Name: Immagine-Guida di resezione del Glioblastoma e limpianto intracranico di terapeutica delle cellule staminali-seminato ponteggi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-07-16T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 18 s
Description: Impara la resezione chirurgica del glioblastoma nei topi e l'impianto di ponteggi con cellule staminali mesenchimali terapeutiche. Questo metodo permette di studiare l'efficacia della terapia cellulare post-operatoria in neuro-oncologia.

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Gli autori riconoscono contributi editoriali da Dr. Kathryn Pietrosimone. Impalcature PLA sono stati prodotti da laboratorio del Dr. Elizabeth Loboa alla North Carolina State University. Questo lavoro è stato supportato dal Università Cancer Research Fund dell'UNC Lineberger Comprehensive Cancer Center e UNC traslazionale e clinica Sciences Institute (KL2TR001109, UL1TR001111).

Tutti i metodi descritti qui sono stati approvati dal istituzionale Animal Care e uso Committee (IACUC) di The University of North Carolina a Chapel Hill.
Nota: Questa procedura è eseguita su topi con una craniotomia aperta, come una versione modificata del protocollo da Mostany e Portera-Cailliau19 in cui viene eliminato il tessuto osseo che viene rimosso chirurgicamente, lasciando il cervello accessibile per istituzione e eventuale resezione dei tumori GBM. A seguito di craniotomia, tumori sono stabiliti attraverso l'impianto stereotassica come descritto in Ozawa e James20. Abbiamo impiantare cellule mCh-Fl di 1 x 105 U87 alle seguenti coordinate stereotassica (in mm dal bregma): (2.5, 0, -0,5).
1. cella cultura e preparazione di ponteggio
Nota: Impalcature devono essere preparate 48h prima dell'impianto in topi. I seguenti volumi sono forniti su base al patibolo. Moltiplicare la quantità come necessario per ulteriori scaffold.
<ol><li>Impalcature PLA tagliate a pezzi di resezione cavità di dimensioni medie (circa 2 mm x 2 mm). Impalcature possono essere tagliate a mano con le forbici o con un punzone di foro per la ripetibilità.</li>
	<li>Sterilizzare mediante immersione in etanolo al 70% per 15 min seguita da immersione in PBS. Posto dell'impalcatura in mezzo dell'Aquila di Dulbecco modificato (DMEM) contenente 10% siero bovino fetale (FBS) e 1% di penicillina-streptomicina durante la preparazione di cellule per il seeding.</li>
	<li>Sollevare MSCs coltivate utilizzando 0,05% tripsina (3-5 mL per un pallone da T75). Incubare a 37 ° C per 5 min, assicurarsi che le cellule hanno alzato, quindi aggiungere 7-10 mL DMEM al pallone per inattivare la tripsina.</li>
	<li>Trasferire contenuto del pallone in una provetta per centrifuga 15 mL. Contare le celle utilizzando un emocitometro. Pellet di 5 x 105 MSCs per ogni ponteggio tramite centrifugazione a 100 x g per 5 min.</li>
	<li>Aspirare il supernatante e risospendere MSCs in 5 µ l DMEM 5x105 cellule.</li>
	<li>Preparare i ponteggi per il seeding tamponando loro secco.<ol>
<li>Rimuovere un'impalcatura da immersione DMEM con le pinzette e temporaneamente posizionarlo sul coperchio della piastra 6 pozzetti. Sollevare il patibolo il coperchio, lasciando dietro di sé una gocciolina di DMEM in eccesso.</li>
