Name: Impianto degli innesti vascolari elettrofilate con struttura ottimizzata in un modello del ratto (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-27T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 46 s
Description: Impara a impiantare innesti vascolari elettrofilati con struttura ottimizzata in un modello del ratto. Questo metodo consente di valutare le prestazioni a lungo termine e la rigenerazione vascolare in vivo.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Questo lavoro è stato sostenuto finanziariamente da progetti NSFC (81522023, 81530059, 91639113, 81772000, 81371699 e 81401534).

L'uso di animali da esperimento è stato approvato dal animale esperimenti etico Comitato di Nankai University e svolte in conformità con la guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio.
1. fabbricazione di innesti elettrofilate PCL
Nota: Nel presente documento, una tecnica di elettrofilatura è stata utilizzata per fabbricare gli innesti vascolari.
<ol><li>Preparare soluzioni PCL di 25 wt % e 10% in peso, sciogliendo PCL in una miscela di metanolo e cloroformio, rispettivamente, (rapporto volume 1:5), a temperatura ambiente (TA) per 12 h.</li>
	<li>Caricare la soluzione PCL in una siringa di vetro da 10 mL.</li>
	<li>Posizionare la siringa con un ago 21G.</li>
	<li>Posizionare il mandrino in acciaio inox (2 mm di diametro, 25 cm di lunghezza) lo strumento di raccolta.</li>
	<li>Per gli innesti più spessa-fibra, utilizzare la soluzione PCL del 25% in peso, la distanza di lavoro di 17 cm dalla punta dell'ago al collezionista, portata di 8 mL/h e la tensione di 11 kV come i parametri di elettrofilatura. Per gli innesti di diluente-fibra, utilizzare la soluzione PCL di 10% in peso, distanza di lavoro di 20 cm dalla punta dell'ago al collezionista, una portata di 2 mL/h e la tensione di 18 kV come i parametri di elettrofilatura.</li>
	<li>Assicurare che gli innesti ottenuti siano immessi nel vuoto durante la notte per rimuovere il solvente residuo. Sterilizzare tutti gli strumenti prima della procedura e mantenere asettiche.</li>
	<li>Prima dell'impianto, è necessario disinfettare gli innesti di immergendole in 10 mL di etanolo al 75% per 30 min e poi esporli ai raggi UV durante la notte.</li>
	<li>Misure di dimensione del poro e fibra: calcolare il diametro medio della fibra utilizzando software ImageJ basato sulla scansione immagini di microscopia elettronica (SEM).</li>
	<li>Prove meccaniche dei ponteggi:<ol>
<li>Tagliare i ponteggi tubolari in sezioni di 3 mm di lunghezza con una lama di rasoio. Misurare lo spessore degli scaffold utilizzando un micrometro.</li>
		<li>Posizionare i ponteggi tubolari su una macchina con una capacità di carico di 100 N. prove di trazione</li>
		<li>Fissare i ponteggi con un 1 mm di distanza inter-morsetto e tirare longitudinalmente ad un tasso di 10 mm/min fino alla rottura. Misurare la resistenza alla trazione e allungamento a rottura. Calcolare il modulo di Young della regione lineare iniziale (fino al 5% di deformazione) della curva sforzo-deformazione.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. ratto Aorta addominale l'impianto modello
Nota: Tutti i materiali e gli strumenti utilizzati nella chirurgia sono sterili. Durante l'intervento, assicurarsi che l'operatore indossa una maschera di garze e guanti sterili per evitare le infezioni. Garantire che la temperatura ambiente è mantenuta in 27-30 ° C per mantenere la temperatura del corpo animale. Seguire le linee guida locali IACUC per quanto riguarda l'analgesia.
<ol><li>Utilizzare i ratti maschii di Sprague Dawley pesano 240-270 g come destinatari dell'innesto vascolare. Garantire che il ratto ha digiunato 24 h prima dell'intervento chirurgico. Lo scopo del digiuno ratti per 24 h è a vuoto le feci nel tratto intestinale, sufficientemente, quindi allargare orizzonte dell'operatore.</li>
