Name: Un modello sperimentale di sindrome metabolica indotta da dieta in coniglio: considerazioni metodologiche, sviluppo e valutazione (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 31 s
Description: Scopri come sviluppare un modello di sindrome metabolica indotta da dieta in conigli utilizzando un regime ad alto contenuto di grassi e saccarosio. Questo metodo consente di studiare il rimodellamento degli organi e testare nuove terapie.

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Questo lavoro è stato supportato dalla Generalitat Valenciana (GV2015-062), Universitat de València (UV-INV-PRECOMP14-206372) a MZ, Generalitat Valenciana (PROMETEOII/2014/037) e Instituto de Salud Carlos III-FEDER fondi (CIBERCV CB16/11/0486) per FJC.

Cura degli animali e i protocolli sperimentali utilizzati in questo studio rispettato UE direttiva 2010/63 sulla protezione degli animali utilizzati a fini scientifici e sono stati approvati dal comitato di uso (2015/VSC/pisello/00049) e istituti di cura degli animali.
Nota: Il protocollo è costituito dall'amministrazione cronica di una dieta ad alta percentuale di grassi, alto-saccarosio per 28 settimane e la valutazione dei componenti principali dei MetS. Abbiamo usato 11 conigli adulti maschio bianco di Nuova Zelanda (NZW) pesatura 4.39 ± 0,14 (s.d.) kg, che erano 20-22 settimane vecchie all'inizio del protocollo sperimentale. Essi sono stati ospitati in un ambiente con umidità (50 ± 5%) e ciclo di condizioni di temperatura (20 ± 1,5 ° C) controllata con una luce di 12 h. Le parole "chow" e la "dieta" può essere utilizzati indifferentemente nel passaggi del protocollo.
1. dieta amministrazione
<ol><li>
Ottenere o preparare diete
	<ol>
<li>Ottenere un commercialmente disponibili dieta grassa alta con olio di cocco idrogenato aggiunto (10%) e lardo (5%)19. Questa dieta fornirà 3,7 kcal·g-1.</li>
		<li>Preparare 5-15% soluzioni di saccarosio sciogliendo la quantità appropriata di saccarosio in acqua sterilizzata (ad es., 300 g di saccarosio per uso in magazzino di 2 L di una soluzione di saccarosio 15%). Una soluzione di 15% fornirà kcal·mL 0,6-1.</li>
		<li>Ottenere un commercialmente disponibili controllo dieta19, che fornisce 2,7 kcal·g-1.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Acclimatare gli animali per 4 settimane
	<ol>
<li>Nutrono ogni animale nel gruppo di controllo 120g di dieta di controllo ogni giorno. Fornire acqua ad libitum.</li>
		<li>Nutrire gli animali in MetS chow 250g di gruppo a partire con un controllo di 50% e 50% grassi chow, aumentando progressivamente a chow grassi 100% entro la fine della settimana 4. Nota: L'obiettivo sarebbe di ottenere: (i) controllo del 35% e 65% chow di grassi entro la fine della settimana 1; (ii) controllo il 25% e 75% chow di grassi entro la fine della settimana 2; (iii) 15% controllo e 85% chow grassi entro la fine della settimana 3. (iv) 100% chow grassi entro la fine della settimana 4.</li>
		<li>Dare animali in MetS gruppo acqua con 5% di saccarosio all'inizio e aumentare la concentrazione di saccarosio al 15% entro la fine della settimana 4th .</li>
		<li>Registrare l'assunzione giornaliera di chow e saccarosio soluzione per calcolare l'apporto calorico secondo valori forniti in 1.1.1. e 1.1.2.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Indurre il MetS (28 settimane)
	<ol>
<li>Nutri ogni animale nel gruppo di controllo 120g di controllo chow e acqua ad libitum al giorno.</li>
		<li>Nutrire gli animali nel gruppo di MetS 250 g di saccarosio di chow e 15% di grassi in acqua. Sostituire chow quotidianamente e la soluzione di saccarosio ogni terzo giorno.</li>
		<li>Pesare il restante chow e acqua al giorno per stimare l'assunzione quotidiana.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. valutazione morfologica
<ol><li>Misura peso corporeo degli animali su base settimanale.</li>
	<li>Misurare l'altezza, lunghezza, contorno addominalee lunghezza tibiae stimare BMI prima della somministrazione della dieta sperimentale ed alle settimane 14 e 28 in animali anestetizzati.<ol>
<li>Incannulare vena marginale dell'orecchio destro con un catetere monouso sterile (18-22 G) e iniettare propofol (mgkg 8-1) seguito da 1,5 mL di soluzione di NaCl 0,9%. Nel coniglio anestetizzato, eseguire le misure elencate nei passaggi successivi.</li>
		<li>Misurare l'altezza e la lunghezza. Mediante misurazione nastro, misurare e registrare la distanza dal naso al tallone in decubito laterale (lunghezza). Nella stessa posizione, prendere le distanze dallo acromion della spalla alla punta della zampa (altezza).</li>
		<li>Calcolare il Body mass index (BMI)20 come peso corporeo (kg) · [corpo lunghezza (m) × altezza (m)] -1.</li>
		<li>Posizionare il nastro di misurazione delicatamente intorno al contorno addominale e prendere una misura con l'animale in posizione supina.</li>
