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DOI: 10.3791/57024-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Qui, presentiamo un protocollo per mostrare come cella fotoconversione è raggiunto attraverso l'esposizione di UV ad aree specifiche che esprimono la proteina fluorescente, Eos, in animali vivi.
L'obiettivo generale di questa tecnica di fotoconversione è quello di distinguere le singole cellule di un singolo animale da altre popolazioni di cellule fluorescenti. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave sullo sviluppo nel campo e permetterci di visualizzare la migrazione di singole cellule nel tempo. Il vantaggio principale di questa tecnica è che è minimamente invasiva e può essere utilizzata per marcare singole cellule o popolazioni più grandi.
Inoltre, l'utente può selezionare la regione specifica di interesse e convertire le foto dell'obiettivo desiderato. Dopo l'accoppiamento di pesce zebra transgenico maschio e femmina che esprimono una proteina fotoconvertibile e la raccolta delle uova secondo il protocollo di testo, utilizzare un microscopio da dissezione con una sorgente di luce a 488 nanometri e set di filtri GFP per esaminare 24 embrioni hpf. Usando un ago o una pinzetta, decoionare manualmente gli embrioni.
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