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DOI: 10.3791/57489-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Questo protocollo descrive un metodo per studiare la possibilità di metamemory, o memoria consapevolezza, nei roditori. Il paradigma di in ritardo-corrispondenza--campione basato su odore è un romanzo, ecologicamente rilevanti del comportamento test utile per la determinazione del limite a cui roditori possono rispondere in modo adattivo basato sul monitoraggio cognitivamente la forza dei loro Stati di memoria.
L'obiettivo generale di questo esperimento è determinare la misura in cui i roditori rispondono metacognitivamente presentando ai soggetti test di memoria che possono essere rifiutati. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della psicologia comparata, come determinare la misura in cui i ratti monitorano la memoria. Il vantaggio principale di questa tecnica è che è relativamente facile da imparare per i ratti in quanto sfrutta il naturale comportamento di foraggiamento del ratto e il senso primario dell'olfatto.
Questa tecnica è stata creata con cura in modo che i risultati dei test comportamentali siano validi e affidabili. Ad esempio, abbiamo bilanciato l'intervallo tra le prove con la dimensione impostata da cui sono stati estratti gli odori del campione in modo che vi sia un'interferenza di memoria ottimale. Abbiamo avuto l'idea di questo metodo da paradigmi simili utilizzando stimoli visivi nelle scimmie insieme a esperimenti non correlati in cui ai ratti vengono presentati odori da ricordare scavando in tazze piene di sabbia.
Il protocollo del testo descrive l'assemblaggio dell'apparato di test, l'abitudine dei ratti all'apparato di test e lo scavo in tazze di sabbia per ottenere ricompense alimentari. Una volta stabilita una preferenza alimentare significativa, il ratto può procedere all'addestramento con l'abbinamento al campione. Per questo test, quattro diverse tazze di sabbia profumata dovrebbero essere già preparate e non più vecchie di una settimana.
Conservare la sabbia profumata in contenitori di vetro ben chiusi. Ogni sessione di test match-to-sample è composta da sei prove con intervalli di quattro minuti tra le prove. Affinché un animale superi questo addestramento, il ratto deve identificare correttamente la ricompensa nascosta in almeno tre prove in due sessioni di test consecutive.
Per impostare il test di abbinamento al campione, versare mezza tazza di ogni sabbia profumata in quattro tazze. Quindi, seguendo la posizione assegnata in modo casuale dal software, disporre le tazze equidistanti dalla porta d'ingresso nell'area di lavoro dell'apparato. Quindi, seppellisci un pezzo intero di ricompensa nella tazza profumata corretta pseudo scelta a caso.
Basta non usare la stessa tazza più di due volte di seguito. Inoltre, seppellisci mezzo pezzo di ricompensa in una tazza campione identica e profumata. Seppellisci le ricompense almeno a metà strada fino al fondo della tazza di sabbia.
Inizia il test presentando l'odore del campione al ratto. Posizionare il ratto nella camera del campione e superare la camera di ritardo intermedia. Quindi abbassa la tazza contenente la mezza ricompensa nella camera usando una spatola piegata.
Non appena il topo inizia a mangiare la ricompensa, rimuovi la tazza. Dopo che il topo ha finito di mangiare la ricompensa, solleva il divisorio di cartone verso la camera di ritardo e il divisore verso l'area di attività MTS. Non appena il topo fa una scelta e recupera una ricompensa se presente, rimuovi il topo dalla camera e mettilo nella gabbia di trasferimento.
Il topo può e probabilmente annuserà ogni tazza, ma permetterà al topo di scavare solo in una tazza. Se sceglie in modo errato, rimuoverlo rapidamente per evitare scelte di tazza alternative. Una volta nella gabbia di trasferimento, avvia un ITI di quattro minuti e per accecare il topo dalla visione della prossima configurazione di prova, proteggi la gabbia.