		<li>Riposizionare l'impalcatura sul coperchio nuovamente in un luogo nuovo e asciutto. Ripetere 3 - 5 volte, quindi posizionare il patibolo parzialmente appassito in una nuova piastra 6 pozzetti per il seeding. Ripetere per ogni ponteggio. Nota: Un'impalcatura parzialmente appassita fornisce cellulare ottimale semina risultati. Se il ponteggio è troppo umido, cellule saranno sfilare il patibolo e aderire alla piastra ben qui sotto. Se il ponteggio è troppo asciutto, la goccia non si diffonderà in intera impalcatura, conseguente distribuzione povera cella iniziale.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Utilizzando una pipetta, mescolare delicatamente il flaconcino di cellule staminali per omogeneizzare la sospensione come alcune cellule possono essere depositati alla parte inferiore.</li>
	<li>Pipettare lentamente 2,5 µ l appena mescolato sospensione MSC direttamente sul patibolo, creando una piccola goccia sopra la parte superiore dell'impalcatura.</li>
	<li>Aggiungere 300 µ l DMEM ai bordi di ciascun pozzetto. Ciò impedirà la rapida evaporazione della goccia delle cellule. Incubare a 37 ° C per 30 min, permettendo alle cellule di allegare al patibolo.</li>
	<li>Con il forcipe, capovolgere delicatamente le impalcature sopra nella piastra di ben. Seme 2,5 µ l appena mescolato MSC sospensione (in questo modo un totale di 5 x 105 cellule seminate al patibolo). Incubare a 37 ° C per 30 min, permettendo alle cellule di allegare al patibolo.</li>
	<li>Coprire le impalcature in DMEM aggiungendo 2 mL in ciascun pozzetto della piastra 6 pozzetti. Sollevare delicatamente le impalcature per consentire media fluire sotto di loro. Incubare a 37 ° C in questo stato per 48 h prima dell'intervento di impianto.</li>
	<li>Verifica le impalcature dopo 24 h e aggiungere/modificare media se evaporazione in eccesso o supporti scoloriti a causa dello squilibrio del pH sono osservati.</li>
</ol>2. fluorescenza-guidato la resezione e l'impianto dell'impalcatura
Nota: Sterilizzare tutti gli strumenti prima dell'inizializzazione di chirurgia. Amministrare l'analgesia profilattica come descritto nel vostro protocollo IACUC istituzionale.
<ol><li>Posizionare la cornice stereotassica sul palco di una fluorescenza stereomicroscopio di dissezione.</li>
	<li>Anestetizzare il mouse sotto inalato isoflurano in un'aula di induzione. Una volta anestetizzato, fissare il mouse nella cornice stereotassica con anestesia per inalazione continua di alimentazione tramite un adattatore ogiva isoflurano. Mantenere la temperatura corporea con un rilievo di riscaldamento e/o la sonda. Nota: 4-5% isoflurane è adatta per induzione e 2-3% è adatto per la manutenzione, ma questo deve essere adattato e monitorato per ogni mouse.</li>
	<li>Applicare unguento oftalmico agli occhi per prevenire la secchezza della cornea. Sterilizzare il sito di incisione del cuoio capelluto con una serie di tre alcol e tre salviettine imbevute di betadine.</li>
	<li>Eseguire la prova reflex di punta pizzico su ogni arto e confermare risposta negativa per garantire adeguata amputate. Garantire un costante tasso respiratorio a circa 55-65 respiri/min.</li>
	<li>Usando il forcipe, pizzicare e sollevare delicatamente il cuoio capelluto. Fare un'incisione rostrale caudale lineare del midline con forbici chirurgiche. Irrigare il sito di incisione con PBS e rimuovere il grasso sottocutaneo con un cotton-fioc in un movimento circolare di spazzolatura. Organizzare la pelle tale che la finestra cranica precedentemente stabilita è completamente visibile.</li>
