23 febbraio 2018
Presentiamo un metodo efficiente per studiare lens alloggio utilizzando una barella lente manuale. Il protocollo imita fisiologico alloggi tirando il zonules collegato intorno alla capsula di obiettivo, quindi, che allunga la lente.
L'obiettivo generale di questa tecnica è quello di fornire un metodo più fattibile ed economico per studiare accuratamente la biomeccanica delle lenti. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della biomeccanica oculare su come il cristallino cambia con la perdita di accomodazione e l'insorgenza della presbiopia. Il vantaggio principale di questa tecnica è che monitora accuratamente la capacità dell'obiettivo di adattarsi a un basso costo del materiale e un'elevata robustezza procedurale.
Dopo aver ottenuto il campione di occhio, afferrare saldamente il lato dell'occhio e utilizzare una lama di rasoio per praticare una piccola incisione lungo il lato a tre millimetri di distanza dalla cornea abbastanza profonda da raggiungere il vitreo. Usando le forbici sterilizzate, continua con cura l'incisione intorno alla circostanza dell'occhio usando la pinza per rimuovere il tessuto oculare posteriore una volta che è stato asportato. Isolare il cristallino, le zonule e il vitreo attaccato usando una pinza secondo necessità per scollegare le zonule e il corpo ciliare dai muscoli ciliari mantenendo la connessione con il cristallino.
Quindi rimuovere il vitreo in eccesso in modo che la lente possa essere appoggiata sulla barella manuale della lente. Fare attenzione a mantenere intatto il cristallino, le zonule e una quantità minima di vitreo mentre si rimuove il vitreo in eccesso. Per assemblare la barella, inserire i fondi delle scarpe da 10 millimetri e le parti superiori delle scarpe corrispondenti nella piastra inferiore della barella in modo che rimanga uno spazio di cinque millilitri tra la parete posteriore della rientranza della scarpa e la scarpa stessa.
Utilizzando una pinza curva, posizionare la lente estratta a faccia in su al centro della piastra inferiore in modo che le scarpe sostengano la lente sul foro centrale. Agganciare la parte superiore corrispondente delle scarpe in posizione, tagliando solo le zonule e il vitreo. Quindi inserire le piastre nella custodia della piastra e la vite del tappo nel foro situato sul lato della piastra inferiore e inserire la custodia della piastra nella base.
Per misurare l'obiettivo, posizionare un sistema di imaging direttamente sopra l'apparecchio alla distanza appropriata per ottenere le immagini e posizionare un righello nel campo visivo per il dimensionamento e il ridimensionamento accurati delle immagini in post-elaborazione. Quindi, ruotare con decisione ma senza intoppi la chiave in senso orario per allungare l'obiettivo e ottenere immagini dell'obiettivo. Per garantire la coerenza da campione a campione, è essenziale ruotare la chiave in modo fluido mentre si allunga l'obiettivo.
Quando tutte le immagini sono state acquisite, ruotare la chiave in senso antiorario per riportare il campione al suo stato di riposo e ottenere le immagini dello stato di riposo finale della lente. Per analizzare i dati, caricare le immagini sul software di analisi delle immagini appropriato e utilizzare il punto per selezionare almeno 40 punti attorno alla circonferenza dell'obiettivo. Nel menu Analizza, selezionare Misura per ottenere la posizione di ogni punto selezionato e adattare i punti di posizione con MathLab per ottenere un raggio e un chi quadrato dell'adattamento.
Quindi utilizzare il righello fotografato per convertire il raggio dei pixel e l'errore in metriche ed eseguire l'analisi del test t a due code accoppiato per confrontare un singolo obiettivo prima e dopo l'allungamento. In questa analisi rappresentativa di 10 campioni di occhi suini, le lenti hanno dimostrato un aumento di oltre il 4% rispetto ai loro raggi originali, convalidando il protocollo di allungamento delle lenti con coerenza e accuratezza in letteratura. Quando sono state testate le lenti umane, è stata osservata una drastica diminuzione dell'elasticità della lente in correlazione con l'età del donatore, come previsto da precedenti studi sull'elasticità della lente.
Una volta padroneggiata, questa tecnica di allungamento delle lenti può essere completata in meno di 10 minuti se eseguita correttamente. Durante l'allungamento della lente, è importante ricordare di fornire una forza di strappo continua fino al raggiungimento della vite di arresto per ridurre al minimo la variabilità tra i campioni. Utilizzando questa tecnica manuale di allungamento delle lenti, possiamo monitorare la rigidità delle lenti di pazienti con una varietà di patologie, inclusi pazienti con diabete, cataratta o presbiopia.
Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della biomeccanica oculare per esplorare le proprietà del cristallino durante le fasi di perdita di accomodazione e/o insorgenza della presbiopia. Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come utilizzare un tenditore manuale per ottenere preziose informazioni biomeccaniche sull'obiettivo. Non dimenticare che lavorare con tessuti biologici può essere estremamente pericoloso e che durante l'esecuzione di questa procedura è necessario prendere sempre precauzioni come indossare un abbigliamento da laboratorio adeguato e sterilizzare tutti gli strumenti prima dell'uso.
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