6 marzo 2018
Le applicazioni pratiche e le prestazioni dei metodi per la generazione di campioni di tessuto rappresentativo di porcini modelli animali per un ampio spettro di analisi a valle nella biobanca progetti sono dimostrati, tra cui volumetria, campionamento casuale sistematico, e trattamento differenziale dei campioni di tessuto per i tipi di analisi qualitative e quantitative morfologiche e molecolari.
Questo video mostra due tecniche chiave per il campionamento e l'elaborazione di campioni di tessuto suino della biobanca. La tecnica di sommersione stima in modo affidabile il volume totale di organi e tessuti e la tecnica dell'orientatore genera sezioni di tessuto isotropo casuali per una stima imparziale dei parametri morfologici quantitativi. Il vantaggio principale della tecnica di immersione per la determinazione della densità dei tessuti è che può essere applicata a qualsiasi tipo di tessuto e che produce risultati affidabili sia per campioni piccoli che per campioni di grandi dimensioni.
I vantaggi della tecnica dell'orientatore sono che è altamente efficiente e funziona anche con campioni di tessuto di grandi dimensioni. Per iniziare la volumetria per un organo di grandi dimensioni, asportare un pezzo di tessuto di dimensioni adeguate dall'organo. Tamponare accuratamente il campione con un tovagliolo di carta per rimuovere il sangue in eccesso e il liquido tissutale.
Quindi pesare il campione su una bilancia di precisione e registrare il peso del campione. Aggiungere lo 0,9% di soluzione salina in un becher di dimensioni adeguate. Non riempire completamente il becher per evitare che trabocchi durante l'emersione dei tessuti.
Posizionare il becher sulla bilancia, quindi immergere una pinza o un portacampione autocostruito nella soluzione salina fino a quando il segno sulla pinza o sul supporto del campione raggiunge il liquido. Quindi, azzerare la visualizzazione della scala. Fissare con cautela il campione di tessuto alla pinza o al supporto del campione e immergere completamente il campione nella soluzione salina fino a raggiungere la posizione contrassegnata.
Per registrare misure di densità affidabili, è importante assicurarsi che il campione sia completamente immerso ed evitare qualsiasi contatto del campione sommerso con le pareti interne o il fondo del becher. Tenendo il campione in posizione, registrare il peso visualizzato sulla bilancia. Utilizzare questa misura e la densità della soluzione salina a temperatura ambiente per calcolare il volume del campione.
Quindi calcolare la densità del campione di tessuto dal peso del campione e dal suo volume. Per organi e tessuti di grandi dimensioni, come questo rene, eseguire misurazioni ripetute con più campioni e calcolare la densità media dalle singole misurazioni. Per piccoli campioni e piccoli organi misurati in totale, come la ghiandola pituitaria, ripetere la misurazione tre volte prima di calcolare la densità media degli organi dai singoli valori di misurazione.
Infine, calcola il volume totale dell'organo, del tessuto o del compartimento dell'organo dal suo peso e dalla sua densità. Posizionare un campione di tessuto fisso su una stampa di un cerchio equiangolare con un bordo parallelo alla direzione da zero a 180 gradi. Quindi usa una tabella numerica casuale per determinare un angolo casuale.
Trova i segni corrispondenti sulla scala del cerchio equiangolare. Usando questi segni, tagliare una sezione attraverso il campione con il piano di sezione orientato parallelamente alla direzione dell'angolo casuale indicato sulla scala del cerchio equiangolare e una verticale rispetto alla superficie di riposo del campione. Posizionare il blocco di tessuto con la superficie della sezione rivolta verso il basso su un cerchio pesato a coseno.
Con il bordo della superficie di appoggio posizionato parallelamente alla direzione uno-a-uno. Ora taglia una nuova sezione attraverso il campione con un angolo casuale determinato utilizzando la tabella dei numeri casuali. Il piano di sezione risultante è una sezione casuale uniforme isotropa.
Questa tabella mostra le densità rappresentative di diversi tessuti e organi suini determinate utilizzando la tecnica della sommersione. La maggior parte dei tessuti suini presenta valori di densità leggermente superiori a quelli riferiti alla densità dell'acqua. Mentre i tessuti che nuotano in soluzione salina, come ad esempio il tessuto adiposo, mostrano densità inferiori a uno.
Questa figura mostra quattro sezioni IUR rappresentative di miocardio ventricolare sinistro suino preparate con la tecnica dell'orientatore. Notare gli angoli di taglio modificati nelle diverse sezioni IUR. Una volta padroneggiata, la tecnica di immersione per la determinazione della densità dei tessuti può essere eseguita in pochi minuti.
Se viene eseguito correttamente. Le sezioni casuali di tessuto isotrope uniformi generate con la tecnica dell'orientatore sono adatte per la stima di qualsiasi parametro morfologico quantitativo utilizzando opportuni metodi di analisi stereologica. musica digitale.
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Questo video dimostra due tecniche chiave per il campionamento e l'elaborazione di campioni di tessuto suino da biobanca. La tecnica di immersione stima il volume totale dell'organo e del tessuto, mentre la tecnica dell'orientatore genera sezioni di tessuto isotrope casuali per un'analisi morfologico quantitativa non di parte.
Standardized sampling and processing of porcine biobank tissues directly impact the reproducibility and translational value of preclinical models in biopharma R&D. Reliable volumetric and morphological data from limited, high-value animal models enable robust cross-study comparisons and support predictive confidence in early discovery. These validated techniques underpin portfolio decisions by ensuring specimen quality for downstream molecular and quantitative analyses.
These sampling and processing methods position porcine biobank tissues as a foundational resource from early discovery through preclinical research, supporting hypothesis testing, assay development, and translational studies.