	<li>Delicatamente la puntura dura solo interno ai bordi della finestra cranica utilizzando un ago da 18 G. Ripetere fino a quando l'incisione tracce completamente all'interno della finestra.</li>
	<li>Rimuovere il dura da peeling via con una pinzetta, rivelando il parenchima sottostante e tumore.</li>
	<li>Individuare il tumore di mCh-Fl U87 spegnendo luci in camera e accendere la fluorescenza-modalità di stereomicroscopio. Preparare per la resezione di un puntale di 1-200 µ l di caricamento nell'estremità del tubo di una pompa a vuoto.</li>
	<li>Accendere la pompa del vuoto. Resecare il tumore aspirando delicatamente il tessuto fluorescente finché non rimane nessun segnale. Spegnere la pompa del vuoto e scartare la punta della pipetta. Girare la fluorescenza fuori e la camera luci torna su. Nota: Per controllare lo spurgo, irrigare con PBS freddo e applicare una pressione costante con un cotton-fioc. Nei casi più gravi, la cavità di resezione può anche essere imballata temporaneamente con un agente emostatico, finché viene rimosso dopo il sanguinamento si è fermato seguita da un'altra irrigazione di PBS.</li>
	<li>Immediatamente prima dell'impianto, immergere lentamente un'impalcatura PLA MSC-seminato in PBS per rimuovere indesiderati media e componenti associati. Impiantare il patibolo in cavità di resezione. Se necessario, aggiungere 1 fibrinogeno µ l (67-106 mg/mL), seguito da trombina di 1 µ l (400-625 U/mL) per garantire l'impalcatura in luogo.</li>
	<li>Con la dura madre rimosso e il lembo osseo dalla finestra cranica già scartato, sigillare la ferita semplicemente di chiudere la pelle e applicare la colla chirurgica. Rimuovere l'animale da anestetico per via inalatoria e permettono di recuperare su una superficie riscaldata.</li>
	<li>Mouse una volta ambulatorio, ritorno alla gabbia. Somministrare analgesici puntualmente IACUC-approvato. Ripetere la procedura per ogni mouse.</li>
</ol>3. post-operatorio di Imaging
<ol><li>Utilizzando la siringa di insulina 28g, iniettare topi con D-luciferina (150 mg/kg intraperitoneale).</li>
	<li>Aspettare 10 min. Questo permetterà la luciferina di circolare in tutto il corpo e reagire con le cellule tumorali che esprimono luciferasi nel cervello per ottenere massima espressione.</li>
	<li>Nell'ambito dell'anestesia di isoflurane (come accennato in precedenza), immagine topi in un bioluminescenza (BLI) sistema per visualizzare i tumori di imaging. Variare i tempi di esposizione come necessari (secondi a minuti) a seconda delle dimensioni del tumore.</li>
	<li>Ripetere la procedura di imaging come necessario per determinare la cinetica di crescita del tumore. Continuare a monitorare la salute degli animali. Nota: MSCs terapeutico si esprimono costitutivamente TRAIL, uccidere le cellule tumorali e sopprimendo la crescita complessiva del tumore. Ogni 2-5 giorni di imaging fornisce una frequenza sufficiente per questo scopo.</li>
	<li>Qualora ricorrano predeterminato endpoint descritte nel protocollo della IACUC, sacrificio topi mediante perfusione perfusione e raccogliere i tessuti per l'analisi.</li>
</ol>

