermare visivamente che l'area toccata copra più dell'80% del vetrino. Premere leggermente il vetrino normale contro un vetrino in polietilene naftalato o un vetrino a membrana PEN e strofinarlo delicatamente due o tre volte con le mani guantate.Confermare visivamente che le cellule siano trasferite dal normale vetrino al vetrino a membrana PEN. Asciugare all'aria sia il vetrino in vetro che la membrana PEN per cinque minuti a temperatura ambiente. Dopo l'asciugatura, colorare il normale vetrino per l'esame citologico diretto.Immergere i vetrini in una soluzione fissativa per cinque secondi e poi colorare con la soluzione c

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Cellule tumorali circolanti sono isolate dal sangue di pazienti affetti da cancro senza infliggere danni cellulari. Isolamento di cellule tumorali viene eseguita utilizzando una superficie bimolecolare di E-selectina in aggiunta agli anticorpi contro marcatori epiteliali. Un rivestimento nanotubo favorisce espressamente adesione cellulare del cancro con conseguente purezze cattura elevate.

Isolamento rapido di cellule tumorali circolanti da campioni di sangue del paziente

Questo video descrive il test di immunofluorescenza delle cellule tumorali circolanti (CTC), una tecnica per caratterizzare i biomarcatori sulle cellule tumorali circolanti in campioni di pazienti con carcinoma polmonare non a piccole cellule. Questo test potrebbe essere utilizzato per monitorare i cambiamenti dinamici del tumore e la risposta immunitaria, che possono riflettere la risposta alla chemioterapia, alle radiazioni e ai possibili trattamenti immunoterapici.

Saggio di immunofluorescenza CTC: una tecnica per caratterizzare le cellule tumorali circolanti

Questo protocollo descrive la rilevazione qPCR del citomegalovirus in un tessuto bioptico fissato in formalina e incluso in paraffina, che è rapido, sensibile, specifico e utile per interpretare modelli di colorazione equivoci di ematossilina ed eosina o immunoistochimica.

qPCR è un metodo sensibile e rapido per il rilevamento del DNA Cytomegaloviral in fissato in formalina, incluse in paraffina biopsia

Questo protocollo descrive la rapida dissociazione non enzimatica di frammenti di tessuto umano fresco per la valutazione qualitativa e quantitativa delle cellule CD45+ (linfociti/leucociti) presenti in vari tessuti umani normali e maligni. Inoltre, il surnatante ottenuto dall'omogenato del tessuto primario può essere raccolto e conservato per ulteriori analisi o sperimentazioni.

Un semplice e rapido protocollo non-enzimaticamente dissociare freschi tessuti umani per l&#39;analisi di linfociti infiltranti

Qui si descrive una strategia di rimozione ottimizzato ed efficiente per la raccolta di bio-particelle presenti nel 'toccare DNA' campioni, con un protocollo di amplificazione potenziata coinvolge un solo passaggio 5 microlitri micro-volume di lisi / STR amplificazione, per consentire il recupero di repeat short tandem (STR) profili del donatore bio-particelle (s).

Maggiore analisi genetica di singole bioparticelle umani recuperati da semplificato Micromanipolazione da Forensic Evidence &#39;tocco DNA&#39;

Questo manoscritto descrive i protocolli clinici per due pannelli di sequenziamento di nuova generazione. Un pannello interroga le neoplasie ematologiche, mentre l'altro pannello prende di mira i geni comunemente mutati nei tumori solidi. La classificazione molecolare delle mutazioni driver nelle neoplasie umane offre preziose informazioni prognostiche e predittive.

Successivo sequenziamento di nuova generazione per il rilevamento di Actionable mutazioni nei tumori solidi e liquidi

Viene descritto un sistema integrato per il sequenziamento mirato di nuova generazione di campioni oncologici. Questo sistema multipiattaforma è ottimizzato per biopsie tumorali di bassa qualità e bassa quantità, accoglie bassi input di DNA, include controlli multivariante ben caratterizzati e presenta un nuovo chiamante di varianti informato da misure quantitative di controllo di qualità pre-analitiche.

Integrazione di Wet and Dry processi banco Ottimizza Targeted sequenziamento di prossima generazione di bassa qualità e di biopsie di tumori a bassa quantità

I tumori cutanei vengono spesso scartati dopo la chirurgia microscopica di Mohs. Qui viene descritto un protocollo che consente al personale di supporto clinico di elaborare e memorizzare in modo efficace campioni tumorali cutanei ( ad esempio, carcinoma delle cellule squamose, carcinoma delle cellule basali e melanoma) per applicazioni di laboratorio a valle senza interferire con le operazioni cliniche.

Istituzione di un Bioreposito di base clinico

Vi presentiamo un nuovo approccio per caratterizzare le cellule del tumore. Abbiamo combinato l'immunofluorescenza con DNA fluorescentein situ-ibridazione per valutare cellule catturate da un filo medico funzionalizzato capace di in vivo arricchimento CTCs direttamente dal sangue del paziente.

Caratterizzazione delle cellule del tumore usando un filo medico per l'acquisizione di cellule tumorali circolanti: un approccio 3D basato sul DNA pesce e immunofluorescenza

Questo articolo descrive un metodo per identificare le alterazioni clonali e subclonali tra campioni diversi di un determinato paziente. Anche se gli esperimenti qui descritti si concentrano su un tipo di tumore specifico, l'approccio è ampiamente applicabile ad altri tumori solidi.

Analisi comparativa delle lesioni attraverso un approccio di sequenziamento mirato

Questo protocollo presenta un metodo per aumentare il contenuto percentuale di tumore di campioni di tessuto incorporato in paraffina fissata in formalina.

Migliorare il contenuto tumorale attraverso la macrodissezione tumorale

Impara un metodo semplice e veloce per estrarre DNA tumorale di alta qualità da campioni clinici utilizzando la citologia da impronta. Questa tecnica facilita l'analisi genetica nel cancro.

Metodo semplice e veloce per ottenere alta qualità tumore del DNA da campioni clinico-patologiche utilizzando Touch Imprint citologia (Video) | JoVE Journal

Metodo semplice e veloce per ottenere alta qualità tumore del DNA da campioni clinico-patologiche utilizzando Touch Imprint citologia

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