		<li>Misurare la lunghezza tibia dalla parte inferiore dell'articolazione del ginocchio all'inserzione del tendine di Achilles.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. il digiuno glicemia e Test di tolleranza al glucosio endovenoso (IVGTT)
Nota: Si consiglia di iniziare le procedure la stessa ora del giorno (cioè, 2-15).
<ol><li>Preparare una soluzione stock di glucosio (60%) con 60 g glucosio in 100 mL di soluzione di NaCl 0,9%.</li>
	<li>Veloce l'animale per 7 h (togliere cibo e mantenere acqua), quindi inserire il coniglio cosciente in un dispositivo di ritenuta in posizione prona. Preparare il misuratore di glucosio (inserire una nuova striscia nel misuratore) e prendere il primo campione dalla vena marginale dell'orecchio sinistro usando un bisturi per ottenere una goccia di sangue. Quindi toccare la goccia di sangue con i test strip e misura i livelli della glicemia utilizzando il misuratore di glucosio per determinare glycemia di digiuno.</li>
	<li>Incannulare vena marginale dell'orecchio destro con un catetere monouso (18-22 G) e iniettare un bolo di una soluzione di glucosio 60% (0,6 g·kg-1). Nota: Per preparare il bolo, aggiungere 1 mL/kg dello stock del glucosio.</li>
	<li>Prelevare campioni di sangue usando il lancet (una goccia di sangue) a 15, 30, 60, 90, 120 e 180 min dopo l'iniezione di glucosio e analizzarli con il misuratore di glucosio come in 3.2.</li>
	<li>Rimuovere il catetere monouso e pizzicare il sito di inserzione del catetere con una garza. Una volta che il sangue è coagulato, rimuovere la garza e controllare lo stato dell'animale.</li>
</ol>4. pressione sanguigna
<ol><li>Preparare il sistema di acquisizione, compresi un trasduttore di pressione, una siringa 10 mL con 0,9% NaCl, un rubinetto a tre vie, un amplificatore e un PC/laptop con il software di acquisizione (per la registrazione di pressione sanguigna).</li>
	<li>Impostare l'apparecchiatura. In primo luogo, posizionare il rubinetto a tre vie e la siringa nel trasduttore di pressione, tra il trasduttore e il catetere e collegare il trasduttore di pressione per l'amplificatore. Quindi collegare l'amplificatore al PC/laptop.</li>
	<li>Eseguire la calibrazione del trasduttore di pressione secondo le raccomandazioni del produttore.</li>
	<li>Metti l'animale cosciente in un dispositivo di ritenuta di coniglio in posizione prona. Scaldare l'orecchio prima di inserimento di una canula, poi applicare localmente un anestetico locale (2,5% lidocaina/prilocaina) nell'orecchio intorno al sito di inserimento. Picchiettare delicatamente la zona in cui viene eseguito il pacchetto vascolare di identificare facilmente l'arteria. Quindi inserire un catetere sterile (18-22 G) nell'arteria centrale orecchio sinistro. Allentare le restrizioni e permettere all'animale di stare tranquillo per 30 min.</li>
	<li>Registrare la pressione sanguigna continuamente per 20 min direttamente dal catetere arterioso, ponendo il trasduttore di pressione posizionato accanto all'animale a livello del cuore (frequenza di campionamento: 1 KHz, Vedi figura 5B). Nota: Per mantenere la pressione sanguigna (BP) registrazione libero da interferenze di coagulazione del sangue (BP segnale perde ampiezza o scompare), occorre fare un'iniezione di NaCl (0,9%). Utilizzando il rubinetto a tre vie, chiudere il circuito che va dal trasduttore al catetere, aprire il circuito che va dalla siringa al catetere e iniettare 1-2 mL. Questo rimuoverà i coaguli di sangue che si possono formare nel catetere. Quindi, aprire il circuito tra il trasduttore e il catetere e continuare la registrazione una volta che il segnale è stato recuperato.</li>
	<li>Una volta terminata la registrazione, rimuovere il catetere e pizzicare con una garza nel sito di inserzione del catetere per arrestare la perdita di sangue. Una volta che il sangue è coagulato, rimuovere la garza e controllare lo stato dell'animale.</li>
</ol>5. plasma misure
Nota: Si consiglia di iniziare le procedure la stessa ora del giorno (cioè, 2-15).
<ol><li>Veloce l'animale per 7 h (togliere cibo e mantenere acqua), quindi posizionare l'animale cosciente in un dispositivo di ritenuta in posizione prona e inserire un ago 21G nella vena marginale dell'orecchio sinistro. Una volta che il sangue comincia a gocciolare, eliminare la prima goccia e raccogliere i campioni di sangue in provette con EDTA fino al livello indicato nel tubo. Conservare i campioni su ghiaccio.</li>
	<li>Centrifugare i campioni di sangue a 1.500 x g, 15 min, 4 ° C. Dopo centrifugazione, il plasma usando una pipetta di aspirazione e preparare aliquote di 250 µ l.</li>
	<li>Analizzare i campioni freschi immediatamente. Parametri di controllo di base sono i seguenti: trigliceridi, colesterolo totale, HDL e LDL colesterolo. Nota: I campioni analizzati non appena devono essere conservati immediatamente in un congelatore a-80 ° C. Se ti interessa analizzare da campioni di plasma di glucosio nel sangue, il test del glucosio nel sangue dovrebbe utilizzare i tubi con fluoruro di ossalato invece di EDTA.</li>
</ol>

