Name: Reintegrazione di droga in Cerca nei topi utilizzando il paradigma di Conditioned Place Preference (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 29 s
Description: Scopri il paradigma Conditioned Place Preference per studiare la ricerca di droga nei topi. Questo metodo valuta il reinstatement comportamentale e il ruolo dei segnali ambientali nella ricaduta.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Generalitat Valenciana, PROMETEOII / 2014/063; Ministero della salute, servizi sociali e l'uguaglianza. Delegazione del governo per il piano nazionale sulle droghe, progetti di ricerca sulle dipendenze di droga, 2014I007; Ministero dell'economia e competitività (MINECO), Istituto di salute Carlos III, rete di Addictive disordini (RTA) RD12 / 0028/0005 e RD16 / 17/07/00 e Unione europea, FEDER fondi "una manera de hacer Europa" e PSI2014-51847-R.

Tutte le procedure che coinvolgono topi e la loro cura osservanza di leggi nazionali, regionali e locali e i regolamenti, che sono in conformità con la direttiva 2010/63/UE del Parlamento europeo e del Consiglio, del 22 settembre 2010 sulla protezione degli animali utilizzati a fini fini scientifici. L'uso di animali e Comitato a cura dell'Università di Valencia ha approvato il presente protocollo.
1. materiali e set-up per Conditioned Place Preference:
<ol><li>Gestire topi 3 giorni prima della prova per 1-2 minuti ciascuno. La base della coda dovrebbe essere afferrata. Il corpo dovrebbe essere sostenuto se possibile. Questo viene fatto per ridurre al minimo il dolore e l'angoscia quando si maneggia un animale ed evitare variabili interferenti, come lo stress. Nota: Di topo maschio 1 60 giorni di età (giovani adulti) 35-40 g di peso sono stati impiegati negli esperimenti attuali. Reintegrazione di droga-indotta può essere eseguita in topi di entrambi i sessi. Tuttavia, per quanto riguarda la reintegrazione indotta da stress, il paradigma di sconfitta sociale è progettato solo per roditori maschi, come fanno le femmine non inducono una risposta aggressiva nei topi residente.</li>
	<li>Per posto condizionata, utilizzare scatole identiche con due scomparti identici (30,7 cm long × 31,5 cm larghezza × 34,5 cm di altezza), separati da una zona grigia centrale più piccola (13,8 long × 31,5 centimetri di larghezza × 34,5 alta). Nota: Comparti hanno pavimento diverse texture e colori parete (un pavimento liscio nel vano di nero e un pavimento grezzo in quello bianco). Ogni vano della finestra di CPP contiene quattro fasci di luce infrarosse e sei nello scomparto centrale. Questo permette la registrazione degli incroci tra compartimenti e la posizione dell'animale.</li>
	<li>Impostare fino le luci della camera (off o abbassate) ogni giorno. Utilizzare luci rosse (consigliati), come gli animali non ve ne accorgete e si è attenuato per lo sperimentatore (circa 40 lux misurati a 1 m sopra il livello del pavimento).</li>
	<li>Impostare il programma per registrare 15 min per il condizionamento pre- e post-test (vedere la Tabella materiali per software) (Figura 2)</li>
	<li>Preparare la soluzione di cocaina richiesta per l'intero esperimento. Sciogliere il cloridrato di cocaina in 0,9% NaCl (soluzione fisiologica) in un volume di peso corporeo 0,1 mL/10 g. Miscela di vortice e conservare a 4 ° C alla fine della giornata. Nota: Concentrazioni di cocaina possono variare a seconda delle finalità dello studio. Se l'obiettivo è di valutare le dosi sottosoglia di cocaina, una concentrazione di 1 mg/kg potrebbe essere utilizzata, che è inefficace negli animali di controllo, come si è visto in precedenti studi24,35. Se una dose efficace è lo scopo, una concentrazione di 6 mg/kg può essere scelta, che è efficace, ma non induce la reintegrazione24, o una concentrazione di 25 mg/kg, che è efficace e induce la reintegrazione del preferenza19.</li>
	<li>Testare gli animali durante la loro fase scura e utilizzare la stessa casella per ogni animale in giorni.</li>
	<li>Portare animali ogni giorno per la sala di collaudo nelle loro gabbie casa e lasciarli indisturbati per 15 min come un periodo di assuefazione per tutti i rumori relative ai test.</li>