	<li>Sul retro del collo del ratto di afferrare e tenere la testa verso il basso, inserire l'ago di springe nella cavità addominale dell'addome più basso. Indurre il ratto per anestesia con cloralio idrato (330 mg/kg) tramite un'iniezione intraperitoneale.</li>
	<li>Confermare amputate adeguata facendo in modo che il ratto ha rilassato i muscoli e la respirazione costante. Posto il ratto sotto il microscopio operatorio in posizione supina.</li>
	<li>Applicare unguento oftalmico IFP petrolato sugli occhi per prevenire la secchezza mentre sotto anestesia. Amministrare l'anticoagulazione (100 UI/kg) con soluzione fisiologica eparinizzata (50 UI/mL) di iniezione della vena della coda prima della chirurgia.</li>
	<li>Radersi la pelliccia nella parete addominale anteriore con una lama di rasoio e pulire la pelle con soluzione di iodio e alcool medico soluzione.</li>
	<li>Eseguire un'incisione laparotomia del midline con forbici chirurgiche e garantire che l'incisione è circa 4-5 cm di lunghezza e quindi esporre la cavità addominale.</li>
	<li>Ritrarre e avvolgere l'intestino con una garza inumidita con soluzione fisiologica preferenzialmente.</li>
	<li>La dissezione dell'aorta addominale con attenzione.</li>
	<li>Identificare e legare tutti i piccoli rami utilizzando suture in nylon monofilamento di 9-0.</li>
	<li>Morsetto della sezione isolata (fino a 1 cm di lunghezza) dell'aorta utilizzando due pinze vascolari. L'aorta può rimanere bloccato per 20-30 min.</li>
	<li>Transetto dell'aorta addominale tra due morsetti utilizzando micro-forbici per creare luoghi anastomotic.</li>
	<li>Lavare le due estremità dell'aorta con soluzione fisiologica eparinata (50 UI/mL) per rimuovere i residui di sangue.</li>
	<li>Staccare il adventitia utilizzando micro-forbici.</li>
	<li>Anastomotizzare l'innesto con diametro interno di 2 mm e 1 cm di lunghezza per aorta addominale del ratto con un modello di figura di otto sutura con punti di sutura di 9-0 monofilamento in nylon.</li>
	<li>In primo luogo, costruire quattro anastomosi secondo la sequenza di 9, 3, 12 e 6 posizioni sul lato prossimale, quindi anastomotizzare i bordi tagliati in 4 punti di sutura tra due punti di sutura. Dopo aver terminato la sutura prossimale, suturare il lato distale con lo stesso metodo. Nota: Ogni punto è necessario affinché che il lato nativo è leggermente incorporato nell'innesto.</li>
	<li>Rimuovere il morsetto distale per permettere al sangue di fluire nell'innesto, quindi rimuovere il morsetto prossimale.</li>
	<li>Premere le estremità della sutura per fermare l'emorragia utilizzando un batuffolo di cotone sterile o una piccola garza-spugna. Premere per circa 3 minuti, finché l'emostasi.</li>
	<li>Restituire l'intestino nella cavità addominale.</li>
	<li>Sciacquare la cavità addominale utilizzando soluzione fisiologica tiepida con gentamicina (320 U/mL).</li>
	<li>Cucire la parete addominale utilizzando una sutura in Nylon 3-0 nello strato del muscolo e la pelle, rispettivamente.</li>
	<li>Luogo il ratto in una gabbia pulita ed asciutta e mettere un rilievo di riscaldamento sotto la gabbia per mantenere la temperatura corporea degli animali; quindi attendere che il topo a recuperare dall'anestesia. Partecipare all'animale fino a quando ha riacquistato coscienza sufficiente per mantenere decubito sternale.</li>
	<li>Dopo esso riprende conoscenza, mettere il ratto in una gabbia singola con cibo e acqua. Applicare iodio sulla ferita per prevenire l'infezione dopo l'intervento chirurgico. Tornare il ratto la compagnia di altri animali fino a quando non viene completamente ripristinata.</li>
	<li>Eutanasia ratti secondo le linee guida istituzionali a intervalli di tempo predeterminati.</li>
</ol>