<ol><li>Cornier, M. A., Dabelea, D., Hernandez, T. L., Lindstrom, R. C., Steig, A. J., Stob, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Endocr+rev%22%5BJournal%5D)">The metabolic syndrome.</a> Endocr rev. 29 (7), 777-822 (2008).</li>
<li>Alberti, K. G., Zimmet, P., Shaw, J., Grundy, S. M. IDF Consensus Worldwide Definition of the Metabolic Syndrome. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.idf.org/e-library/consensus-statements.html">https://www.idf.org/e-library/consensus-statements.html</a> (2006).</li>
<li>Alberti, K. G., Eckel, R. H., Grundy, S. M., Zimmet, P. Z., Cleeman, J. I., Donato, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Harmonizing+the+metabolic+syndrome%3A+a+joint+interim+statement+of+the+International+Diabetes+Federation+Task+Force+on+Epidemiology+and+Prevention%3B+National+Heart%2C+Lung%2C+and+Blood+Institute%3B+American+Heart+Association%3B+World+Heart+Federation%3B+International+Atherosclerosis+Society%3B+and+International+Association+for+the+Study+of+Obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Harmonizing the metabolic syndrome: a joint interim statement of the International Diabetes Federation Task Force on Epidemiology and Prevention; National Heart, Lung, and Blood Institute; American Heart Association; World Heart Federation; International Atherosclerosis Society; and International Association for the Study of Obesity.</a> Circulation. 120 (16), 1640-1645 (2009).</li>
<li>Grundy, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-diabetes%2C+metabolic+syndrome%2C+and+cardiovascular+risk%5BTitle%5D)+AND+%22JACC%22%5BJournal%5D)">Pre-diabetes, metabolic syndrome, and cardiovascular risk.</a> JACC. 59 (7), 635-643 (2012).</li>
<li>Verkest, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+the+metabolic+syndrome+a+useful+clinical+concept+in+dogs%3F+A+review+of+the+evidence%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+J%22%5BJournal%5D)">Is the metabolic syndrome a useful clinical concept in dogs? A review of the evidence.</a> Vet J. 199 (1), 24-30 (2014).</li>
<li>Zhang, X., Lerman, L. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+the+Metabolic+Syndrome%3A+Contributions+of+Swine+Models%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Pathol%22%5BJournal%5D)">Investigating the Metabolic Syndrome: Contributions of Swine Models.</a> Toxicol Pathol. 44 (3), 358-366 (2016).</li>
<li>Wong, S. K., Chin, K. Y., Suhaimi, F. H., Fairus, A., Ima-Nirwana, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+metabolic+syndrome%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr+Metab+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Animal models of metabolic syndrome: a review.</a> Nutr Metab (Lond). 13, 65(2016).</li>
<li>Carroll, J. F., Dwyer, T. M., Grady, A. W., Reinhart, G. A., Montani, J. P., Cockrell, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertension%2C+cardiac+hypertrophy%2C+and+neurohumoral+activity+in+a+new+animal+model+of+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Hypertension, cardiac hypertrophy, and neurohumoral activity in a new animal model of obesity.</a> Am J Physiol. 271 (1 Pt 2), H373-H378 (1996).</li>
<li>Grooth, G. J., Klerkx, A. H., Stroes, E. S., Stalenhoef, A. F., Kastelein, J. J., Kuivenhoven, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+CETP+and+its+relation+to+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">A review of CETP and its relation to atherosclerosis.</a> J Lipid Res. 45 (11), 1967-1974 (2004).</li>
<li>Zarzoso, M., Mironov, S., Guerrero-Serna, G., Willis, B. C., Pandit, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ventricular+remodelling+in+rabbits+with+sustained+high-fat+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol+%28Oxf%29%22%5BJournal%5D)">Ventricular remodelling in rabbits with sustained high-fat diet.</a> Acta Physiol (Oxf). 211 (1), 36-47 (2014).</li>
<li>Filippi, S., Vignozzi, L., Morelli, A., Chavalmane, A. K., Sarchielli, E., Fibbi, B., Saad, F., Sandner, P., Ruggiano, P., Vannelli, G. B., Mannucci, E., Maggi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testosterone+partially+ameliorates+metabolic+profile+and+erectile+responsiveness+to+PDE5+inhibitors+in+an+animal+model+of+male+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sex+Med%22%5BJournal%5D)">Testosterone partially ameliorates metabolic profile and erectile responsiveness to PDE5 inhibitors in an animal model of male metabolic syndrome.</a> J Sex Med. 6 (12), 3274-3288 (2009).</li>
<li>Waqar, A. B., Koike, T., Yu, Y., Inoue, T., Aoki, T., Liu, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-fat+diet+without+excess+calories+induces+metabolic+disorders+and+enhances+atherosclerosis+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">High-fat diet without excess calories induces metabolic disorders and enhances atherosclerosis in rabbits.</a> Atherosclerosis. 213 (1), 148-155 (2010).</li>
<li>Fan, J., Watanabe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesterol-fed+and+transgenic+rabbit+models+for+the+study+of+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Atheroscler+Thromb%22%5BJournal%5D)">Cholesterol-fed and transgenic rabbit models for the study of atherosclerosis.</a> J Atheroscler Thromb. 7 (1), 26-32 (2000).</li>
<li>Yin, W., Yuan, Z., Wang, Z., Yang, B., Yang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+diet+high+in+saturated+fat+and+sucrose+alters+glucoregulation+and+induces+aortic+fatty+streaks+in+New+Zealand+White+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Exp+Diabetes+Res%22%5BJournal%5D)">A diet high in saturated fat and sucrose alters glucoregulation and induces aortic fatty streaks in New Zealand White rabbits.</a> Int J Exp Diabetes Res. 3 (3), 179-184 (2002).</li>