</ol>2. test
<ol><li>Acquisizione Nota: La procedura di condizionamento posto, imparziali in termini di preferenza spontanea iniziale, costituito da tre fasi: pre-condizionamento, condizionata e post-condizionata (Figura 1).<ol>
<li>
Pre-condizionamento (Pre-C) (3 giorni) (nella figura 2, Figura 3, Figura 4) Nota: Qui, viene valutato il valore neutro dei compartimenti nella finestra di CPP. Misurare il tempo trascorso in ogni vano e poi confrontarlo con quello trascorso nello stesso contenitore del test post-condizionata.<ol>
<li>Portare gli animali per la camera di prova e lasciarli abituati per 15 min.</li>
			<li>Verifica che le ghigliottine vengono rimossi dalla gabbia.</li>
			<li>Impostare il computer e il programma. Inserisci animal ID e premere il comando di "Prova" e "Start" (Figura 2).</li>
			<li>Posizionare il mouse delicatamente in camera di mezzo (vano grigio) e lasciare la sala di collaudo con minimo rumore.</li>
			<li>Riportare tutti gli animali in gabbie usate per casa e salvare i dati quando il processo è finito.</li>
			<li>Consentire di topi per accedere a entrambi i compartimenti dell'apparato per 15 min (900 s) al giorno per 3 giorni consecutivi.</li>
			<li>Il giorno 3, annotare il tempo trascorso in ogni vano per un periodo di s 900 e salvarlo per l'assegnazione degli scompartimenti nella fase successiva (Figura 3).</li>
			<li>Assegnare la metà degli animali in ogni gruppo per ricevere il farmaco o il veicolo in uno scomparto (ad es., nero) e l'altra metà nel vano di (ad es., bianco) (Figura 4). Nota: La distribuzione finale degli animali deve garantire che la metà degli animali sono assegnata a vano inizialmente preferito e l'altra metà al vano non preferite. Inoltre, la metà degli animali hanno ricevuto il farmaco in uno scomparto (ad esempio, quello nero) e l'altra metà in altro (in questo caso, quello bianco).</li>
			<li>Punteggi di equilibrio nel gruppo all'interno di entrambi i comparti, così come tra i gruppi (le differenze del gruppo test con un'analisi della varianza (ANOVA)). Come guida approssimativa, i valori dovrebbero essere circa 360-370 s nel test Pre-C (Figura 4). Nota: nessuna differenza significativa dovrebbe essere rilevata tra il tempo trascorso negli scompartimenti abbinate in droga e abbinato al veicolo durante la prova di Pre-C.</li>
			<li>Escludere gli animali che presentano una forte avversione o la preferenza per ogni vano. Considera avversione come spendere meno tempo al 33% nel vano e considerare la preferenza quando l'animale ha trascorso oltre il 67% del tempo totale nel compartimento.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
Condizionata (4 giorni) (Figura 5)
		<ol>
<li>Pesare gli animali e usare questi pesi per dosi di cocaina durante condizionata.</li>
			<li>Preparare siringhe con cocaina o salino basato sul peso corporeo.</li>
			<li>Iniettare un mouse contemporaneamente intraperitonealmente (ip) e inserire subito delicatamente nel vano assegnato di bianco o nero della loro casella.</li>
			<li>Dopo un intervallo di 4 h, iniettare la dose di farmaco immediatamente prima che il mouse è limitato al comparto droga-accoppiato per 30 min (Figura 5).</li>
			<li>Si alternano questa procedura ogni giorno, iniziando con la cocaina nei giorni 1 e 3 e saline nei giorni 2 e 4.</li>
			<li>Verificare che il confinamento è effettuato in entrambi i casi chiudendo la porta a ghigliottina che separa i due compartimenti, per rendere inaccessibile la zona centrale. Nota: In questa fase, non c'è nessun bisogno di impostare il programma di PC.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
Post-condizionata (Post-C) (1 giorno)
		<ol>
<li>Portare gli animali per la camera di prova e lasciarli abituati per 15 min.</li>
			<li>Rimuovere la porta a ghigliottina che separa i due compartimenti.</li>
			<li>Impostare il computer e il programma. Inserisci animal ID e premere il comando "start".</li>
			<li>Registrare il tempo trascorso dai topi non trattati in ogni compartimento durante un periodo di osservazione di s 900.</li>
			<li>Quando il processo è finito, riportare tutti gli animali in gabbie usate per casa e salvare i dati.</li>