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</ol>

D. ssa Sheets, Bagó e Hingtgen avere equità nelle terapie di Falcon, che ha aspetti di cellule staminali e la tecnologia dell'impalcatura da UNC Chapel Hill, concesso in licenza.

Chirurgia in genere può essere completata entro 30 min per topo, dato che i punti seguenti sono presi in considerazione per massimizzare la precisione ed evitare insidie che richiede tempo. Innanzitutto, assicurarsi che il mouse è posizionato correttamente nello strumento stereotassica prima di iniziare la procedura. Movimenti indesiderati della testa limiterà la precisione chirurgica del craniotomy, Ubicazione dell'impianto del tumore e del livello di resezione del tumore. Prima di resezione, rimuovere completamente la ...

Glioblastoma (GBM) è il tumore cerebrale primario più comune negli adulti, con una misera sopravvivenza mediana di soli 12-15 mesi1,2,3,4,5. Sopravvivenza non è significativamente migliorata poiché 2005 quando l'attuale standard clinici di massima resezione chirurgica seguita da radioterapia e chemioterapia temozolomide concomitante e adiuvante è stato adottato6,7. Mentre questo trattamento fornisce ai pazienti un sollievo temporaneo dei sintomi, standard di trattamento cura risultati invariabilmente in ricorrenza come fuochi del cancro invasivo eludere la resezione e sono protetti dalle terapie sistemiche da emato - encefalica (BBB). Strategie i focolai di tumore invasivo di destinazione mentre eludere la BBB sono urgentemente necessarie per guadagnare trazione contro questa malattia debilitante e aggressiva.
Cellule staminali mesenchimali (MSCs) mostrano la promessa come droga veicoli di consegna per GBM a causa del loro tumore nativo tropismo8,9. MSCs possiedono i ricevitori per e migrare verso fattori solubili che tumori secernono, compreso 1 α fattore derivato da cellule stromali (SDF-1 α), matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) e monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) tra gli altri10, 11 , 12 , 13. ingegneria MSCs per esprimere e secernono farmaci citotossici permette loro di essere sfruttato come veicoli di consegna di droga tumore-homing. MSCs derivati dal muoversi verso i fuochi del tumore invasivo e fornire proteine terapeutiche. Questo approccio ha dimostrato la fattibilità in una varietà di preclinici GBM modelli9,14. Tuttavia, la maggior parte di questi modelli non includono la resezione chirurgica nonostante la rilevanza clinica di questo componente. Emergendo studi utilizzando nuovi modelli di resezione ha rivelato che la rimozione chirurgica del tumore riduce la persistenza di cellule staminali che vengono iniettate direttamente nella cavità chirurgica15. Perdita di attuabilità ha provocato ridotta efficacia, probabilmente a causa di diminuzioni nella dose e la durata del farmaco consegnato ai fuochi del tumore invasivo.
Per aumentare la vitalità delle cellule staminali e drug delivery, MSCs possono essere seminate su impalcature prima dell'impianto. In questo protocollo, biocompatibili e riassorbibili elettrofilate nanofibrous poly(lactic acid) (PLA) viene utilizzato come ponteggio per MSCs. PLA si flette e si adatta alla forma della cavità di resezione al momento dell'impianto, che massimizza la copertura terapeutica e riduce al minimo il distanza MSCs deve percorrere per raggiungere le cellule del tumore. MSCs rimangono sul patibolo durante l'impianto e quindi migrare fuori il patibolo verso le cellule del tumore dopo l'impianto16,17. MSCs e i farmaci citotossici che trasportano quindi si accumulano i focolai di tumore. Consegna della droga citotossica al tumore richiede MSC vitalità e persistenza, entrambi i quali sono aiutati da impianto su ponteggi.
In questa procedura vengono utilizzati vettori lentivirali di indurre l'espressione stabile di (fluorescentein vitro di rilevamento) e bioluminescenti (in vivo di rilevamento) marcatori nelle linee di cancro e di cellule staminali. La linea GBM umana U87 è infettata di mCherry e firefly luciferase (U87 mCh-Fl) e il MSCs non terapeutico con GFP e renilla luciferasi (MSC GFP-Rluc). La variante terapeutica delle MSC express TNFα-correlati apoptosis inducing ligand (MSC-TRAIL). SENTIERO, una proteina secernuta costitutivamente, associa a nelle vicinanze di recettori di morte sul cancro cellule e avvia gli apoptosi caspase-mediati18.
Qui, forniamo un protocollo per resezione chirurgica GBM preclinica immagine-guida e l'impianto di scaffold MSC-seminato. In breve, i topi nudi sono dato un craniotomy seguito tre giorni dopo da iniezione stereotactic ortotopico di U87 mCh-Fl per stabilire il tumore primario. Il tumore engrafted cresce per un periodo di circa una settimana. Impalcature PLA sono seminate con MSCs 48h prima dell'intervento chirurgico di resezione. Il tumore è quindi resecato sotto guida fluorescente e l'impalcatura MSC-caricato viene impiantato nella cavità di resezione. Sopravvivenza di onere e mouse di tumore sono quindi monitorati postoperatorio con bioluminescenza imaging (BLI). Una sequenza temporale di queste procedure è fornita qui sotto (Figura 1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57452/57452fig1.jpg"> Figura 1: sequenza temporale delle procedure. Topi inizialmente ricevano una finestra cranica (giorno 0). Dopo un periodo di recupero di tre giorni, i tumori sono impiantati (giorno 3) e crescere per circa una settimana. Impalcature sono seminate con MSCs (giorno 8) due giorni in anticipo la procedura di resezione e l'impianto del tumore (giorno 10). Progressione del tumore ed efficacia terapeutica vengono valutati tramite post-operatorio in seguito di imaging (giorno 10 +). <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/57452/57452fig1large.jpg" target="_blank">Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.</a>