<li>Zhao, S., Chu, Y., Zhang, C., Lin, Y., Xu, K., Yang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diet-induced+central+obesity+and+insulin+resistance+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anim+Physiol+Anim+Nutr+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Diet-induced central obesity and insulin resistance in rabbits.</a> J Anim Physiol Anim Nutr (Berl). 92 (1), 105-111 (2008).</li>
<li>Helfenstein, T., Fonseca, F. A., Ihara, S. S., Bottos, J. M., Moreira, F. T., Pott, H. Jr, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+glucose+tolerance+plus+hyperlipidaemia+induced+by+diet+promotes+retina+microaneurysms+in+New+Zealand+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Exp+Pathol%22%5BJournal%5D)">Impaired glucose tolerance plus hyperlipidaemia induced by diet promotes retina microaneurysms in New Zealand rabbits.</a> Int J Exp Pathol. 92 (1), 40-49 (2011).</li>
<li>Ning, B., Wang, X., Yu, Y., Waqar, A. B., Yu, Q., Koike, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-fructose+and+high-fat+diet-induced+insulin+resistance+enhances+atherosclerosis+in+Watanabe+heritable+hyperlipidemic+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr+Metab+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">High-fructose and high-fat diet-induced insulin resistance enhances atherosclerosis in Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits.</a> Nutr Metab (Lond). 12, 30(2015).</li>
<li>Liu, Y., Li, B., Li, M., Yu, Y., Wang, Z., Chen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+of+cardiac+dysfunction+by+bilateral+surgical+renal+denervation+in+animals+with+diabetes+induced+by+high+fructose+and+high+fat+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Res+Clin+Pract%22%5BJournal%5D)">Improvement of cardiac dysfunction by bilateral surgical renal denervation in animals with diabetes induced by high fructose and high fat diet.</a> Diabetes Res Clin Pract. 115, 140-149 (2016).</li>
<li>Arias-Mutis, O. J., Marrachelli, V. G., Ruiz-Saurí, A., Alberola, A., Morales, J. M., Such-Miquel, L., Monleon, D., Chorro, F. J., Such, L., Zarzoso, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+an+experimental+model+of+diet-induced+metabolic+syndrome+in+rabbit%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of an experimental model of diet-induced metabolic syndrome in rabbit.</a> PLoS One. 12 (5), e0178315(2017).</li>
<li>Nelson, R. W., Himsel, C. A., Feldman, E. C., Bottoms, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+tolerance+and+insulin+response+in+normal-weight+and+obese+cats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Glucose tolerance and insulin response in normal-weight and obese cats.</a> Am J Vet Res. 51 (9), 1357-1362 (1990).</li>
<li>Staup, M., Aoyagi, G., Bayless, T., Wang, Y., Chng, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+Metabolic+Status+in+Nonhuman+Primates+with+the+Intravenous+Glucose+Tolerance+Test%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Characterization of Metabolic Status in Nonhuman Primates with the Intravenous Glucose Tolerance Test.</a> J Vis Exp. (117), e52895(2016).</li>
<li>Hall, J. E., do Carmo, J. M., da Silva, A. A., Wang, Z., Hall, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity-induced+hypertension%3A+interaction+of+neurohumoral+and+renal+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Obesity-induced hypertension: interaction of neurohumoral and renal mechanisms.</a> Circ Res. 116 (6), 991-1006 (2015).</li>
<li>Linz, D., Hohl, M., Mahfoud, F., Reil, J. C., Linz, W., Hübschle, T., Juretschke, H. P., Neumann-Häflin, C., Rütten, H., Böhm, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+remodeling+and+myocardial+dysfunction+in+obese+spontaneously+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiac remodeling and myocardial dysfunction in obese spontaneously hypertensive rats.</a> J Transl Med. 10 (10), 187(2012).</li>
<li>Sasser, T. A., Chapman, S. E., Li, S., Hudson, C., Orton, S. P., Diener, J. M., Gammon, S. T., Correcher, C., Leevy, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segmentation+and+measurement+of+fat+volumes+in+murine+obesity+models+using+X-ray+computed+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Segmentation and measurement of fat volumes in murine obesity models using X-ray computed tomography.</a> J Vis Exp. (62), e3680(2012).</li>
<li>Kawai, T., Ito, T., Ohwada, K., Mera, Y., Matsushita, M., Tomoike, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hereditary+postprandial+hypertriglyceridemic+rabbit+exhibits+insulin+resistance+and+central+obesity%3A+a+novel+model+of+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Hereditary postprandial hypertriglyceridemic rabbit exhibits insulin resistance and central obesity: a novel model of metabolic syndrome.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 26 (12), 2752-2757 (2006).</li>
<li>Shiomi, M., Kobayashi, T., Kuniyoshi, N., Yamada, S., Ito, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarction-prone+Watanabe+heritable+hyperlipidemic+rabbits+with+mesenteric+fat+accumulation+are+a+novel+animal+model+for+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Pathobiology%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarction-prone Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits with mesenteric fat accumulation are a novel animal model for metabolic syndrome.</a> Pathobiology. 79 (6), 329-338 (2012).</li>
<li>Hildrum, B., Mykletun, A., Hole, T., Midthjell, K., Dahl, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-specific+prevalence+of+the+metabolic+syndrome+defined+by+the+International+Diabetes+Federation+and+the+National+Cholesterol+Education+Program%3A+The+Norwegian+HUNT+2+study%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Age-specific prevalence of the metabolic syndrome defined by the International Diabetes Federation and the National Cholesterol Education Program: The Norwegian HUNT 2 study.</a> BMC Public Health. 7, 220(2007).</li>
</ol>