<ol><li>Coombs, K. E., Leonard, A. T., Rush, M. N., Santistevan, D. A., Hedberg-Dirk, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolated+effect+of+material+stiffness+on+valvular+interstitial+cell+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Mater+Res+A%22%5BJournal%5D)">Isolated effect of material stiffness on valvular interstitial cell differentiation.</a> J Biomed Mater Res A. 105 (1), 51-61 (2017).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sandwich+tubular+scaffold+derived+from+chitosan+for+blood+vessel+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Mater+Res+A%22%5BJournal%5D)">A sandwich tubular scaffold derived from chitosan for blood vessel tissue engineering.</a> J Biomed Mater Res A. 77 (2), 277-284 (2006).</li>
<li>Thottappillil, N., Nair, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scaffolds+in+vascular+regeneration%3A+current+status%5BTitle%5D)+AND+%22Vasc+Health+Risk+Manag%22%5BJournal%5D)">Scaffolds in vascular regeneration: current status.</a> Vasc Health Risk Manag. 11, 79-91 (2015).</li>
<li>Pektok, E., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19029464">Degradation and healing characteristics of small-diameter poly (e-caprolactone) vascular grafts in the rat systemic arterial circulation.</a> Circulation. 118 (24), 2563-2570 (2008).</li>
<li>Innocente, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paclitaxel-eluting+biodegradable+synthetic+vascular+prostheses%3A+a+step+towards+reduction+of+neointima+formation%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Paclitaxel-eluting biodegradable synthetic vascular prostheses: a step towards reduction of neointima formation?</a> Circulation. 120 (11 Suppl), S37-S45 (2009).</li>
<li>de Valence, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advantages+of+bilayered+vascular+grafts+for+surgical+applicability+and+tissue+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">Advantages of bilayered vascular grafts for surgical applicability and tissue regeneration.</a> Acta Biomater. 8 (11), 3914-3920 (2012).</li>
<li>Assmann, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acceleration+of+autologous+in+vivo+recellularization+of+decellularized+aortic+conduits+by+fibronectin+surface+coating%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Acceleration of autologous in vivo recellularization of decellularized aortic conduits by fibronectin surface coating.</a> Biomaterials. 34 (25), 6015-6026 (2013).</li>
<li>Hasan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrospun+scaffolds+for+tissue+engineering+of+vascular+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">Electrospun scaffolds for tissue engineering of vascular grafts.</a> Acta Biomater. 10 (1), 11-25 (2014).</li>
<li>Baker, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+to+improve+cell+infiltration+in+composite+fiber-aligned+electrospun+scaffolds+by+the+selective+removal+of+sacrificial+fibers%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The potential to improve cell infiltration in composite fiber-aligned electrospun scaffolds by the selective removal of sacrificial fibers.</a> Biomaterials. 29 (15), 2348-2358 (2008).</li>
<li>Wang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creation+of+macropores+in+electrospun+silk+fibroin+scaffolds+using+sacrificial+PEO-microparticles+to+enhance+cellular+infiltration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedical+Materials+Research+Part+A%22%5BJournal%5D)">Creation of macropores in electrospun silk fibroin scaffolds using sacrificial PEO-microparticles to enhance cellular infiltration.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 101 (12), 3474-3481 (2013).</li>