			<li>Considera che la droga ha indotto la preferenza di posto se il tempo trascorso nel vano di droga-accoppiato durante il Post-C è significativamente maggiore nel test Pre-C. Se si verifica il contrario, considera un'avversione per il vano di droga-accoppiato.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>Estinzione
	<ol>
<li>Condurre una sessione settimanale di estinzione in tutti i gruppi/animali che ha sviluppato una preferenza per il vano di droga-accoppiato.</li>
		<li>Metti l'animale nell'apparato (senza ghigliottine) per 15 min (stesso come i test di pre- e Post-C) (Figura 1). Nota: Se la dose impiegata CPP è alto (25 mg/kg), eseguire 1 sessione di estinzione per settimana. Se una dose di sottosoglia è usato (1 mg/kg), quindi eseguire 2 estinzione sessioni a settimana (ad esempio lunedì e giovedì).</li>
		<li>Prendere in considerazione la preferenza estinta quando i dati della prova di estinzione non mostrano differenze per quanto riguarda il test di Pre-C, ma mostrano differenze per quanto riguarda il test Post-C.</li>
		<li>Ripetere il test 24 ore più tardi al fine di confermare l'estinzione.</li>
	</ol></li>
	<li>Reintegrazione di CPP
	<ol>
<li>
Reintegrazione indotta da innesco
		<ol>
<li>Valutare gli effetti di una dose di adescamento di cocaina 24 h dopo l'estinzione è stata confermata. Nota: Le dosi di adescamento sono metà della dose precedente che l'animale ha ricevuto durante condizionata. Il test di reintegrazione subisce lo stesso protocollo come Pre-C e C-Post test, tranne per il fatto che gli animali devono ricevere la dose di cocaina in un non contingente posto 15 min prima della prova. L'efficacia di adescamento di droga nell'induzione della reintegrazione può essere migliorata dopo ripetute estinzione/reintegrazione esperienze23, anche se l'ordine delle dosi sembra non per giocare un ruolo nei risultati ottenuti36.</li>
			<li>Portare gli animali in un'altra camera dalla sala di collaudo (non contingente posto) (Figura 6).</li>
			<li>Iniettare loro con metà della dose precedente di cocaina (ad esempio, se gli animali sono stati condizionati con 25 mg/kg di cocaina, una dose di adescamento sarebbe 12,5 mg/kg).</li>
			<li>Riportarli al loro vivaio per 15 min.</li>
			<li>Portarli in sala prove e sistemare gli animali nell'apparato immediatamente (senza le porte a ghigliottina che separa gli scompartimenti) per 15 min (come il pre- e Post-C test).</li>
			<li>Considera la differenza in secondi tra il tempo trascorso nel vano di droga-accoppiato durante l'ultima sessione di estinzione e il test di ripristino come misura del grado di reintegrazione della preferenza indotta dalla droga.</li>
			<li>Ripetere la procedura di estinzione-reintegrazione ogni volta con diminuendo le dosi fino a quando è confermato di essere inefficace. Nota: Un controllo di iniezione salina può essere utilizzato per controllare la capacità di innesco di cocaina (e non di iniezione stesso) per indurre la reintegrazione.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
Reintegrazione indotta da stress
		<ol>
<li>Valutare gli effetti di una reintegrazione indotta da stress 24 h dopo l'estinzione è stata confermata Nota: Test di reintegrazione sono gli stessi di quelli effettuati in Post-C (deambulazione libera per 15 min), tranne per il fatto che gli animali vengono esaminati 15 min dopo la sconfitta sociale in un agonistico incontro (Figura 6)</li>
			<li>Prendere gli animali in una camera diversa dalla camera CPP.</li>