Gli autori dichiarano di non avere nessun concorrenti interessi finanziari.

L'istituzione di un appropriato modello sperimentale in grado di fornire un metodo più coerenza e affidabile per studiare lo sviluppo dei MetS, e inoltre è necessario comprendere i meccanismi di base che sottendono gli organi e sistemi che ritocca. Qui, descriviamo i metodi utilizzati per sviluppare un modello sperimentale pertinente del MetS indotta da dieta e come valutare i componenti principali di questo mazzo delle anomalie metaboliche e cardiovascolari che caratterizzano questo modello: obesità centrale, ipertensio...

Obesità e sindrome metabolica (MetS) sono diventati un problema crescente per la salute pubblica e la pratica clinica, dato loro prevalenza aumentata a causa dell'aumento di stili di vita sedentari e malsano mangiare abitudini1. Esistono diverse definizioni di MetS, ma la maggior parte di loro lo descrivono come un cluster di alterazioni cardiovascolari e metaboliche come l'obesità addominale, ridotte HDL e colesterolo elevato di LDL, i trigliceridi elevati, intolleranza al glucosio e ipertensione2 ,3,4. La diagnosi richiede che tre di questi cinque criteri sono presenti.
A causa di modelli animali, la ricerca di base è stato in grado di studiare i meccanismi alla base di processi patologici quali MetS. Parecchi modelli animali sono stati utilizzati, ma è di fondamentale importanza che il modello di scelta riproduce le principali manifestazioni cliniche della patologia umana (Figura 1). Con questo obiettivo, sono stati sviluppati modelli animali considerati simili agli esseri umani, principalmente canino e suina, (Vedi Verkest5 e Zhang &amp; Lerman6 per la revisione). Tuttavia, modelli canini non mostrano tutti i componenti di MetS, dato che lo sviluppo di aterosclerosi o iperglicemia nei cani attraverso la dieta è discutibile5. Suina modelli presentano la somiglianza più anatomica e fisiologica con gli esseri umani e offrono così significativo potere predittivo per delucidare i meccanismi alla base di MetS, ma la loro manutenzione e la complessità delle procedure sperimentali rendono l'uso di questo modello molto manodopera intensiva e costoso6.
D'altra parte, i modelli del roditore (topo e ratto), indotta da dieta spontanea e transgenici, sono stati ampiamente utilizzati in letteratura per lo studio dell'obesità, ipertensione e MetS e sue conseguenze patologiche in diversi organi e sistemi (Vedi Wong et al. 7 per la revisione). Anche se l'uso di questi modelli è più conveniente di Canino o suina, hanno importanti svantaggi. Infatti, a seconda del ceppo, gli animali sviluppano alcuni componenti dei MetS, mentre altri, come l'ipertensione, l'iperglicemia e il hyperinsulinemia sono assenti7. Inoltre, uno dei componenti principali dei MetS, l'obesità, in alcuni ceppi geneticamente modificati, non solo dipende da fattori connessi con la dieta, piuttosto è stato dimostrato che alcuni animali diventano obesi con l'assunzione di cibo normale o perfino ridotto8. Infine, topi e ratti mostrano una carenza naturale in proteina di trasferimento dell'estere del colesterile (CETP) e utilizzano HDL come i principali mezzi di trasporto del colesterolo, che li rende relativamente resistenti allo sviluppo di aterosclerosi. Si tratta di una differenza importante nel metabolismo dei lipidi con gli esseri umani, che esprimono CETP e trasportano il loro colesterolo principalmente in LDL9.
Al contrario, il coniglio di laboratorio rappresenta una fase intermedia tra l'animale più grande e modelli sperimentali del roditore. Così, il coniglio può essere presentato facilmente a diversi tipi di protocolli con requisiti minimi del personale e manutenzione, più facilmente manipolati in procedure sperimentali rispetto ai modelli animali più grandi. Inoltre, è stato segnalato che i conigli alimentati con una dieta ad alta percentuale di grassi hanno simili cambiamenti emodinamici e neuroumorali come esseri umani obesi8,10,11. Da notare, per quanto riguarda il metabolismo dei lipidi, il coniglio ha CETP abbondante nel plasma e loro profilo lipoproteico è LDL-ricco12, che è anche simile agli esseri umani. Inoltre, conigli sviluppano iperlipidemia abbastanza rapidamente dato che, come gli erbivori, sono molto sensibili al grasso dietetico13.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57117/57117fig1.jpg"> Figura 1: confronto dei modelli animali MetS. Vedi Verkest5, Zhang e Lerman6e Wong et al. 7 per la revisione. "<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg">" indica un vantaggio e "<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg">" indica una situazione di svantaggio. *controverso, dipende lo studio, *come rilevato fuori da Carroll et al. 8, alcuni ceppi geneticamente modificati diventano obesi indipendentemente dall'assunzione di cibo. CEPT: proteina di trasferimento dell'estere del colesterile. GTT: test di tolleranza al glucosio. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/57117/57117fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>
Per delucidare i meccanismi di base che sono alla base del rimodellamento patologico prodotto da MetS nei diversi organi e sistemi e per ottenere la comprensione di questa complessa patologia, la scelta di un modello sperimentale che riproduce i componenti principali del MetS umana è essenziale. Il coniglio può fornire molti vantaggi dati la sua somiglianza con la fisiologia umana e la convenienza di uso nei protocolli croniche e misurazioni. In questa linea, alcuni modelli di coniglio indotta da dieta utilizzando dieta ad alta percentuale di grassi e alto-saccarosio sono stati usati14,15,16,17,18,19 (tabella 1) e un caratterizzazione delle diverse componenti di MetS è di grande importanza quando si riferiscono un fenotipo con organo rimodellamento. Così, obiettivo principale di questo articolo è di descrivere i metodi per sviluppare un modello di MetS indotta da dieta in conigli che permette lo studio della relativa patofisiologia e impatto nel rimodellamento dell'organo.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td rowspan="2">Studio</td>
			<td rowspan="2">Dieta</td>
			<td rowspan="2">Durata</td>
			<td rowspan="2">Razza</td>
			<td colspan="4">Componenti di MetS</td>
		</tr>
<tr>
<td>OB</td>
			<td>HT</td>
			<td>HG</td>
			<td>DL</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">Yin et al (2002)14</td>
			<td>·    10% di grassi</td>
			<td rowspan="2">24 settimane</td>
			<td>·      NZW maschio</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="2">-</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
		</tr>
<tr>
<td>·    37% di saccarosio</td>
			<td>·      2 kg</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">Zhao et al (2007)15</td>
			<td>·    10% di grassi</td>
			<td rowspan="2">36 settimane</td>
			<td>·      JW maschio</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
		</tr>
<tr>
<td>·    30% di saccarosio</td>
			<td>·      16 settimane</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">Helfestein et al (2011)16</td>
			<td>·    10% di grassi</td>
			<td rowspan="3">24 settimane</td>
			<td>·      NZW maschio</td>
			<td rowspan="3"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="3">-</td>
			<td rowspan="3"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td rowspan="3"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
		</tr>
<tr>
<td>·    40% di saccarosio</td>
			<td>·      12 settimane</td>
		</tr>
<tr>
<td>·    0.5-0.1 colesterolo</td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">Ning et al (2015)17</td>
			<td>·    10% di grassi</td>
			<td rowspan="2">8-16 settimane</td>
			<td>·      WHHL maschio</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="2">-</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
		</tr>
<tr>
<td>·    30% fruttosio *</td>
			<td>·      12 settimane</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">Liu et al (2016)18</td>
			<td>·    10% di grassi</td>
			<td rowspan="2">48 settimane</td>
			<td>·      NZW maschio</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg"></td>
			<td rowspan="2">-</td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td rowspan="2"><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
		</tr>
<tr>
<td>·    30% di saccarosio</td>
			<td>·      12 settimane</td>
		</tr>
<tr>
<td>Arie-Mutis et al (2017)19</td>
			<td>·    15% di grassi</td>
			<td>28 settimane</td>
			<td>·      NZW maschio</td>
			<td><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
			<td><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg"></td>
		</tr>
</tbody></table>Tabella 1: MetS indotta da dieta coniglio modelli utilizzando dieta ad alta percentuale di grassi, alto-saccarosio. Il simbolo "<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq2.jpg">"indica assenza,"<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57117/57117eq1.jpg">" presenza, e "-" non valutato. * limitato. WHHL, Watanabe hiperlipidemic ereditabile conigli. JW, giapponese conigli bianchi. OB, obesità. HT, ipertensione. HG, iperglicemia. DL, dislipidemia.