<li>Lee, B. L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Femtosecond+laser+ablation+enhances+cell+infiltration+into+three-dimensional+electrospun+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">Femtosecond laser ablation enhances cell infiltration into three-dimensional electrospun scaffolds.</a> Acta Biomaterialia. 8 (7), 2648-2658 (2012).</li>
<li>Rnjak-Kovacina, J., Weiss, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increasing+the+pore+size+of+electrospun+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+B+Rev%22%5BJournal%5D)">Increasing the pore size of electrospun scaffolds.</a> Tissue Eng Part B Rev. 17 (5), 365-372 (2011).</li>
<li>Zhong, S., Zhang, Y., Lim, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+of+large+pores+in+electrospun+nanofibrous+scaffolds+for+cellular+infiltration%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+B+Rev%22%5BJournal%5D)">Fabrication of large pores in electrospun nanofibrous scaffolds for cellular infiltration: a review.</a> Tissue Eng Part B Rev. 18 (2), 77-87 (2012).</li>
<li>Pham, Q. P., Sharma, U., Mikos, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrospun+poly%28epsilon-caprolactone%29+microfiber+and+multilayer+nanofiber%2Fmicrofiber+scaffolds%3A+characterization+of+scaffolds+and+measurement+of+cellular+infiltration%5BTitle%5D)+AND+%22Biomacromolecules%22%5BJournal%5D)">Electrospun poly(epsilon-caprolactone) microfiber and multilayer nanofiber/microfiber scaffolds: characterization of scaffolds and measurement of cellular infiltration.</a> Biomacromolecules. 7 (10), 2796-2805 (2006).</li>
<li>Rnjak-Kovacina, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tailoring+the+porosity+and+pore+size+of+electrospun+synthetic+human+elastin+scaffolds+for+dermal+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Tailoring the porosity and pore size of electrospun synthetic human elastin scaffolds for dermal tissue engineering.</a> Biomaterials. 32 (28), 6729-6736 (2011).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+thick+fibers+and+large+pores+of+electrospun+poly%28epsilon-caprolactone%29+vascular+grafts+on+macrophage+polarization+and+arterial+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The effect of thick fibers and large pores of electrospun poly(epsilon-caprolactone) vascular grafts on macrophage polarization and arterial regeneration.</a> Biomaterials. 35 (22), 5700-5710 (2014).</li>
<li>Hutcheson, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genesis+and+growth+of+extracellular-vesicle-derived+microcalcification+in+atherosclerotic+plaques%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">Genesis and growth of extracellular-vesicle-derived microcalcification in atherosclerotic plaques.</a> Nat Mater. 15 (3), 335-343 (2016).</li>
<li>Tara, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Well-organized+neointima+of+large-pore+poly%28L-lactic+acid%29+vascular+graft+coated+with+poly%28L-lactic-co-epsilon-caprolactone%29+prevents+calcific+deposition+compared+to+small-pore+electrospun+poly%28L-lactic+acid%29+graft+in+a+mouse+aortic+implantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Well-organized neointima of large-pore poly(L-lactic acid) vascular graft coated with poly(L-lactic-co-epsilon-caprolactone) prevents calcific deposition compared to small-pore electrospun poly(L-lactic acid) graft in a mouse aortic implantation model.</a> Atherosclerosis. 237 (2), 684-691 (2014).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nessun conflitto di interessi finanziario.