			<li>Posizionare il mouse sperimentale con un sesso avversario aggressivo abbinato di pari età e peso corporeo nella gabbia plastica (Figura 6). Nota: L'incontro agonistico consiste di una prova di 10 min in una gabbia in plastica trasparente neutra (23x13.5x13cm) con un risultato di sconfitta per il mouse sperimentale. Per preparare l'avversario aggressivo, in primo luogo isolare gli animali diversi che corrispondono a età e peso corporeo come topi sperimentali per 3 settimane. Addestrarli ad acquisire esperienza di combattimento e testarli per avere alti livelli di aggressività territoriale. Per ottenere aggressivi conspecifici, topi devono essere isolati per almeno 3 settimane e poi addestrati in aggressivo e attaccare i comportamenti. Gli animali sono addestrati in un ambiente neutro, di fronte a loro a coppie. Li lasciamo mordere i tempi avversario 2 o 3 e farli fuori dalla gabbia, sempre terminare l'allenamento prima che uno dei due topi presenta presentazione, affinché l'esperienza dell'incontro rafforza il comportamento aggressivo. Dopo aver subito aggressioni (minaccia e attacco dai conspecifici aggressivo), topi sperimentali dovrebbero presentare evitamento/fuggire e comportamento difensivo/sottomesso. Il criterio è quello di adottare una postura specifica della sconfitta, caratterizzata da una posizione eretta e sottomessa, limp zampe anteriori, testa inclinata verso l'alto e retratto orecchie (Figura 6). Secondo Burke et al., 2016, consideriamo che l'incontro sociale è terminata all'inizio se l'intruso viene visualizzato una postura supina sottomissione per > 8 s o se 13 punture di attacco si è verificato. Un'altra opzione per gli animali di schermo senza rischio di ferita significativa potrebbe essere di ritmo l'animale in un recinto di rete metallica con un foro, non abbastanza grande per entrambi animale passare.  Aggressione potrebbe essere rilevata senza sottoporre gli animali a dirigere il comportamento aggressivo.  Se un animale subisce una ferita con una ferita di 1cm di diametro e/o l'esposizione diretta del muscolo, è escluso dallo studio e dovrebbe essere euthanized.</li>
			<li>Dopo 10 min di incontro agonistico, prendere i topi in sala prove e sistemare gli animali nell'apparato CPP immediatamente (senza le porte a ghigliottina che separa gli scompartimenti) per 15 min (come il pre- e Post-C test).</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>3. elaborazione statistica
Nota: Dimensione del campione ideale dovrebbe essere un minimo di 15 animali per gruppo.
<ol><li>Analizzare il tempo medio trascorso nel vano di droga-accoppiato del gruppo per mezzo di una ANOVA mista con uno tra variabile, trattamento, con due livelli (gruppo di controllo, gruppo sperimentale, esempio dei due gruppi è in Figura 7 c) e uno all'interno variabile – giorni, con 2 livelli (Pre-C e Post-C). Nota: Nel gruppo di controllo, gli animali ricevono la droga ma non hanno nessuna manipolazione ambientale. D'altra parte, nel gruppo sperimentale animali sono esposti a diverse condizioni ambientali. Confrontare il tempo trascorso nel vano di droga-accoppiato il giorno Post-C rispetto al Pre-C prova per vedere se ci sono differenze significative nella sensibilità al farmaco.</li>
	<li>Inoltre, eseguire analisi post-hoc di Bonferroni per controllare uno dei punteggi significativi.</li>
	<li>Analizzare i dati relazionati ai valori di estinzione e la reintegrazione nei gruppi che preferenza sviluppato mediante dello studente t-test per continuare con la procedura di estinzione-reintegrazione nel corso dell'esperimento, ma al momento finale, analizzarli con un'ANOVA con all'interno variabile (giorni) con il numero di livelli a seconda di ciascun gruppo. Nota: Quando è aumentato il numero di confronti, il numero di quelli che saranno significativi per caso anche aumentato. Come tale, per evitare falsi positivi (errori di tipo 1) abbiamo 'corretti' il valore di p, rendendo in tal modo il test più conservatore con la correzione di Bonferroni per t-test multipli. Tuttavia, per la prova di reintegrazione, il confronto occorre tra il test di reintegrazione e l'ultimo test di estinzione. Pertanto, non esiste alcuna necessità di correzione.</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Il punto chiave della ricerca di dipendenza droga è lo sviluppo di trattamenti che diminuiscono il desiderio e, di conseguenza, ridurre la vulnerabilità alla ricaduta. Grazie al modello di reintegrazione del paradigma CPP, è possibile studiare l'influenza di diversi fattori ambientali e procedurali che modulano la ricaduta, che è una priorità della ricerca futura. Ci sono alcuni punti importanti da considerare, come il paradigma CPP è un test che è altamente sensibile ai fattori ambientali.
<s...

