Name: Determinazione non invasiva, High-throughput di durata di sonno in roditori (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-18T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 33 s
Description: Scopri un metodo high-throughput e non invasivo per misurare la durata totale del sonno nei roditori utilizzando il monitoraggio dell'attività nella gabbia. Questa tecnica validata offre un'alternativa efficiente ai metodi EEG tradizionali.

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Gli autori si desidera ringraziare la redazione di Fellows NIH per la loro assistenza editoriale. Questa ricerca è stata finanziata dal programma di ricerca intramurale del NIMH (ZIA MH00889). RMS è stato supportato anche da una borsa di studio post-dottorato di FRAXA.

Tutte le procedure sono state approvate dal comitato di uso nazionale Istituto di mentale salute Animal Care ed ed eseguite secondo gli istituti nazionali di salute orientamenti sull'uso degli animali e manutenzione.
1. impostazione delle unità di rilevamento Sleep
<ol><li>Acquistare il numero di unità e il software desiderato.</li>
	<li>Seguire le istruzioni per configurare i sistemi di monitoraggio.<ol>
<li>Allineare un rivelatore di fronte un emettitore. Assicurarsi che i raggi infrarossi sono rivolti verso l'interno e sono allineati alla stessa altezza.</li>
		<li>Utilizzare le viti in dotazione per posizionare i rivelatori e gli emettitori all'altezza desiderata sul cavalletto in metallo. Questa altezza deve essere regolata in modo che la biancheria da letto della gabbia è sotto il livello dei raggi infrarossi, ma la trave è ad altezza adeguata per rilevare l'attività dell'animale. Questo crea una superficie interna di 27 cm × 32 cm (10,625 × in 12,75).<ol>
<li>Se sono necessarie altre viti, acquisto più a un hardware memorizzare (6-32 ¼ Pan vite a testa).</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>Collegare ogni rivelatore con ogni emettitore. Collegare l'emettitore all'hub fornito collegato al ricevitore. Eseguire questa operazione per la x e il y aerei. Ripetere questo passaggio per tutte le configurazioni.</li>
	<li>Collegare il ricevitore a un computer con l'hub USB fornito.</li>
</ol>2. il software Setup
<ol><li>Installare il software di analisi e selezionare il file di configurazione dell'hardware fornito come predefinito. Il file di configurazione dell'hardware deve essere modificato solo dall'azienda.</li>
	<li>Fare clic su File | Aprire Configurazione di esperimento. Aprire la configurazione di esperimento predefinito.</li>
	<li>Fai clic su esperimento | Proprietà.</li>
	<li>Scegliere la scheda scansione modificare la velocità di scansione a 10 s.</li>
	<li>Scegliere la scheda attività modificare la frequenza di campionamento di attività a 10 s.</li>
	<li>Fare clic su File | Salvare esperimento come per salvare queste impostazioni di configurazione per gli esperimenti futuri.</li>
</ol>3. installazione animale
<ol><li>Casa singolarmente i topi in gabbie pulite che sono 31 cm (12,25 in) di lunghezza e larghezza 16,5 cm (6,5 pollici). Per impedire la creazione la biancheria da letto il mouse e che ostruisce le travi, utilizzano letti ad una profondità di 3 mm. Non forniscono materiale di nidificazione aggiuntivo per i topi.</li>
	<li>I topi con accesso al cibo e acqua ad libitum per mezzo di un alimentatore di filo che riposa nella parte superiore della gabbia fuori del modo le travi. Se necessario, riempire il cibo e cambiare le bottiglie di acqua quando gabbie vengono cambiate ogni 3-5 giorni per tutta la durata dello studio.</li>
	<li>Allineare la gabbia del mouse all'interno del fascio infrarosso istituito, assicurando che si riposa in circa la metà dei fasci per una copertura completa.</li>
	<li>Garantire la luce del ciclo di buio della camera è impostata su specchio ciclo luminoso scuro delle condizioni normali alloggiamento dei topi, o modificare come desiderato in base all'esperimento.</li>
</ol>4. preparazione e iniezioni di droga
<ol><li>Ottenere acqua sterile e sterile ciclodestrina.</li>
	<li>Per tutte le iniezioni, utilizzare una siringa da 1 mL con ago ipodermico 25.5-30.5 G. Un nuovo ago sterile e la siringa deve essere utilizzati per ogni mouse.</li>
	<li>Per ridurre il tempo tra le iniezioni, assemblare tutte le siringhe in anticipo.</li>
	<li>Per preparazioni iniettabili ciclodestrina: preparare la soluzione di ciclodestrina aggiungendo 3 g di ciclodestrina a 10 mL di acqua per fare una soluzione di ciclodestrina del 30%.</li>
	<li>Amministrare 0,3 mL di soluzione fisiologica o di ciclodestrina tramite iniezione del IP.</li>
</ol>5. software per registrare sonno
<ol><li>Aprire il file di configurazione dell'hardware.</li>
	<li>Fare clic su File | Aprire Configurazione di esperimento. Aprire il desiderato o esperimento configurazione predefinita.</li>
	<li>Fai clic su esperimento | Installazione.<ol>