L'infiltrazione delle cellule è fondamentale per la rigenerazione e rimodellamento dell'innesto vascolare in vivo16. L'infiltrazione delle cellule limitato è spesso legato ai pori relativamente piccoli dell'innesto che ostacolano la migrazione delle cellule nella parete dell'innesto. Per risolvere questa difficoltà, abbiamo sviluppato un metodo modificato per preparare con grande poro struttura gli innesti vascolari elettrofilate PCL. In dettaglio, il formato del poro aumentato con l'aume...

Gli innesti vascolari fatti da polimeri sintetici sono ampiamente utilizzati in clinica per la terapia delle malattie cardiovascolari (CPV). Purtroppo, nel caso di innesti vascolari di piccolo diametro (D < 6 mm) non sono presenti prodotti di successo disponibile dovuto la pervietà bassa innescata dalla velocità del flusso sanguigno ridotto, che spesso porta a trombosi, iperplasia intimale e altri le complicazioni1.
Ingegneria tissutale fornisce una strategia alternativa per realizzare evidenza a lungo termine e l'omeostasi basato su una rigenerazione vascolare impalcatura-guidata e ricostruzione. In dettaglio, l'innesto vascolare, come un modello tridimensionale, potrebbe fornire supporto meccanico e strutturale durante la rigenerazione del tessuto vascolare e influenza funzioni cellulari, tra cui l'adesione delle cellule, la migrazione, la proliferazione, e secrezione di matrice extracellulare2. Fino ad ora, sono stati valutati vari polimeri sintetici per applicazioni in ingegneria del tessuto vascolare. Tra questi polimeri, poly(ε-caprolactone) (PCL) è stato intensamente studiato a causa delle cellule di buona compatibilità e lento degrado che vanno da parecchi mesi a due anni3. Nel ratto dell'aorta modello4,5,6, innesti vascolari PCL elaborati da elettrofilatura espone eccellente integrità strutturale e la pervietà, l'invasione delle cellule come pure continuamente aumentato e neovascolarizzazione nella parete dell'innesto per fino a 6 mesi. Tuttavia, rimodellamento tissutale negativi, tra cui la regressione delle cellule e vasi capillari e calcificazione, inoltre sono stati osservati timepoints più a lungo, fino a 18 mesi.
Cellularization dell'innesto vascolare è un fattore chiave per determinare la rigenerazione tissutale e rimodellamento7. Elettrofilatura, come una tecnica versatile, è stato ampiamente impiegato per la preparazione di innesti vascolari con struttura fibrosa nano8. Purtroppo, la struttura di poro relativamente piccolo conduce spesso ad infiltrazione cellulare insufficiente nell'innesto vascolare elettrofilate, che limita la rigenerazione successiva del tessuto. Per risolvere questo problema, diverse tecniche sono state tentate per aumentare la dimensione dei pori e la porosità totale, tra cui il sale/polimero lisciviazione9,10, modificazione dell'apparato collettore, post-trattamento di radiazione laser11 , ecc. Infatti, la struttura degli innesti elettrofilate (tra cui il diametro della fibra, la dimensione dei pori e porosità) è collegato strettamente al trattamento condizioni12,13. Durante elettrofilatura, il diametro della fibra può essere facilmente controllato modificando i parametri, quali la concentrazione della soluzione polimerica, portata, tensione, ecc. 14 , 15, e di conseguenza, la dimensione dei pori e la porosità sono stati migliorati di conseguenza.
Recentemente abbiamo segnalato un innesto di elettrofilate PCL modificato con struttura macroporosa (fibre con diametro di 5-7 µm e pori di 30-40 µm). L'impianto in vivo mediante la sostituzione dell'aorta addominale del ratto ha mostrato alto tasso di pervietà, come pure buona rigenerazione endotelizzazione e muscolo liscio a 3 mesi post-intervento chirurgico16. Ancora più importante, nessun rimodellamento del tessuto negativo compreso regressione calcificazione e cella potrebbe essere osservato anche dopo un anno di impianto.