<table><tbody><tr><td>Solo per mouse strumento stereotassico</td><td>Stoelting</td><td>51730</td><td>Mantiene stabile il posizionamento della testa durante l'intervento chirurgico</td></tr><tr><td>Stereomicroscopio a fluorescenza per dissecazione</td><td>Leica</td><td>M165 FC&nbsp;</td><td>Consente l'imaging in tempo reale del tumore durante la resezione</td></tr><tr><td>Sistema di iniettori stereotassici (ISI) integrato motorizzato</td><td>Stoelting</td><td>53315</td><td>Consente un volume e una velocità di iniezione precisi delle cellule tumorali</td></tr><tr><td>Adesivo tissutale</td><td>Vetbond 3M</td><td>1469</td><td>Colla sugica per chiudere la ferita cutanea</td></tr><tr><td>Lacrime artificiali</td><td>Akorn</td> 664268 <td>Previene la secchezza degli occhi durante</td><td>l'intervento</td> chirurgico</tr><tr><td>Webcol prepara l'alcol</td><td>Covidien</td><td>6818</td><td>Sterilizzare il sito di incisione</td></tr><tr><td>Scrub chirurgico Betadine</td><td>Purdue Fredick Company</td><td>6761815117</td><td>Sterilizzare il sito di incisione</td></tr><tr><td>Applicatori con punta in cotone Fisherbrand</td><td></td><td>23-400-115</td><td>Strumento chirurgico</td></tr><tr><td>Sistema di aspirazione E-vac</td><td>Argos</td><td>EV310</td><td>Pompa a vuoto utilizzata per resecare il tumore</td></tr><tr><td>Fibrinogeno e trombina estratti da TISSEEL</td><td>Baxter</td><td></td> ricevuti <td>Per fissare temporaneamente l'impalcatura nella cavità di resezione</td></tr><tr><td>IVIS Sistema di imaging ottico cinetico in vivo</td><td>Caliper Life Science</td><td></td><td>Bioluminescente Imager</td></tr><tr><td>D-Luciferina sale di potassio</td><td>PerkinElmer</td><td>122799</td><td>Agente di imaging in vivo</td></tr></tbody></table>

immagine-guida di resezione del glioblastoma e l'impianto intracranico di terapeutica delle cellule staminali-seminato ponteggi

Image-Guided Resection of Glioblastoma and Intracranial Implantation of Therapeutic Stem Cell-seeded Scaffolds

Glioblastoma (GBM), il tumore cerebrale primario più comune e più aggressivo, trasporta un'aspettativa di vita di 12-15 mesi. La breve aspettativa di vita è dovuto in parte all'incapacità del trattamento attuale, che consiste della resezione chirurgica seguita da radioterapia e chemioterapia, per eliminare i focolai di tumore invasivo. Trattamento di questi focolai può essere migliorato con tumoricidal umano cellule staminali mesenchimali (MSCs). MSCs esibiscono tropismo potente del tumore e possono essere ingegnerizzate per esprimere terapeutiche proteine che uccidono le cellule del tumore. Avanzamenti in modelli preclinici indicano che la resezione chirurgica induce la perdita prematura di MSC e riduce l'efficacia terapeutica. Efficacia del trattamento del MSC può essere migliorata da semina MSCs su un'impalcatura biodegradabile poly(lactic acid) (PLA). Consegna MSC nella cavità di resezione chirurgica su un'impalcatura PLA Ripristina di uccisione del tumore, la persistenza e la conservazione delle cellule. Per studiare gli effetti dell'impianto di PLA MSC-seminato il GBM, è necessario un accurato modello preclinico. Qui forniamo un protocollo chirurgico preclinico per resezione del tumore di immagine-Guida di GBM in topi immune-carenti ha seguito da impianto di impalcatura MSC-seminato. MSCs sono progettati con costrutti lentivirali costitutivamente esprimere e secernono terapeutico TNFα-correlati apoptosis-inducing ligand (TRAIL), come pure la proteina fluorescente verde (GFP) per consentire la registrazione fluorescente. Allo stesso modo, le cellule del tumore U87 sono progettate per espresso mCherry e luciferasi di lucciola, fornendo dual fluorescente/luminescenti di rilevamento. Mentre attualmente utilizzato per lo studio di cellule staminali mediate consegna di terapeutica, questo protocollo potrebbe essere modificato per studiare l'impatto della resezione chirurgica sugli altri interventi GBM.