Durante il periodo di riposo, aspira la sabbia che potrebbe essere fuoriuscita, pulisci la camera con alcol isopropilico al 70%, rimuovi le ricompense non consumate e riempi le tazze di sabbia secondo necessità. Quindi prepara la prossima tazza campione pseudo selezionata a caso con la mezza ricompensa. Impostare l'area delle attività ed eseguire la versione di prova successiva.
Al termine della sessione, riporta il ratto nella sua gabbia di casa e inizia a testare il ratto successivo. Dopo aver superato l'attività MTS, passa al test Delayed Match-To-Sample o DMTS per stabilire un criterio di ritardo. Questo compito è simile all'MTS, ma essenzialmente aggiunge un intervallo di ritenzione tra la somministrazione del campione al ratto e l'esecuzione del test da parte del ratto.
Quando i ratti hanno un tasso di successo compreso tra il 40 e il 70%, l'intervallo di ritardo è sufficiente per far avanzare i ratti alla prova forzata contro scelta. Prima di iniziare le prove forzate contro scelte, conduci prima due prove in cui il ratto trova solo la coppa di declino nella sala operativa. La tazza declinata è caricata con sabbia di colore e consistenza diversi.
Viene caricato con una ricompensa di un quarto. I percorsi forzati rispetto a quelli a scelta sono come i test DMTS, ma in otto test su 12, la coppa declinata viene offerta sul lato opposto della camera rispetto alle quattro tazze MTS. Condurre 10 sessioni forzate rispetto a scelte per ratto.
Durante ogni prova, quando il ratto entra nella camera di ritardo, prendere nota se il ratto inizialmente gira a sinistra verso la coppa di declino o a destra per eseguire il test MTS. Questa è la scelta prospettica della metamemoria. Dopo due sessioni, calcola l'accuratezza del ratto nelle prove forzate.
Se l'accuratezza del ratto sale al di sopra del 70% o scende al di sotto del 40%, allora interrompi il test forzato rispetto a quello a scelta e torna al test DMTS. Una volta che la precisione del ratto è di nuovo compresa tra il 40 e il 70% in due sessioni consecutive di DMTS, torna alle sessioni di trail forzate rispetto a quelle a scelta. Inoltre, determina se nell'arco di due sessioni l'opzione di rifiuto si avvicina a zero o al 100%In questo caso, metti in pausa il test e valuta la possibilità di modificare l'entità della ricompensa nella coppa di rifiuto.
L'obiettivo è un tasso di scelta del rifiuto compreso tra il 10 e il 40%Durante il test forzato rispetto alla scelta, assicurarsi che le preferenze del ratto rimangano le stesse eseguendo controlli delle preferenze una volta alla settimana come descritto nel protocollo di testo. Assicurarsi sempre che la camera di prova sia pulita con isopropanolo dopo ogni prova. A seconda del loro criterio di ritardo, potrebbe essere possibile testare due o tre ratti contemporaneamente, il che renderà particolarmente critica una pulizia accurata.
Al fine di studiare la risposta metacognitiva del soggetto, la proporzione di prove forzate corrette viene confrontata con la proporzione di prove scelte correttamente o di prove in cui è presente un'opzione di declino. Un risultato positivo è indicato da un'accuratezza significativamente più elevata nelle prove scelte rispetto alle prove forzate. Se le prestazioni non sono significativamente più accurate nelle prove scelte rispetto alle prove forzate, i risultati sono nulli.
Questa ipotetica mancanza di prove per la metamemoria nei ratti è indicata dal mancato utilizzo dell'opzione del test di declino quando sarebbe stato adattivo farlo in studi durante i quali il campione è stato dimenticato. Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come testare i ratti per la risposta metacognitiva utilizzando un test di corrispondenza ritardata con campione con sabbia profumata. Una volta padroneggiato, un ratto può essere testato in una sessione di match-to-sample in circa 45 minuti, a seconda del ritardo del ratto se viene eseguito correttamente.
Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordare che i ratti devono essere abituati all'apparato, avere una forte preferenza per le ricompense e un intervallo di ritenzione selezionato e monitorato individualmente.
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