Il paradigma di Conditioned Place Preference (CPP) offre un modo semplice per valutare la ricompensa condizionata indotta da stimoli diversi1,2ed è stato usato largamente per studiare gli effetti gratificanti condizionati di droghe d'abuso3 . Si basa sul condizionamento pavloviano, valutando il valore motivazionale della droga-collegato di stimoli ambientali per il mantenimento di comportamenti di dipendenza4. In questo modello, stimoli ambientali acquisiscono proprietà secondaria appetitiva (effetti gratificanti condizionati) quando accoppiato con un rinforzo primario3. Ad esempio, un posto inizialmente neutro (ad esempio il colore di uno scomparto nella gabbia CPP) è accoppiato con gli specifici effetti di una droga di abuso durante alcune condizionata sessioni5, mentre un altro vano è associato con l'iniezione di un veicolo. Seguito, condizionata, se l'animale passa più tempo nel vano precedentemente connesso con la droga, si presume che il CPP ha sviluppato3. L'istituzione della preferenza è raggiunta quando l'animale dà un valore positivo per gli stimoli ambientali legati alla droga, che è il rinforzo primario. Di conseguenza, gli animali si esibiranno risposte comportamentali di droga in Cerca in risposta a tali indizi contestuali6. Il modello CPP consente la valutazione delle proprietà gratificanti di sottosoglia dosi del farmaco, indicando se gli animali in una condizione specifica (ad esempio, dopo aver sofferto in precedenza di sconfitta sociale) sono più vulnerabili e sensibili alle dosi che sono non è efficace nel ingenuo animali7.
Il modello CPP è stato utilizzato anche per valutare l'estinzione/reintegrazione come modello animale per studiare la ricaduta3, che è l'obiettivo del presente protocollo. Ci sono tre diverse fasi: acquisizione, estinzione e reintegrazione (Figura 1). Nel modello di reintegrazione CPP, animali prima acquisiscono il CPP per un raggruppamento di droga-accoppiato, e poi si eseguono diverse sessioni di estinzione. Definiamo estinzione come il momento in cui l'animale riduce le risposte comportamentali di approssimazione ad uno stimolo condizionato gratificante che è stato rimosso (ad esempio, la droga)8. Durante le sessioni di estinzione, animali esplorare i compartimenti in assenza del farmaco, in modo che la preferenza acquisita è gradualmente attenuati9. Una questione importante da considerare è che il cambiamento comportamentale che l'animale si presenta durante l'estinzione (la diminuzione progressiva nel tempo trascorso nel vano di droga-accoppiato) può essere a causa di nuovi processi di apprendimento che competono con la precedente risposta istruita, o dovuto ad una diminuzione nello stato interno motivazionale del soggetto3. Infine, il ristabilimento della preferenza posto attraverso gli indizi di contesto o droga sarebbe il nostro modello di ripristino1.
Somministrare un'iniezione di adescamento del farmaco associato, è possibile ripristinare la preferenza, che è considerata un ristabilimento dell'approssimazione per gli indizi contestuali. Reintegrazione di adescamento del farmaco si verifica a causa della memoria persistente degli effetti piacevoli della droga, che ha indotto assetati e motiva gli animali a cercare gli stimoli ambientali legati alla ricompensa.
Alcuni vantaggi del modello reintegrazione CPP sono che la procedura sia non-invasiva (in contrasto con il self-administration, che richiede un intervento chirurgico), poco costoso e semplice. Inoltre, questo modello ha una validità di buon criterio, in quanto imita bene ciò che avviene in esseri umani10,11, inducendo la reintegrazione con gli stimoli che inducono la ricaduta, come ri-esposizione al farmaco12,13 o 14di sforzo.
Ci sono altre tecniche come l'estinzione – modello di reintegrazione di autosomministrazione endovenosa. Qui, gli animali premere una leva per amministrare la droga, che permette la valutazione della risposta dell'operatore dell'animale, compulsività e motivazione14,15,16. Il vantaggio principale del CPP rispetto alle procedure di auto-amministrazione è che la reintegrazione di CPP è considerato per riflettere la riattivazione del valore incentivo-motivazionale degli stimoli contesto accoppiato con la droga, che consiste della ricomparsa dell'approccio comportamento al contesto17. Inoltre, non-droga stimoli, quali stress, possono anche indurre la reintegrazione18,19. Ad esempio, uno studio di autosomministrazione non descritto effetti sul ripristino dell'assunzione dell'eroina in ratti dopo un piede scossa o ritenuta stress20. Autori hanno discusso che era infruttuoso, perché tali fattori di stress sono stati testati all'esterno della camera di autosomministrazione in un contesto diverso. Al contrario, quando si utilizza il modello CPP di reintegrazione, c'era un chiaro ristabilimento del CPP indotta da morfina dopo l'utilizzo di fattori di stress stessi e applicata in un contesto diverso a quello del CPP e in tempi diversi (0 e 15 min dopo lo stress di esposizione)18 .
Diversi studi in letteratura hanno dimostrato modi diversi di droga e reintegrazione indotta da stress. Da un lato, reintegrazione farmaco-indotta è stata segnalata in ratti ed in topi facendo uso di morfina5,21,22,23, cocaina24,25, anfetamina26, 27, etanolo28,29e30di 3,4-Methylenedioxymethamphetamine (MDMA). D'altra parte, l'esposizione allo stress può essere un fattore determinante nella vulnerabilità all'abuso di droga. Lo stress è noto per aumentare gli effetti gratificanti della droga7,31,32 e il loro ruolo nella ricaduta è affermata33,34. Ad esempio, sconfitta nelle interazioni sociali con un conspecifico reintegra morfina e cocaina CPP18,19. Inoltre, gli animali esposti a ripetuta sconfitta sociale sono più vulnerabili agli effetti gratificanti condizionati di sottosoglia dosi di cocaina e ripristinare la preferenza con dosi molto basse di cocaina7.
Applicazione del modello reintegrazione CPP è un modo utile e sensibile per valutare la vulnerabilità alla ricaduta negli animali e permette la valutazione di diverse sottili manipolazioni ambientali, che sono i principali trigger che minacciano la ricaduta umana, come reintegrazione indotta da farmaci o stress.