U87 cellule del tumore sono state progettate per espresso mCherry e luciferasi di lucciola (U87 mCh-Fl) prima dell'iniezione e per consentire la resezione guidata da immagini e bioluminescenza (Figura 2A-C) di rilevamento. Cellule staminali erano similmente progettate con diagnostica GFP-Rluc (MSC-GFP) o GFP-prova terapeutica (MSC-TRAIL) e seminate su impalcature PLA per confermare allegato e proliferazione (Figura 2D</st...

Alla ricerca di tumore terapeutiche cellule staminali mesenchimali (MSCs) mostrano la promessa come trattamento per glioblastoma dilagante. Trapianto ottimo coinvolge consegna delle MSC in cavità di resezione del tumore su ponteggi. Qui, preclinici tecniche per studiare il trattamento del MSC di glioblastoma sono forniti tra cui: resezione del tumore immagine-guida; impianto di scaffold MSC-seminato; e terapia postoperatoria di rilevamento.

Immagine-Guida di resezione del Glioblastoma e l'impianto intracranico di terapeutica delle cellule staminali-seminato ponteggi

Glioblastoma (GBM), the most common and aggressive primary brain cancer, carries a life expectancy of 12-15 months. The short life expectancy is due in ...

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di resecare chirurgicamente il cancro al cervello nei topi e di impiantare un'impalcatura seminata con cellule staminali terapeutiche di homing tumorale nella cavità di resezione postoperatoria. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della terapia cellulare e della neuro-oncologia, come ad esempio il modo in cui la resezione chirurgica influisce sull'impianto cellulare nella cavità chirurgica, l'efficacia dei nuovi agenti terapeutici sul cancro cerebrale post-chirurgico e il modo in cui i sistemi di somministrazione basati su scaffold influenzano i risultati terapeutici. Il vantaggio principale di questa tecnica è che gli interventi sul cancro al cervello possono essere studiati nei topi in un modo che imita da vicino lo standard clinico di cura nei pazienti umani.Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sulla terapia con cellule staminali somministrata su scaffold, può essere applicato anche ad altri interventi, come nanoparticelle, piccole molecole, virus oncolitici o altre terapie emergenti. Preparare gli scaffold 48 ore prima dell'impianto nei topi tagliando prima gli scaffold in PLA in pezzi d

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Impianto intracranico di GL261 cellule in C57BL / 6 topi produce gliomi maligni che ricapitolano molte delle caratteristiche del glioblastoma multiforme umano. Abbiamo usato GL261 cellule che esprimono stabilmente luciferasi per permetterci di...

Impianto intracranica con 3D successivi In Vivo Bioluminescent Imaging dei gliomi Murine

Descriviamo un metodo integrato per la precisione, l'impianto stereotassico di cellule umane di glioblastoma multiforme nel cervello di topi nudi e seriali...

Stereotassica impianto intracranico e<em&gt; In vivo</em&gt; Imaging Bioluminescent di xenotrapianti di tumori in un sistema modello del mouse di Glioblastoma Multiforme

Grazie alla combinazione di un lucido e rafforzata sottile cranio (porte) cranica finestra e il glioblastoma (GBM) l'iniezione di cellule, possiamo osservare l'inizio glioma e la crescita di cellule di GBM iniettate nel cervello di un topo vivo longitudinalmente.