<li>Designare il percorso in cui salvare il file di dati, nonché un percorso in cui salvare il file di backup. Il software richiede che il file di dati memorizzato nei File di programma nella cartella di programma specifico. Nota: dato che alcuni computer Mostra i File di programma come sensibile, accesso al file di dati potrebbe non essere possibile dopo l'esperimento. Pertanto, si consiglia di salvare il file di backup in un'altra area non sensibili sul computer locale.</li>
		<li>Designare l'animale ID per ogni sonno dell'alloggiamento e inserire il peso dell'animale, se lo si desidera. Se una camera non viene utilizzata nell'esperimento, deselezionando la casella si disattiva quella camera. Una volta immesse le informazioni di identificazione, fare clic su fatto.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Fare clic su File | Salvare sperimentare come per salvare la configurazione corrente di esperimento sotto il nome di file desiderato.</li>
	<li>Fai clic su esperimento | Eseguire o F5 per avviare la registrazione. Attendere un epoca s 10 per assicurarsi che tutti gli alloggiamenti sono raccogliendo attività. Come gli animali erano appena iniettati, è molto probabile che gli animali si spostano abbastanza per essere rilevato dai raggi infrarossi.<ol>
<li>Se non viene rilevata alcuna attività, provare a spostare la gabbia del mouse manualmente per garantire che le travi ritirare il movimento. Continuare la risoluzione o spostare in una camera di lavoro, se l'attività non è ancora registrata. Nota: Eseguire l'esperimento, non appena le iniezioni sono finite.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Coprire gli schermi di computer con una copertura opaca per bloccare la luce. Coprire le luci lampeggianti sul misuratore di attività.</li>
	<li>Eseguire l'esperimento per 24 h. Nota: A causa del tempo necessario per eseguire le iniezioni, non sarà un pieno 24 h. Le iniezioni devono essere eseguite allo stesso tempo ogni giorno. Sonno non deve essere registrato durante le iniezioni.</li>
	<li>Il giorno seguente, al momento delle iniezioni, fare clic esperimento | Interrompere per terminare la registrazione. Fare clic su File | Esportare | Generare il soggetto CSVs per raccogliere i dati grezzi per ogni mouse. Nota: Può prendere qualche tempo da esportare, quindi farlo immediatamente e quindi procedere alle iniezioni, mentre il computer sta elaborando.</li>
	<li>Fare clic su File | Esportare | Sonno per esportare il file di sonno per ogni esperimento aprendo il raw. File di dati di DDAT su qualsiasi computer che ha installato il software.<ol>
<li>In Origine di attività di rilevamento parametri, verifica che siano selezionate sia l'asse x e asse y caselle.</li>
		<li>In Epoche di soglia dormire, assicurarsi che siano selezionate 4 epoche.</li>
		<li>Sotto Soglia di attività soglia dormire, assicurarsi che siano selezionati 0 conteggi.</li>
		<li>Sotto Ciclo luce/buio, controllare il tempo appropriato per il ciclo luce/buio.</li>
		<li>Sotto la Finestra di analisi, selezionare l'ora desiderata per l'analisi. Nel caso di studi di iniezione, lasciare il giorno come predefinito. Impostare l' ora di inizio come ExpSTART. Impostare la durata come 24:00 per 24 h. analisi utilizzando che il software può essere fatto per un massimo di 72 ore.</li>
		<li>Salvare la configurazione per risparmiare tempo per l'esportazione di dati.</li>
		<li>Fare clic su Aggiorna.</li>
		<li>Fare clic su Genera File CSV e salvare il file nella posizione desiderata.</li>
	</ol>
</li>
</ol>6. analisi dei dati
<ol><li>Per ogni sessione di registrazione, aprire il file di sonno. Per assegnare l'ID di oggetto, aprire il file CSV individuale per ogni camera determinare l'ID di oggetto. Registrare il TOT sonno HH.mm.SS per sia la luce e le fasi di scure per tutti gli animali.<ol>
<li>Controllare il file CSV soggetto individuale per le incoerenze che indica il fallimento della registrazione. Se abbaglianti conteggi vengono rilevati in un piano, ma nessun conteggi sono osservato su altro aereo, ciò indica un errore di larghezza. Nota: Il "% dormire" per le fasi di luce e buia è calcolato durante il periodo di registrazione complessiva, che comprende fasi sia chiaro e scure. Per cicli di luce/buio di 12 h, moltiplicare questo numero per 2 per ottenere il sonno di"%" nella fase scura o 12 ore di luce. Dato che gli studi di iniezione non è andato per un pieno 24 h, calcolato "% dormire" non è preciso. Per generare la corretta "% dormono", dividere il "TOT dormire HH.mm.SS" per il "tempo trascorso esperimento: HH.mm.SS," moltiplicare per 2 e poi moltiplicare per 100 per ottenere la percentuale. Se le iniezioni sono state effettuate nella fase di luce, quindi solo la fase della luce deve essere regolata in questo modo.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Poiché fasi e diversi giorni vengono confrontati con gli altri, analizzare la durata del sonno per cento per ogni fase e ogni giorno.</li>
</ol>