<table><tbody><tr><td>Software MONPRE 2Z</td><td>CIBERTEC S.A., Spagna</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Scatole in plexiglas identiche con due scomparti di uguali dimensioni separati da una zona centrale grigia.</td><td>CIBERTEC S.A., Spagna</td><td>N/A</td><td>Gli scomparti hanno pareti di colore diverso (nero vs bianco) e trame del pavimento distinte (griglia fine nello scomparto nero e griglia larga in quello bianco). Tutte le scatole sono dotate di quattro fasci di luce infrarossa in ogni scomparto della scatola e sei nella zona centrale che permettono la registrazione della posizione dell'animale e dei suoi passaggi da uno scomparto all'altro.</td></tr><tr><td>Cocaina cloridrato</td><td>Laboratorios Alcaliber S.A., Madrid, Spagna</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Animali: topi del ceppo OF1 outbred</td><td>Charles River, Barcellona Spagna</td><td>N/A</td><td>Topi maschi che arrivano in laboratorio con PND 42 e PND 60 eseguono il test CPP. Questi animali sono particolarmente indicati per i modelli di sconfitta sociale e aggressività.</td></tr><tr><td>Dieta standard- Teklad Global Diet 2014</td><td>Fornito da Harlan Laboratories Models, S. L. (Barcellona, Spagna)</td><td></td><td>13 kcal % di grassi, 67 kcal % di carboidrati e 20% kcal di proteine; 2,9 kcal/g</td></tr><tr><td>Dieta ad alto contenuto di grassi TD.06415</td><td></td><td></td><td>45 kcal % di grassi, 36 kcal % di carboidrati e 19% kcal di proteine; 4,6 kcal/g</td></tr></tbody></table>