<table><tbody><tr><td>Bilancia veterinaria</td><td>SOEHNLE</td><td>7858</td><td>Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale</td></tr><tr><td>Pala per alimentazione in alluminio</td><td>COPELE</td><td>10308</td><td>Pala per alimentazione in alluminio http://copele.com/es/herramientas/48-pala-para-pienso-de-aluminio.html</td></tr><tr><td>Bilancia</td><td>PCE Ib&eacute; rica</td><td>PCE-TB 15</td><td>Balance http://www.pce-iberica.es/medidor-detalles-tecnicos/balanzas/balanza-compacta-pce-bdm.htm</td></tr><tr><td>Filtro (20 cm diam.)</td><td>ZWILLING</td><td>39643-020-0</td><td>Colino https://es.zwilling-shop.com/Menaje-del-hogar/Menaje-de-cocina/Menaje-especial/Accesorios/Colador-20-cm-ZWILLING-39643-020-0.html</td></tr><tr><td>Ciotola</td><td>ZWILLING</td><td>40850-751-0</td><td>Scala https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale</td></tr><tr><td>Imbuto</td><td>BT Ingenieros</td><td>non disponibile</td><td>Imbuto http://www.bt-ingenieros.com/fluidos-y-combustibles/961-juego-de-4-embudos-de-plastico.html?gclid=EAIaIQobChMIuInui_y-1QIVASjTCh28Zwf-EAQYBSABEgK7xPD_BwE</td></tr><tr><td>Introcan Certo 22G blue</td><td>B Braun</td><td>4251318</td><td>Catetere endovenoso periferico http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-Propofol</td></tr> <tr><td>Lipuro 10 mg/ml flaconcino 20 ml</td><td>B Braun</td><td>3544761VET</td><td>Anestesia endovenosa generale http://www.bbraun-vetcare.es/producto/propofol-lipuro-1-FisioVet</td></tr> <tr><td>soluzione di siero 500ml</td><td>B Braun</td><td>472779</td><td>Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale</td></tr><tr><td>Askina Film Vet 1,25cm x 5m</td><td>B Braun</td><td>OCT13501</td><td>Plastic Plaster http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet</td></tr><tr><td>Askina Film Vet 2,50cm x 5m</td><td>B Braun</td><td>OCT13502</td><td>Plastic Plaster http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet</td></tr><tr><td>Injekt siringe 10ml luer</td><td>B Braun</td><td>4606108V</td><td>Siringa per iniezione-aspirazione di due corpi monouso http://www.bbraun-vetcare.es/producto/injekt-Seca</td></tr> <tr><td>201</td><td>seca</td><td>seca 201</td><td>Nastro ergonomico per la misurazione dei perimetri https://www.seca.com/es_es/productos/todos-los-productos/detalles-del-producto/seca201.html#referred</td></tr><tr><td>Sterican 21Gx1" - 0,8x25mm verde</td><td>B Braun</td><td>4657543</td><td>Ago ipodermico monouso http://www.bbraun-vetcare.es/producto/agujas-hipodermicas-sterican-CONTOURNEXT-Meter</td></tr> <tr><td></td><td>BAYER</td><td>84413470</td><td>Sistema di analisi della glicemia http://www.contournextstore.com/en/contour-next-meter-2</td></tr><tr><td>CONTOUR NEXT strisce reattive</td><td>BAYER</td><td>83624788</td><td>Strisce reattive per la glicemia http://www.contournextstore.com/en/contour-next-test-strips-100-ct-package</td></tr><tr><td>MICROLET NEXT PUNGIDITO</td><td>BAYER</td><td>6702</td><td>Pungidito http://www.contournextstore.com/en/new-microlet-next-lancing-device</td></tr><tr><td>MICROLET 2 Lancette Colorate</td><td>BAYER</td><td>81264857</td><td>Lancetta sterile ultrasottile per puntura capillare http://www.contournextstore.com/en/microlet2-colored-lancets-100s</td></tr><tr><td>Injekt 20ml luer siringe</td><td>B Braun</td><td>4606205V</td><td>Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale</td></tr><tr><td>Askina Mullkompressen 7,5x7,5cm - sterile</td><td>B Braun</td><td>9031219N</td><td>Pacchetti di garza sterili in buste http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-mullkompressen-esteril</td></tr><tr><td>Emla lidocaina/prilocaina</td><td>AstraZeneca</td><td>non disponibile</td><td>Anestetici locali https://www.astrazeneca.es/areas-terapeuticas/neurociencias.html</td></tr><tr><td>Introcan Certo 18G short</td><td>B Braun</td><td>4251342</td><td>Catetere endovenoso periferico http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-Introcan</td></tr> <tr><td>Certo 20G</td><td>B Braun</td><td>4251326</td><td>Catetere endovenoso periferico http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-Trasduttori</td></tr> di <tr><td>pressione sanguigna-MA1 72-4497</td><td>Harvard Apparatus</td><td>724497</td><td>Trasduttore per il monitoraggio della pressione sanguigna http://www.harvardapparatus.com/physiology/physiological-measurements/transducers/pressure-transducers/research-grade-pressure-transducers.html</td></tr><tr><td>PowerLab 2/26</td><td>AD Instruments</td><td>ML826</td><td>Amplificatore https://www.adinstruments.com/products/powerlab</td></tr><tr><td>LabChart ver. 6</td><td>AD Instruments</td><td>non disponibile</td><td>Software di acquisizione https://www.adinstruments.com/products/labchart</td></tr><tr><td>Animal Bio Amp</td><td>AD Instruments</td><td>FE136</td><td>Amplificatore https://www.adinstruments.com/products/bio-amps#product-FE136</td></tr><tr><td>K2EDTA 7,2 mg</td><td>BD</td><td>367861</td><td>Provette per prelievo di sangue http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=367861</td></tr><tr><td>Centrifuga</td><td>SciQuip</td><td>2-16KL</td><td>Centrifuga http://www.sigma-centrifuges.co.uk/store/products/refrigerated-sigma-2-16k-centrifuge/</td></tr> <tr><td>Eppendorf Riferimento 2, 100 &ndash; 1000 &mu; L</td><td>Eppendorf</td><td>4920000083</td><td>Pipette https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Pipeteo-44563/Pipetas-44564/Eppendorf-Reference2-PF-42806.html</td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock Tubes, 0,5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30121023</td><td>Tubes https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Puntas-tubos-y-placas-44512/Tubos-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html</td></tr><tr><td>NZW conigli (16-18 settimane)</td><td>Granja San Bernardo</td><td>non disponibile</td><td>Conigli bianchi della Nuova Zelanda http://www.granjasanbernardo.com/en/welcome/</td></tr> <tr><td>Saccarosio&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>S0389-5KG</td><td>Saccarosio per bere la soluzione http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s0389?lang=es&region=ES</td></tr><tr><td>Dieta per il controllo del mantenimento del coniglio</td><td>Ssniff</td><td>V2333-000</td><td>Dieta per il controllo http://www.ssniff.com/</td></tr> <tr><td>Dieta ricca di grassi per coniglio</td><td>Ssniff</td><td>S9052-E020</td><td>Dieta ricca di grassi http://www.ssniff.com/</td></tr> <tr><td>Portaconigli e bevitore</td><td>Sodispan</td><td>non disponibile</td><td>Griglia per conigli https://www.sodispan.com/jaulas-y-racks/racks-conejo-y-cobaya/</td></tr> <tr><td>Rabbit Stoppa</td><td>Zoonlab</td><td>3045601</td><td>http://www.zoonlab.de/en/index.html</td></tr></tbody></table>

un modello sperimentale di sindrome metabolica indotta da dieta in coniglio: considerazioni metodologiche, sviluppo e valutazione