<table><tbody><tr><td>Pellet di poli(&epsilon;-caprolattone) (PCL) (Mn=80.000)</td><td>Sigma</td><td>704067</td><td></td></tr><tr><td>Metanolo</td><td>Tianjin Chemical Reagent Company</td><td>1060</td><td></td></tr><tr><td>Alcool</td><td>Tianjin Chemical Reagent Company</td><td>1083</td><td></td></tr><tr><td>Cloroformio</td><td>Tianjin Chemical Reagent Company</td><td>A1007</td><td></td></tr><tr><td>Saccarosio</td><td>Tianjin Fengchuan Azienda</td><td>2296</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Alfa Aesar</td><td>A16046</td><td></td></tr><tr><td>Sprague Dawley ratti</td><td>Laboratorio Animal Center dell'Accademia delle Scienze</td><td></td><td></td>Mediche Militari</tr><tr><td>Soluzione salina normale</td><td>Hebei Tiancheng Azienda</td><td></td><td></td>farmaceutica</tr><tr><td>Cloralio idrato</td><td>Tianjin Ruijinte azienda chimica</td><td>2223</td><td></td></tr><tr><td>Eparina sodio Iniezione</td><td>Tianjin Biochem Azienda</td><td></td><td></td>farmaceutica</tr><tr><td>Gentamicina solfato Iniezione</td><td>Jiangsu Lianshui Azienda</td><td></td><td></td>farmaceutica</tr><tr><td>Topo anti-alfa;-SMA Anticorpo primario</td><td>Abcam</td><td>ab7817</td><td></td></tr><tr><td>Topo anticorpo primario MYH liscio</td><td>Abcam</td><td>ab683</td><td></td></tr><tr><td>Coniglio policlonale anti-ratto anticorpo elastina</td><td>Abcam</td><td>ab23748</td><td></td></tr><tr><td>Coniglio anti-von Willebrand fattore anticorpo primario</td><td>Abcam</td><td>ab6994</td><td></td></tr><tr><td>Capra anti-topo IgG (Alexa Fluor 488)</td><td>Invitrogen</td><td>ab150117</td><td></td></tr><tr><td>Capra anti-coniglio IgG (Alexa Fluor 488)</td><td>Invitrogen</td><td>ab150077</td><td></td></tr><tr><td>5% siero di capra normale</td><td>Zhongshan Golden bridge</td><td>ZLI9022</td><td></td></tr><tr><td>Ematossilina ed eosina (H& E)</td> <td>Beijing leagene biotech</td><td>DH0006</td><td></td></tr><tr><td>Tricromica di Masson</td> Beijing <td>leagene biotech</td><td>DC0032</td><td></td></tr><tr><td>Verhoeff-van Gieson (VVG)</td> <td>Beijing leagene biotech</td><td>DC0059</td><td></td></tr><tr><td>Von Kossa</td><td>Beijing leagene biotech</td><td>DS0003</td><td></td></tr><tr><td>Aghi per suture chirurgiche con filo, 3-0</td><td>seta Shanghai Jinhuan azienda di forniture mediche</td><td>G3002b</td><td></td></tr><tr><td>Aghi chirurgici per suture con filo, 9-0 seta</td><td>Shanghai Jinhuan forniture mediche azienda</td><td>H901</td><td></td></tr></tbody></table>

impianto degli innesti vascolari elettrofilate con struttura ottimizzata in un modello del ratto

Implantation of Electrospun Vascular Grafts with Optimized Structure in a Rat Model

Qui, presentiamo un protocollo per fabbricare macroporosa innesto vascolare di PCL e descrivere un protocollo di valutazione utilizzando un modello del ratto di sostituzione dell'aorta addominale. Gli innesti vascolari elettrofilate possiedono spesso relativamente piccoli pori, che limitare l'infiltrazione delle cellule in innesti e ostacolano la rigenerazione e rimodellamento delle neo-arterie. In questo studio, gli innesti vascolari PCL con fibre più spesse (5-6 µm) e più grandi pori (~ 30 µm) sono stati realizzati utilizzando una tecnica di lavorazione modificate. Le prestazioni a lungo termine dell'innesto è stata valutata tramite impianto in un modello di ratto dell'aorta addominale. Analisi di ultrasuono hanno mostrato che gli innesti rimasero brevetti senza aneurisma o stenosi che si verificano anche dopo 12 mesi dall'impianto. Struttura macroporosa migliorato il ingrowth delle cellule e così promosso tessuto rigenerato a 3 mesi. Ancora più importante, non c'era nessun segno di rimodellamento negativi, come la calcificazione all'interno della parete dell'innesto dopo 12 mesi. Pertanto, con modificate macroporosa elaborazione gli innesti vascolari elettrofilate PCL tenere potenziali per essere un sostituto dell'arteria per l'impianto a lungo termine.