<ol><li>Picchioni, D., Reith, R. M., Nadel, J. L., Smith, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep%2C+plasticity+and+the+pathophysiology+of+neurodevelopmental+disorders%3A+the+potential+roles+of+protein+synthesis+and+other+cellular+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+sciences%22%5BJournal%5D)">Sleep, plasticity and the pathophysiology of neurodevelopmental disorders: the potential roles of protein synthesis and other cellular processes.</a> Brain sciences. 4, 150-201 (2014).</li>
<li>Ingvar, M. C., Maeder, P., Sokoloff, L., Smith, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+aging+on+local+rates+of+cerebral+protein+synthesis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Monographs+in+neural+sciences%22%5BJournal%5D)">The effects of aging on local rates of cerebral protein synthesis in rats.</a> Monographs in neural sciences. 11, 47-50 (1984).</li>
<li>Pack, A. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+method+for+high-throughput+phenotyping+of+sleep+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+genomics%22%5BJournal%5D)">Novel method for high-throughput phenotyping of sleep in mice.</a> Physiological genomics. 28, 232-238 (2007).</li>
<li>Sare, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficient+Sleep+in+Mouse+Models+of+Fragile+X+Syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Deficient Sleep in Mouse Models of Fragile X Syndrome.</a> Front Mol Neurosci. 10, (2017).</li>
<li>Alvarez, G. G., Ayas, N. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+daily+sleep+duration+on+health%3A+a+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+cardiovascular+nursing%22%5BJournal%5D)">The impact of daily sleep duration on health: a review of the literature.</a> Progress in cardiovascular nursing. 19, 56-59 (2004).</li>
<li>Kincheski, G. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+sleep+restriction+promotes+brain+inflammation+and+synapse+loss%2C+and+potentiates+memory+impairment+induced+by+amyloid-beta+oligomers+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+behavior%2C+and+immunity%22%5BJournal%5D)">Chronic sleep restriction promotes brain inflammation and synapse loss, and potentiates memory impairment induced by amyloid-beta oligomers in mice.</a> Brain, behavior, and immunity. 64, 140-151 (2017).</li>
<li>Sare, R. M., Levine, M., Hildreth, C., Picchioni, D., Smith, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+sleep+restriction+during+development+can+lead+to+long-lasting+behavioral+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+behavior%22%5BJournal%5D)">Chronic sleep restriction during development can lead to long-lasting behavioral effects.</a> Physiology & behavior. 155, 208-217 (2015).</li>
<li>Moretti, P., Bouwknecht, J. A., Teague, R., Paylor, R., Zoghbi, H. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormalities+of+social+interactions+and+home-cage+behavior+in+a+mouse+model+of+Rett+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Human+molecular+genetics%22%5BJournal%5D)">Abnormalities of social interactions and home-cage behavior in a mouse model of Rett syndrome.</a> Human molecular genetics. 14, 205-220 (2005).</li>
<li>Guzman, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+with+selective+elimination+of+striatal+acetylcholine+release+are+lean%2C+show+altered+energy+homeostasis+and+changed+sleep%2Fwake+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+neurochemistry%22%5BJournal%5D)">Mice with selective elimination of striatal acetylcholine release are lean, show altered energy homeostasis and changed sleep/wake cycle.</a> Journal of neurochemistry. 124, 658-669 (2013).</li>
<li>Vecsey, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Daily+acclimation+handling+does+not+affect+hippocampal+long-term+potentiation+or+cause+chronic+sleep+deprivation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Daily acclimation handling does not affect hippocampal long-term potentiation or cause chronic sleep deprivation in mice.</a> Sleep. 36, 601-607 (2013).</li>
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<li>Angelakos, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperactivity+and+male-specific+sleep+deficits+in+the+16p11.2+deletion+mouse+model+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Autism+research%3A+official+journal+of+the+International+Society+for+Autism+Research%22%5BJournal%5D)">Hyperactivity and male-specific sleep deficits in the 16p11.2 deletion mouse model of autism.</a> Autism research: official journal of the International Society for Autism Research. 10, 572-584 (2017).</li>
<li>Fisher, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+assessment+of+sleep-wake+behavior+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+biological+rhythms%22%5BJournal%5D)">Rapid assessment of sleep-wake behavior in mice.</a> Journal of biological rhythms. 27, 48-58 (2012).</li>
<li>Mang, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+piezoelectric+system+as+an+alternative+to+electroencephalogram%2F+electromyogram+recordings+in+mouse+sleep+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a piezoelectric system as an alternative to electroencephalogram/ electromyogram recordings in mouse sleep studies.</a> Sleep. 37, 1383-1392 (2014).</li>
<li>Chen, L., Toth, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fragile+X+mice+develop+sensory+hyperreactivity+to+auditory+stimuli%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Fragile X mice develop sensory hyperreactivity to auditory stimuli.</a> Neuroscience. 103, 1043-1050 (2001).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Qui, presentiamo un metodo non invasivo, ad alta produttività per la determinazione della durata del sonno basata sul monitoraggio delle attività nella casa-gabbia. Questo metodo di valutazione del tempo totale di sonno è stato convalidato contro EEG studi3. Monitoraggio basato su attività di home-gabbia è semplice, non invadente e applicabile per gli studi di popolazione in gran numero di animali. È limitato in quanto non può dare informazioni dettagliate riguardanti il sonno (ad esempio di fasi ...