An Experimental Model of Diet-Induced Metabolic Syndrome in Rabbit: Methodological Considerations, Development, and Assessment

Negli ultimi anni, l'obesità e sindrome metabolica (MetS) sono diventati un problema crescente per la salute pubblica e la pratica clinica, dato loro prevalenza aumentata a causa dell'aumento di malsane abitudini e stili di vita sedentari. Grazie a modelli animali, la ricerca di base può indagare i meccanismi alla base di processi patologici quali MetS. Qui, descriviamo i metodi utilizzati per sviluppare un modello di coniglio sperimentale di MetS indotta da dieta e sua valutazione. Dopo un periodo di acclimatazione, gli animali sono alimentati un alto contenuto di grassi (olio di cocco idrogenato di 10% e 5% lardo), alto-saccarosio (15% di saccarosio disciolto in acqua) dieta per 28 settimane. Durante questo periodo, diverse procedure sperimentali sono state effettuate per valutare i diversi componenti di MetS: morfologiche e misurazioni della pressione arteriosa, determinazione di tolleranza del glucosio e l'analisi di diversi markers plasmatici. Alla fine del periodo sperimentale, animali sviluppati l'obesità centrale, ipertensione lieve, pre-diabete e dislipidemia con HDL basso, alto LDL e un aumento dei livelli del trigliceride (TG), così che riproducono i componenti principali dei MetS umano. Questo modello cronico permette nuove prospettive per la comprensione dei meccanismi sottostanti nella progressione della malattia, l'individuazione di marcatori preclinici e clinici che consentono l'identificazione di pazienti a rischio, o anche il test di nuovo terapeutico approcci per il trattamento di questa patologia complessa.

MetS rappresenta un mazzo delle anomalie metaboliche e cardiovascolari cui studio può essere facilitata mediante l'uso di modelli sperimentali. Infatti, per delucidare i meccanismi alla base del rimodellamento patologico prodotto da MetS, la scelta di un modello sperimentale che opportunamente assomiglia la condizione umana ed è adatto alla ricerca è di importanza cruciale. Qui, presentiamo i metodi per indurre MetS nel coniglio usando una dieta ad alta contenuto di grassi saturi e saccar...

Descriviamo i metodi per sviluppare un modello sperimentale di indotta da dieta sindrome metabolica (MetS) in conigli utilizzando una dieta ad alta percentuale di grassi, alto-saccarosio. Animali hanno sviluppato l'obesità centrale, ipertensione lieve, pre-diabete e dislipidemia, così che riproducono i componenti principali dei MetS umano. Questo modello cronico permetterà acquisizione di meccanismi di fondo di conoscenza della progressione di malattia.

Un modello sperimentale di sindrome metabolica indotta da dieta in coniglio: considerazioni metodologiche, sviluppo e valutazione

In recent years, obesity and metabolic syndrome (MetS) have become a growing problem for public health and clinical practice, given their increased ...