Gli innesti PCL explanted a 3 mesi e 12 mesi postoperatorio e analizzati mediante tecniche istologiche standard per ematossilina ed eosina (H &amp; E), Masson tricromica, Verhoeff-van Gieson (LCA), Von Kossa e immunofluorescenza che macchia per α-SMA, MYH, sindrome di Raynaud e l'elastina. Le immagini istologiche sono state prese utilizzando un microscopio dritto, e le immagini di immunofluorescenza sono state prese utilizzando un microscopio ﬂuorescenti.
<p class="jove_content" fo:ke...

Qui, presentiamo un metodo di elettrofilatura modificate per fabbricare gli innesti vascolari PCL con fibre spesse ed i grandi pori e descrivere un protocollo per valutare l'efficacia in vivo in un modello del ratto di sostituzione dell'aorta addominale.

Impianto degli innesti vascolari elettrofilate con struttura ottimizzata in un modello del ratto

Here, we present a protocol to fabricate macroporous PCL vascular graft and describe an evaluation protocol by using a rat model of abdominal aorta ...

L'obiettivo generale di questo intervento chirurgico è trapiantare un innesto vascolare elettrofilato in un'aorta addominale di ratto e valutare le prestazioni a lungo termine dell'innesto. Questo metodo è stato messo a punto dal professor Deling Kong e da altri colleghi del nostro gruppo e può aiutare a rispondere a domande chiave nello studio degli innesti vascolari elettrofilati, come l'effetto della struttura e le proprietà superficiali dell'innesto sulla rigenerazione vascolare. Il vantaggio principale di questa tecnica è che ha una buona ripetibilità e un alto tasso di sopravvivenza degli animali.Inoltre, il modello animale è facile da gestire a basso costo. Questo lavoro sarà condotto dal nostro collega, il dottor Wang. Per iniziare, preparare la soluzione polimerica sciogliendo il policaprolattone in una miscela da 1 a 5 di metanolo e cloroformio e mescolandola a temperatura ambiente per 12 ore.Caricare la soluzione polimerica in una siringa di vetro da 10 millilitri e dotarla di un ago smussato calibro 21. Quindi, posizionare un mandrino in acciaio inossidabile sullo strumento di raccolta e assicurarsi che sia adeguatamente messo a terra. Regolare la distanza di lavoro dal

implantation-electrospun-vascular-grafts-with-optimized-structure-rat

Research

Ricerca

JoVE Journal

Biology

Biologia

Qui, descriviamo una procedura chirurgica per l'impianto cardiaco di ingegneria tessutale nella atrio-ventricolare (AV)-solco di un ratto adulto Lewis.

L&#39;impianto di ingegneria tessutale nel Cuore Rat

Per migliorare la nostra conoscenza della formazione neotissue cellulare e molecolare, un modello murino della TEVG è stata sviluppata di recente. Gli innesti sono stati impiantati come infrarenali innesti vena cava interposizione di C57BL / 6 topi. Questo modello raggiunge risultati simili a quelli ottenuti nella nostra ricerca clinica, ma nel corso di un time-course di gran lunga ridotto.

L&#39;impianto di Vena cava inferiore Interposizione Graft in modello murino

Un protocollo step-by-step per il collocamento inter-posizionale di ingegneria tessutale Vessels (TEV) nella carotide di una pecora con anastomosi end-to-end e di valutazione digitale in tempo reale in vivo fino al sacrificio degli animali.