Sonno ha funzioni importanti per il restauro del corpo e del cervello che segue il carico quotidiano di Veglia1. È stato dimostrato che il sonno gioca un ruolo nella conservazione della memoria e di plasticità cerebrale generale1. L'EEG è il gold standard per rilevare il sonno2. Nei roditori, monitoraggio EEG richiede l'impianto chirurgico di elettrodi applicata ad un testa-mount, dopo che l'animale ha bisogno di un periodo di tempo per recuperare2. Dopo il recupero, l'animale è collegato al dispositivo di registrazione e viene dato un altro periodo di assuefazione2. A causa di questi necessari periodi di recupero e assuefazione, EEG è che richiede tempo e laborioso e non può essere ragionevolmente eseguita su larga scala. Inoltre, la procedura chirurgica di impianto dell'elettrodo trasporta un rischio intrinseco all'animale. Infine, l'analisi dei dati per il Punteggio di sonno negli studi di EEG è molto laborioso. In alternativa, metodo non invasivo, ad alta produttività di sonno monitoraggio sarebbe molto gli aiuti ricerca roditore sonno.
Un activity based casa-gabbia sistema di monitoraggio utilizzato per rilevare sonno risolve i limiti degli studi EEG. La semplice premessa è che un animale inattivo è probabilmente un animale dorme. È stato dimostrato che 40 s di inattività continuo (cestinate in 10 epoche di s) è una misura affidabile del sonno come misurato con un EEG (indicato per avere 88-94% accordo)3. Sistemi di monitoraggio casa-gabbia possono essere utilizzati per studiare i grandi gruppi di animali con il tempo di installazione minima. Abbiamo dimostrato che ci vuole circa un giorno gli animali per habituate per alloggi individuali in casa-gabbia monitoraggio sistema4 in contrasto con le settimane di recupero necessari per EEG studi2. Inoltre, alcune configurazioni è in grado di rilevare i parametri fisiologici come la temperatura corporea, frequenza cardiaca, attività e l'alimentazione. Temperatura e frequenza cardiaca sono determinati dall'impianto di un piccolo trasmettitore. Questi parametri possono fornire ulteriori informazioni sul mouse e possono essere utilizzati in parallelo con la registrazione del sonno per ulteriormente aggiungere alla nostra comprensione del sonno e come è influenzato.
Mentre è un potente strumento, ci sono alcune limitazioni ai tipi di dati che possono essere acquisiti da monitoraggio basato su attività di home-gabbia. Studi di EEG possono differenziare fra REM e non - REM del sonno, che possono essere importanti per una più profonda comprensione dell'architettura di sonno. Sistemi di monitoraggio casa-gabbia di Activity based possono fornire solo dati per la durata totale di sonno. Inoltre, anche se l'output per monitoraggio basato su attività di home-gabbia dà informazioni sulla durata del periodo di sonno, noi non possiamo valutare con precisione Durata incontro a causa dei limiti intrinseci di 40 s intervalli3. Nonostante queste limitazioni, casa-gabbia il monitoraggio della durata del sonno fornisce un'importante misura biologica che può influenzare molti fattori a valle, compresa la salute dell'animale e comportamento5.
Monitoraggio basato su attività di home-gabbia è stato utilizzato per rilevare il sonno in molti studi che indicano la sua versatilità. Citiamo un esempio di questi studi4,6,7,8,9,10,11,12. Oltre al metodo presentato, ci sono altri metodi di rilevazione del sonno tramite monitoraggio basato su attività, ciascuno dei quali contiene la propria limitazioni13,14. Alcuni di questi studi esaminare lunghi periodi di sonno ininterrotto (72 h) mentre alcuni esaminare sonno in blocchi di 24 h. In questo studio, presentiamo sonno analisi per ogni periodo di 24 h dopo la risposta per le iniezioni intraperitoneali quotidiane di (IP) e ai cambiamenti periodici gabbia in un modello murino di sindrome (Fmr1 KO topi) del X fragile. Abbiamo scelto di topi Fmr1 KO perché hanno ridotto il sonno4 e sono supposti per essere iper-reattive a informazioni sensoriali15. I nostri dati evidenziano la capacità di rilevare i cambiamenti nel ritmo del sonno in risposta a un evento stressante. Questo metodo è ideale per ottenere informazioni generali su sonno in larghe coorti di topi. Il metodo può essere utile per la comprensione degli effetti di specifiche alterazioni genetiche sul sonno, gli effetti di trattamenti farmacologici, o le risposte agli eventi, ad esempio un fattore di stress. Inoltre, il metodo fornisce un semplice mezzo di screening per una risposta prima di iniziare gli studi più coinvolti.