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di sviluppare e caratterizzare un modello di sindrome metabolica nei conigli utilizzando una dieta ricca di grassi e saccarosio, che è di grande importanza quando si associa un fenotipo al rimodellamento degli organi. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della fisiopatologia, come la comprensione del rimodellamento degli organi e della progressione della malattia, il rilevamento di marcatori paraclinici e clinici per identificare i pazienti a rischio o la sperimentazione di nuovi approcci terapeutici. Il coniglio può fornire molti vantaggi rispetto ad altri modelli animali, tra cui murino, canino o suino, data la sua somiglianza con la fisiologia umana e l'accessibilità dell'uso nei protocolli e nelle misurazioni croniche.A dimostrare questa procedura sarà Oscar Arias, dottorando del nostro laboratorio. Per acclimatare gli animali alla loro dieta, somministrare a ciascun animale del gruppo di controllo 120 grammi di dieta di controllo al giorno per quattro settimane e fornire acqua ad libitum. Nutrire gli animali del gruppo MetS con 250 grammi di cibo iniziando con il 50% di controllo e il 50% di cibo ad alto contenuto di grassi.Quindi, aumenta progressivamente la dieta fino a mangiare cibi ricchi di grassi al 100% entro la fine della quarta settimana. Inoltre, somministrare agli animali del gruppo MetS acqua con il 5% di saccarosio all'inizio e aumentare la concentrazione di saccarosio al 15% entro la fine della quarta settimana. Registra l'assunzione giornaliera di soluzione di cibo e saccarosio per calcolare l'apporto calorico.Una volta che gli animali si sono acclimatati alla loro dieta, somministrare a ciascun animale del gruppo di controllo 120 grammi di cibo di controllo e annaffiare ad libitum ogni giorno. Nutrire gli animali del gruppo MetS con 250 grammi di cibo ad alto contenuto di grassi e il 15% di saccarosio in acqua. Sostituisci il cibo ogni giorno e la soluzione di saccarosio ogni tre giorni.Pesare quotidianamente il cibo e l'acqua rimanenti per stimarne l'assunzione giornaliera. Per effettuare la valutazione morfologica, pesare ogni animale su base settimanale. Prima della somministrazione della dieta sperimentale e alle settimane 14 e 28, anestetizzare l'animale utilizzando un catetere sterile monouso per incannulare la vena marginale dell'orecchio destro.Quindi, iniettare otto milligrammi per chilogrammo di propofol, seguiti da 1,5 ml di soluzione di cloruro di sodio allo 0,9%. Una volta confermata l'anestesia, posizionare l'animale in posizione di decubito laterale e utilizzare un metro a nastro per misurare la distanza dal naso al tallone. Registra questa misura come lunghezza.Con l'animale nella stessa posizione, misurare la distanza dall'acromion nella spalla alla punta della zampa e registrarla come altezza. Ora, con l'animale in posizione supina, posiziona delicatamente il metro attorno al contorno addominale e prendi una misurazione. Quindi misurare la lunghezza tibiale dalla parte inferiore dell'articolazione del ginocchio all'inserzione del tendine d'Achille.Preparare una soluzione madre di glucosio al 60% con 60 grammi di glucosio in 100 millilitri di cloruro di sodio allo 0,9%. Lasciare che gli animali digiunino con solo acqua per sette ore. Quindi, per determinare la glicemia a digiuno, posizionare un coniglio cosciente in un sistema di contenzione in posizione prona.Inserire una nuova striscia in un glucometro, quindi utilizzare una lancetta sulla vena dell'orecchio marginale sinistro per ottenere una goccia di sangue e toccare la goccia sulla striscia reattiva. Utilizzare il glucometro per misurare il livello di glucosio nel sangue. Con un catetere monouso, incannulare la vena marginale dell'orecchio destro e iniettare un bolo di una soluzione di glucosio al 60%.Utilizzare la lancetta come prima per prelevare campioni di sangue a 15, 30, 60, 90, 120 e 180 minuti dopo l'iniezione di glucosio e utilizzare il glucometro per analizzarli. Rimuovere il catetere monouso e utilizzare una garza per pizzicare il sito di inserimento del catetere. Una volta coagulato il sangue, rimuovere la garza e controllare lo stato dell'animale.Per la registrazione della pressione sanguigna, preparare il sistema di acquisizione che include un trasduttore di pressione, una siringa da 10 millilitri con cloruro di sodio allo 0,9%, un rubinetto a tre vie, un amplificatore e un PC portatile con il software di acquisizione. Per configurare l'apparecchiatura, posizionare il rubinetto a tre vie e la siringa nel trasduttore di pressione tra il trasduttore nel catetere e collegare il trasduttore di pressione all'amplificatore. Quindi, collegare l'amplificatore al PC portatile.Posizionare l'animale cosciente che un coniglio trattiene in posizione prona. Riscaldare l'orecchio prima dell'incannulamento, quindi applicare localmente un anestetico locale nell'orecchio intorno al sito di inserimento. Picchiettare delicatamente l'area in cui scorre il pacchetto vascolare per identificare facilmente l'arteria.Quindi inserire un catetere sterile nell'arteria centrale dell'orecchio sinistro. Ora, allenta le restrizioni e lascia che l'animale rimanga tranquillo per 30 minuti. Posizionare il trasduttore di pressione accanto all'animale all'altezza del cuore e registrare la pressione sanguigna continuamente per 20 minuti, direttamente dal catetere arterioso.Una volta terminata la registrazione, rimuovere il catetere e utilizzare una garza per pizzicare il sito di inserimento del catetere per arrestare la perdita di sangue. Una volta coagulato il sangue, rimuovere la garza e controllare lo stato dell'animale. Per effettuare le misurazioni del plasma, lasciare che gli animali digiunino con acqua solo per sette ore.Quindi posizionare un animale cosciente in un sistema di contenzione in posizione prona e inserire un ago sterile calibro 21 nella vena marginale dell'orecchio sinistro. Una volta che il sangue inizia a gocciolare, scartare la prima goccia e raccogliere i campioni di sangue in provette EDTA fino al livello indicato nella provetta. Quindi conservare i campioni in ghiaccio.Centrifugare i campioni di sangue a 1500 G e quattro gradi Celsius per 15 minuti. Dopo la centrifugazione, utilizzare una pipetta per raccogliere il plasma e preparare aliquote da 250 microlitri. Analizza immediatamente i campioni freschi per il colesterolo totale, HDL, LDL e trigliceridi.Come mostrato in questa tabella, il peso dei conigli nel gruppo MetS è aumentato progressivamente con la dieta ricca di grassi fino alla fine del protocollo sperimentale. In questo grafico è illustrato il comportamento dell'assunzione di energia e le sue fluttuazioni, che vanno da 250 a 815 chilocalorie nel gruppo MetS. In questo grafico è rappresentato il contributo relativo delle diverse fonti di energia.Ci sono periodi critici nelle settimane 14 e 28, perché, dato lo stress prodotto dalle procedure sperimentali, i conigli potrebbero diminuire l'assunzione di cibo e acqua. Alla settimana 14 si osserva una lieve iperglicemia, che raggiunge un plateau, e mantiene valori simili alla settimana 28. L'area sotto la curva aumenta anche nel gruppo MedS.L'ipertensione è strettamente e direttamente correlata alla gravità dell'obesità. I conigli alimentati con una dieta ricca di grassi e saccarosio per 28 settimane hanno mostrato un aumento della pressione arteriosa sistolica, diastolica e media già alla settimana 14, e questo aumento della pressione sanguigna viene mantenuto alla settimana 28. Infine, in questo modello cronico, è stata osservata un'alterazione del profilo lipidico già alla settimana 14, e questa alterazione è rimasta stabile fino alla settimana 28.Ciò includeva un aumento dei trigliceridi e delle LDL, una diminuzione delle HDL e nessun cambiamento nel colesterolo totale negli animali MedS rispetto ai controlli in entrambi i punti temporali. Utilizzando questo modello cronico, altri studi potrebbero essere condotti per rispondere a ulteriori domande, come il modo in cui la patologia si sta trasformando in modo simile nella sindrome metabolica umana, consentendo nuove prospettive nei meccanismi fisiopatologici coinvolti nella progressione della malattia. Questo modello sperimentale ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della fisiologia interattiva e della fisiopatologia per esplorare i meccanismi alla base del rimodellamento degli organi.L'individuazione di biomarcatori per identificare i pazienti a rischio, o la sperimentazione di nuovi approcci terapeutici per il trattamento della sindrome metabolica.

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Qui descriviamo, passo dopo passo, un protocollo dettagliato per l'esecuzione di ecocardiografia nel modello del coniglio. Mostriamo come ottenere correttamente le diverse viste ecocardiografiche e i piani di imaging, così come le diverse modalità di imaging disponibili in un sistema di ecocardiografia clinica abitualmente utilizzato nei pazienti umani e veterinari.

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La registrazione continua della pressione arteriosa consente l'indagine degli impatti di vari parametri emodinamici. Questo rapporto dimostra l'applicazione del monitoraggio continuo della pressione arteriosa in un ampio modello animale di ictus ischemico per la determinazione della fisiopatologia dell'ictus, l'impatto di diversi fattori emodinamici e la valutazione di nuovi approcci terapeutici.

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Il presente studio dimostra un modello animale altamente riproducibile di ischemia miocardica regionale acuta e danno da riperfusione nei conigli utilizzando una mini-toracotomia sinistra per i casi di sopravvivenza o una sternotomia della linea mediana per i casi di non sopravvivenza.

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Un modello sperimentale di sindrome metabolica indotta da dieta in coniglio: considerazioni metodologiche, sviluppo e valutazione (Video) | JoVE Journal

Un modello sperimentale di sindrome metabolica indotta da dieta in coniglio: considerazioni metodologiche, sviluppo e valutazione

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