reintegrazione di droga in cerca nei topi utilizzando il paradigma di conditioned place preference

Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

Il presente protocollo descrive la preferenza di posto condizionata (CPP) come modello di ricaduta nella tossicodipendenza. In questo modello, gli animali sono addestrati prima di acquisire una preferenza di posto condizionata in un vano di droga-accoppiato, e dopo il test post-condizionata, eseguono diverse sessioni per estinguere la preferenza stabilita. Il CPP consente la valutazione degli effetti gratificanti condizionati dei suggerimenti relativi alla tutela dell'ambiente da farmaci. Quindi, l'estinto CPP può essere ripristinato robustamente dall'amministrazione non contingente di una dose di innesco della droga e dall'esposizione a stimoli stressanti. Entrambi i metodi verranno spiegati qui. Quando l'animale reinitiates la risposta comportamentale, è considerato una reintegrazione della ricompensa condizionata hanno avuto luogo.
I principali vantaggi di questo protocollo sono che è non invasivo, poco costoso e semplice con criteri di buona validità. Inoltre, permette lo studio di diverse manipolazioni ambientali, come lo stress o la dieta, che possa modulare la ricaduta nella droga che cercano di comportamenti. Tuttavia, una limitazione è che, se il ricercatore si propone di esplorare la motivazione ed effetti di rinforzo primari del farmaco, deve essere completato con le procedure di auto-amministrazione, quanto coinvolgono operante risposte degli animali.

In primo luogo, risultati rappresentativi dalla reintegrazione indotta da stress e adescamento sono mostrati nella Figura 7 utilizzando topi del maschio adulto OF1.
I dati nella Figura 7a-b che rappresenta il tempo trascorso nella droga-accoppiato comparti in pre- e Post-C prova sono stati analizzati con un misure ripetute ANOVA con giorni variabile ent...

Questo protocollo descrive la preferenza di posto condizionata (CPP) come modello di ricaduta. Questa procedura permette di misurare di ricaduta in animali da laboratorio, considerando l'impatto della droga-collegato di stimoli ambientali come desiderio e ricaduta nelle persone dedite di astensione è attualmente al centro dei programmi di trattamento di abuso di droga.

Reintegrazione di droga in Cerca nei topi utilizzando il paradigma di Conditioned Place Preference

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...

L'obiettivo generale di questa procedura è valutare il ripristino del comportamento di ricerca di farmaci negli animali da laboratorio considerando l'impatto dei segnali ambientali e dello stress associati al farmaco. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo delle tossicodipendenze, come il ruolo di diverse manipolazioni ambientali che possono modulare la ricaduta nella ricerca di droga. Il vantaggio principale di questa tecnica è che si ritiene che il ripristino della CPP rifletta la riattivazione del valore motivazionale incentivante degli stimoli di contesto abbinati al farmaco consistente nella ricomparsa del comportamento di approccio al contesto.Le implicazioni di questa tecnica si estendono all'etologia della ricaduta dei farmaci, perché è un modo utile e sensibile per valutare le diverse manipolazioni ambientali, che sono i principali fattori scatenanti della ricaduta umana. I nuovi a questo metodo avranno difficoltà perché il modello di reintegrazione è molto sensibile ai cambiamenti ambientali. Le condizioni della stanza e dell'ambiente devono rimanere costanti durante la procedura, specialmente con compagni del sesso opposto, rumori o condizioni

reinstatement-drug-seeking-mice-using-conditioned-place-preference

Research

Ricerca

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

Modelli animali di ricaduta, noto come le procedure di ripristino, sono stati ampiamente utilizzati per studiare il ruolo dello stress nella ricaduta alla ricerca di droga. Qui, segnaliamo su un metodo per indurre il ripristino della cocaina ricerca nei ratti di laboratorio attraverso l'esposizione acuta a mite, footshock elettrico intermittente.