<table><tbody><tr><td>Sistema completo di monitoraggio degli animali da laboratorio (CLAMS)</td><td>Columbus Instruments Attrezzature</td><td></td><td>e software per analizzare la durata del sonno</td></tr><tr><td>Captisol Research Grade</td><td>Captisol</td><td>RC-0C7-100</td><td>Captisol per sciogliere composti idrofobici</td></tr><tr><td>30 G BD Ago da 1/2 pollice</td><td>BD</td><td>305106</td><td>per iniezioni BD</td></tr><tr><td>Siringhe monouso Fisher</td><td></td><td>14-823-30</td><td>Siringhe per iniezioni</td></tr><tr><td>B6.129P2-Fmr1tm1Cgr/J</td><td>Jackson Labs</td><td>3025</td><td>Fmr1 KO topi</td></tr><tr><td>Super Mouse 750 Mouse Cage</td><td>Lab Products, Inc.</td><td></td><td>Gabbie per i topi</td></tr><tr><td>SANI-Chips Bedding</td><td>PJ Murphys</td><td></td><td>Bedding per i topi</td></tr></tbody></table>

determinazione non invasiva, high-throughput di durata di sonno in roditori

Noninvasive, High-throughput Determination of Sleep Duration in Rodents

Tradizionalmente, il sonno è monitorato da un elettroencefalogramma (EEG). Gli studi di EEG in roditori richiedono impianto chirurgico di elettrodi seguita da un periodo di recupero lunghi. Per eseguire una registrazione EEG, l'animale è collegato a un ricevitore, creando un tether innaturale per il montaggio a testa. Il monitoraggio EEG è che richiede tempo, porta un rischio per l'animale e non è un ambiente completamente naturale per la misura di sonno. Metodi alternativi per rilevare il sonno, specialmente in una moda di alto-rendimento, avanzerebbe notevolmente il campo di ricerca di sonno. Qui, descriviamo un metodo convalidato per la rilevazione del sonno tramite monitoraggio basato su attività di home-gabbia. Studi precedenti hanno dimostrato che il sonno valutato tramite questo metodo ha un alto grado di accordo con sonno definita da misure basate su EEG tradizionale. Considerando che questo metodo viene convalidato per tempo totale di sonno, è importante notare che durata di attacco di sonno dovrebbe essere valutata da un EEG che ha la migliore risoluzione temporale. L'EEG può differenziare anche rapido del movimento oculare (REM) e non - REM del sonno, dando maggiori dettagli circa l'esatta natura del sonno. Tuttavia, determinazione basata sulle attività di sonno può essere utilizzato per analizzare più giorni di sonno indisturbato e valutare il sonno come una risposta ad un evento acuto (come lo stress). Qui, ci mostra la potenza di questo sistema per rilevare la risposta dei topi per le iniezioni intraperitoneali quotidiane.

Per determinare l'effetto delle iniezioni quotidiane su sonno e se gli animali habituate alle iniezioni, abbiamo effettuato le iniezioni quotidiane di IP per 14 giorni consecutivi alle 9:00 (ciclo di luce iniziò alle 6:00) e durata del sonno ha registrato nei 12 Fmr1 KO C57Bl/6J. Abbiamo usato all'interno di design degli oggetti, iniettando ogni animale con soluzione salina normale per 4 giorni consecutivi (giorni 1-4) e poi il 30% ciclodestrina per i seguenti dieci giorni consec...