Tecnica chirurgica per l&#39;impianto di ingegneria tessutale vascolari Innesti e successive<em&gt; In Vivo</em&gt; Monitoraggio

Qui, vi presentiamo un protocollo per generare ingegneria dei tessuti dei vasi innesti che sono funzionali per l'innesto in topi con un doppio semina cellule staminali pluripotenti indotte in parte (PiPSC) - derivato cellule muscolari lisce e PiPSC - cellule endoteliali derivate su una nave decellularized ponteggio bioreattore.

Generazione e innesto delle navi tissutale in un modello di topo

I modelli animali sono strumenti importanti per la valutazione degli innesti di ingegneria tissutale. Questo articolo presenta il protocollo per la preparazione di un innesto polimerico biodegradabile elettrofilato per l'uso nell'ingegneria tissutale del legamento crociato anteriore, nonché un protocollo chirurgico per l'impianto in un modello di ratto.

Atimico Rat modello per la valutazione di Engineered legamento crociato anteriore Innesti

Descriviamo un approccio microchirurgico per la generazione di un loop arterovenosa (AV) come un modello di analisi vascolarizzazione in vivo in un ambiente isolato e ben caratterizzato. Questo modello non è solo utile per l'indagine di angiogenesi, ma è anche perfettamente adatto per l'ingegneria vascolarizzato assialmente e tessuti trapiantabili.

Il arterovenosa (AV) loop in un modello di Piccoli Animali per studiare Angiogenesi e ingegneria dei tessuti vascolarizzati

Questo video mostra un modello per studiare lo sviluppo dell'iperplasia miointimale dopo un intervento chirurgico di interposizione venosa nei ratti.

Vena interposizione Modello: un modello adatto per studiare Bypass Graft pervietà

La ricostruzione esofagea è una procedura impegnativa e lo sviluppo di un esofago tissutale che consente la rigenerazione della mucosa e del muscolo esofageo e che può essere impiantato come un innesto artificiale. Qui, presentiamo il nostro protocollo per generare un esofago artificiale, tra cui la produzione di scaffold, la coltivazione di bioreattori e varie tecniche chirurgiche.

Innesto ingegnerizzato per la ricostruzione esofagea circonferenza nei ratti

Questo lavoro presenta un modello animale di fibrosi indotta da transizione endoteliale a mesenchimale, come si vede nei difetti cardiaci congeniti come la stenosi aortica critica o la sindrome del cuore sinistro ipoplasico, che consente una valutazione istologica dettagliata del tessuto, l'identificazione delle vie di segnalazione regolatorie e la verifica delle opzioni di trattamento.

Un modello di trapianto di cuore di ratto eterotopico neonatale per lo studio della transizione da endoteliale a mesenchimale

Qui, viene presentato un protocollo per l'impianto di un innesto vascolare di ingegneria tissutale nell'arteria carotide di topo utilizzando la tecnica della cuffia, fornendo un modello animale adatto per studiare i meccanismi di rigenerazione del tessuto vascolare.

Impianto di innesto vascolare di ingegneria tissutale nell'arteria carotide di topo tramite tecnica della cuffia

Questo studio presenta un modello suino per la valutazione di innesti di piccolo diametro nelle arterie femorali. Il modello imita la dinamica vascolare umana e valuta in modo completo la pervietà dell'innesto, l'emodinamica e il rimodellamento vascolare. Offre una preziosa piattaforma per testare gli innesti vascolari e monitorarli con l'ecografia Doppler e l'angiografia.

Impianto di innesto vascolare femorale in un modello suino per testare innesti vascolari di piccolo diametro

Impara a impiantare innesti vascolari elettrofilati con struttura ottimizzata in un modello del ratto. Questo metodo consente di valutare le prestazioni a lungo termine e la rigenerazione vascolare in vivo.

Impianto degli innesti vascolari elettrofilate con struttura ottimizzata in un modello del ratto

Esplora altri video