Una procedura per lo studio della Footshock indotta Ripristino di cocaina Cerco nei ratti di laboratorio

In questo protocollo si descrive un metodo di apprendimento operante mediante stimoli sensoriali come rinforzo nel topo. Non richiede alcuna formazione precedente o restrizione alimentare, e permette lo studio del comportamento motivato, senza l'utilizzo di un rinforzo farmacologiche o naturali come il cibo.

Sensation operante in Cerco il mouse

Questo articolo viene descritto come microinject vettori virali nel cervello di topo e poi prova in un luogo climatizzato preferenza paradigma che comprende una fase di acquisizione, l'estinzione e la reintegrazione.

Microiniezione stereotassica di vettori virali che esprimono Cre ricombinasi per studiare il ruolo di geni bersaglio in cocaina condizionata place preference

Questo protocollo ha lo scopo di consentire ai ricercatori di condurre esperimenti progettati per testare questi aspetti della dipendenza utilizzando la preferenza di luogo condizionata e i saggi di sensibilizzazione comportamentale locomotoria.

Valutazione della cocaina indotta sensibilizzazione comportamentale e conditioned place preference nei topi

Cue la reattività è concettualizzata come sensibilità ai segnali collegati con esperienze di assunzione di droghe che contribuiscono alla brama e ricadono in esseri umani astinenti. Reattività di Cue viene modellata in ratti dalla misurazione orientamento attenzionale verso spunti droga-collegato che si traduce in un comportamento Appetitivo approccio in un test di reattività cue dopo il self-administration e costretto l'astinenza.

Un protocollo per la misurazione Cue reattività in un modello del ratto di disturbo da uso di cocaina

Qui, un protocollo di preferenza (CPP) di morfina condizionata posto è descritto per misurare l'incubazione di desiderio in ratti.

Un protocollo di Conditioned Place Preference per l'incubazione di Craving nei ratti di misura

I metodi qui descritti delineano una procedura utilizzata per invertire optogeneticamente la plasticità indotta dalla cocaina in un circuito comportamentale rilevante nei ratti. La stimolazione ottica sostenuta a bassa frequenza delle sinapsi talamo-amigdala induce depressione a lungo termine (LTD). La LTD indotta optogeneticamente in vivo in ratti con esperienza di cocaina ha determinato la successiva attenuazione della ricerca di droga motivata da spunti.

Usare l'optogenetica per invertire la neuroplasticità e inibire la ricerca di cocaina nei ratti

Viene descritta una procedura che dimostra una robusta ricaduta acuta indotta dalla privazione alimentare alla ricerca di eroina dopo l'astinenza imposta dalla punizione. Un modello di astinenza imposta dalla punizione è stato implementato con successo utilizzando il programma di catena cerca e prendi per l'autosomministrazione di eroina. I test per la ricerca di eroina vengono quindi eseguiti dopo 24 ore di stress da privazione alimentare.

Una procedura per studiare la ricaduta indotta dallo stress della ricerca di eroina dopo l'astinenza imposta dalla punizione

Si dimostra come una misura oggettiva può essere impiegato in gomma mano paradigma illusione largamente impiegato. Questa misura è ottenuto modificando il compito congruenza crossmodali ben consolidata. Questa attività permette lo studio dei processi multisensoriali che sono critici per modulazioni di rappresentazioni del corpo come nella illusione della mano di gomma.

La Task Congruenza crossmodali come un mezzo per ottenere una misura comportamentale Obiettivo della mano di gomma Illusion Paradigma

Una procedura per studiare la capacità di un contesto ambientale di alcol associato per attivare il rinnovamento dei comportamenti alcol-seeking nei ratti è descritto.

Una Procedura di osservare Context-indotta Rinnovo pavloviano condizionata alcol-seeking comportamento in Rats

Scopri il paradigma Conditioned Place Preference per studiare la ricerca di droga nei topi. Questo metodo valuta il reinstatement comportamentale e il ruolo dei segnali ambientali nella ricaduta.

Reintegrazione di droga in Cerca nei topi utilizzando il paradigma di Conditioned Place Preference

Esplora altri video