Elettrochimico rilevamento di deuterio isotopo effetto cinetico su extracellulare di trasporto dell'elettrone nella Shewanella oneidensis MR-1

L'obiettivo generale di questo protocollo è osservare il contributo del trasporto di protoni alla velocità di trasporto di elettroni extracellulari batterici attraverso la rilevazione dell'effetto isotopico cinetico del deuterio. Il nostro metodo rivela l'impatto del trasporto di protoni sulla cinetica del trasporto extracellulare di elettroni o EET dai batteri a un elettrodo attraverso i citocromi di tipo c della membrana esterna. Il nostro test riflette la gestione dei protoni nativi nell'EET perché abbiamo utilizzato batteri viventi piuttosto che enzimi purificati.

Tuttavia, la nostra sfida era quella di rimuovere i rumori da altri processi cellulari. L'effetto dell'isotopo cinetico del deuterio, definito KIE, è una delle migliori tecniche per esaminare il contributo del trasporto di protoni sul processo di trasporto degli elettroni associato. Per far crescere le cellule Shewanella MR-1, trasferire una colonia di cellule coltivate su una piastra di agar in 15 millilitri di terreno LB.