Imaging Glioma Iniziazione<em&gt; In Vivo</em&gt; Attraverso un lucido e sottile rinforzato cranio finestra craniale

Questo video descrive la tecnica di semina di cellule staminali mesenchimali (MSC) su un'impalcatura biodegradabile di acido poli(lattico) (PLA). Gli scaffold preparati possono essere impiantati nella cavità di resezione chirurgica del cervello da dove possono migrare verso i focolai tumorali. Inoltre, queste cellule possono essere ingegnerizzate per esprimere proteine terapeutiche per stimolare l'apoptosi nelle cellule tumorali.

Preparazione dell'impalcatura seminata MSC: una tecnica per preparare l'impalcatura seminata con cellule staminali mesenchimali per l'impianto chirurgico in un modello murino

Questo video presenta la procedura chirurgica per la resezione tumorale guidata da immagini e l'impianto di un bio-scaffold seminato con cellule staminali mesenchimali geneticamente modificate o MSC che esprimono il ligando che induce l'apoptosi correlata al fattore di necrosi tumorale o TRAIL. Queste MSC terapeutiche hanno il potenziale nel trattamento dei tumori cerebrali.

Resezione tumorale guidata da fluorescenza e impianto di scaffold seminato con MSC in modello murino: una procedura chirurgica per fornire cellule staminali mesenchimali terapeutiche nella cavità di resezione del tumore cerebrale in un modello murino

Abbiamo stabilito un modello glioblastoma ortotopico corticale nei topi per intravital microscopia a due fotoni che ricapitola i vincoli biofisici normalmente in gioco durante la crescita del tumore. Una finestra di vetro cronica sostituzione del cranio sopra il tumore consente il seguito della progressione tumorale nel tempo mediante microscopia a due fotoni.

Un ortotopico Glioblastoma modello di mouse mantenimento di vincoli Cervello parenchimale fisiche e adatto per intravitale due fotoni Microscopia

Le cellule staminali sono promettenti vettori terapeutici per curare i tumori cerebrali a causa del loro tropismo tumorale intrinseco. La consegna delle cellule staminali intranasali non invasive bypassa la barriera del cervello e dimostra un forte potenziale per la traduzione clinica. Questo articolo riassume i principi fondamentali della consegna delle cellule staminali intranasali in un modello di topo di glioma.

Intranasale consegna delle cellule staminali terapeutiche a Glioblastoma in un modello di mouse

Questo lavoro descrive lo sviluppo di elettrodi interdigitati flessibili per l'implementazione in modelli 3D di tumore cerebrale, vale a dire, coltura in vitro , modello ovo e modello murino in vivo . Il metodo proposto può essere utilizzato per valutare gli effetti dei campi elettrici pulsati sui tumori a diversi livelli di complessità.

Dispositivi elettronici organici flessibili per la terapia del campo elettrico pulsato del glioblastoma

Presentiamo un nuovo approccio per la microscopia a due fotoni della somministrazione tumorale di nanoparticelle di ossido di ferro marcate con fluorescenza al glioblastoma in un modello murino.

Microscopia intravitale a due fotoni del glioblastoma in un modello murino

In vivo, le comunicazioni intercellulari alla base di molte malattie del sistema nervoso centrale, come il glioblastoma (GBM), sono notoriamente difficili da misurare e caratterizzare. Qui descriviamo procedure di microperfusione cerebrale a flusso aperto (cOFM) che possono essere impiegate per campionare componenti del liquido interstiziale in un modello animale longitudinale della GBM.

Uso della microperfusione cerebrale a flusso aperto per la raccolta longitudinale di liquido interstiziale in un modello animale di glioblastoma

L'obiettivo di questo protocollo è fornire ai ricercatori una tecnica altamente riproducibile per le impianti intracraniche.

Impianto intracranico stereotassico di linee cellulari xenoinnestate derivate dal paziente con glioblastoma nei topi

Impara la resezione chirurgica del glioblastoma nei topi e l'impianto di ponteggi con cellule staminali mesenchimali terapeutiche. Questo metodo permette di studiare l'efficacia della terapia cellulare post-operatoria in neuro-oncologia.

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