Descriviamo un metodo di alto-rendimento di misurazione sonno per mezzo di monitoraggio basato su attività di home-gabbia. Questo metodo offre vantaggi rispetto ai metodi tradizionali basati su EEG. E è convalidata anche per la determinazione della durata totale di sonno e può essere un potente strumento per monitorare il sonno nei modelli del roditore della malattia umana.

Determinazione non invasiva, High-throughput di durata di sonno in roditori

Traditionally, sleep is monitored by an electroencephalogram (EEG). EEG studies in rodents require surgical implantation of the electrodes followed by a ...

L'obiettivo generale di questo esperimento è registrare la durata totale del sonno in modo non invasivo e ad alto rendimento. Questo metodo potrebbe aiutare a rispondere a domande chiave nel campo del sonno, come la durata totale del sonno. Il vantaggio principale di questa tecnica è che è ad alta produttività, non invasiva e facilmente eseguibile.A dimostrare la procedura sarà Abigail Lemons, una post-diploma di maturità del laboratorio. Per iniziare la procedura, allineare un rilevatore di fronte a un emettitore. Assicurarsi che i raggi infrarossi siano rivolti verso l'interno e siano allineati alla stessa altezza.Quindi, utilizzare le viti fornite per posizionare i rilevatori e gli emettitori all'altezza desiderata sul supporto metallico. Questa altezza deve essere regolata in modo che la lettiera della gabbia sia al di sotto del livello dei raggi infrarossi, ma il raggio sia all'altezza corretta per rilevare l'attività degli animali. Questo crea un'area interna di 27 centimetri per 32 centimetri.Quindi, collegare a ciascun rilevatore con ciascun emettitore. Collegare l'emettitore all'hub in dotazione collegato al ricevitore. Eseguire questa operazione sia per il piano X che per

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Comportamento

Questo articolo esamina i metodi che possono essere utilizzati per determinare la funzione circadiani e la reattività della luce nei topi.

Risposte di misura della luce circadiani e acuta nel topo, utilizzando attività ruota corsa

La procedura è descritta per manipolare l'attività dei neuroni cerebrali corticali piramidali optogenetically mentre l'elettroencefalogramma, elettromiogramma, e cerebrale concentrazione di lattato sono monitorati. Registrazioni sperimentali vengono eseguite su cavo-frenati topi, mentre subiscono spontanee sonno / veglia cicli. Optogenetic apparecchiatura è assemblata nel nostro laboratorio, apparecchi registrazione è commercialmente disponibile.

Elettroencefalografia simultanea, in tempo reale misura della concentrazione di lattato e la manipolazione Optogenetic di attività neuronale nella corteccia cerebrale Rodentia

Fonte: Kodani, S., et.al. Manipolazione optogenetica dei circuiti neurali durante il monitoraggio degli stati di sonno/veglia nei topi. J. Vis. Exp. (2019)Questo video dimostra la manipolazione optogenetica dei circuiti neurali coinvolti nella transizione dal sonno alla veglia nei topi. La procedura prevede l'impianto chirurgico di una fibra ottica ed elettrodi nel cervello e nei muscoli per consentire la stimolazione luminosa e la registrazione elettrofisiologica. Fornendo luce per attivare i...

Manipolazione optogenetica dei circuiti neurali per la transizione dal sonno alla veglia nei topi

Questo video mostra un protocollo per l'impianto di un elettroencefalogramma (EEG) e di un elettromiogramma (EMG) in un topo anestetizzato. Il processo prevede il fissaggio del topo su un telaio stereotassico, l'esecuzione di un'incisione della linea mediana nel cranio, la perforazione di fori per gli elettrodi e il fissaggio dell'unità elettrodo per la registrazione del segnale. Dopo il recupero, il comportamento sonno-veglia del topo viene analizzato utilizzando i segnali registrati.

Analisi del comportamento del sonno nei topi attraverso registrazioni di elettroencefalogramma ed elettromiogramma

La registrazione dell'elettroencefalogramma (EEG) e dell'elettromiogramma (EMG) nei topi che si comportano liberamente è un passo fondamentale per correlare il comportamento e la fisiologia con il sonno e la veglia. Il protocollo sperimentale qui descritto fornisce un sistema basato su cavo per l'acquisizione di registrazioni EEG ed EMG nei topi.

Procedura di registrazione poligrafica per la misurazione del sonno nei topi

Una versione topo dell'umano psicomotorio vigilanza Test (PVT) è descritto che misura gli aspetti di attenzione simili a quelli misurati con la PVT umana, compresi gli aspetti di vigilanza umana come la precisione le prestazioni, la velocità del motore, rispondendo prematura, e cali di attenzione.

Il roditore psicomotorio vigilanza Test (rPVT): un metodo per la valutazione delle prestazioni neurocomportamentali in ratti e topi

Qui presentiamo procedure sperimentali e analitiche per descrivere le dinamiche temporali delle variabili neurali e cardiache del sonno non REM nei topi, che modulano la risposta al sonno agli stimoli acustici.

Quantificare la dinamica infrarosso del potere spettrale e della frequenza cardiaca nei topi addormentati

Qui, descriviamo i metodi di manipolazione optogenetica di particolari tipi di neuroni durante il monitoraggio degli stati di sonno/veglia nei topi, presentando il nostro recente lavoro sul nucleo del letto della stria terminale come esempio.

Manipolazione optogenetica dei circuiti neurali durante il monitoraggio degli stati di sonno/veglia nei topi

Il presente protocollo delinea un metodo per la creazione di un dispositivo basato su piattaforma a bilanciere economico utilizzato per indurre la privazione del sonno nei topi. Questo dispositivo si è dimostrato efficace nel causare interruzioni nei modelli di sonno evidenziati dall'elettroencefalogramma (EEG), oltre a indurre cambiamenti metabolici e molecolari associati alla privazione del sonno.

Stabilire un dispositivo per la privazione del sonno nei topi

Viene presentato un protocollo per lo screening farmacologico ad alto rendimento per migliorare il sonno monitorando il comportamento del sonno dei moscerini della frutta in un modello di Drosophila anziana.

Screening farmacologico di piccole molecole ad alto rendimento per i disturbi del sonno legati all'età utilizzando Drosophila melanogaster

Presentiamo un pacchetto software con un'interfaccia utente grafica per i ricercatori senza esperienza di codifica per valutare le fasi del sonno nei topi con un semplice download e funzionamento.

IntelliSleepScorer, un pacchetto software con un'interfaccia utente grafica per il punteggio automatizzato delle fasi del sonno dei mouse

Scopri un metodo high-throughput e non invasivo per misurare la durata totale del sonno nei roditori utilizzando il monitoraggio dell'attività nella gabbia. Questa tecnica validata offre un'alternativa efficiente ai metodi EEG tradizionali.

Determinazione non invasiva, High-throughput di durata di sonno in roditori

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