Her presenterer vi en detaljert protokoll for å skille menneskelig pluripotent stamceller (hPSCs) i bukspyttkjertelen/tolvfingertarmen homeobox protein 1+ (PDX1+) celler for generering av bukspyttkjertelen overleveringslinjer basert på ikke-kolonien type monolayer av dissosiert enkeltceller. Denne metoden er egnet for produksjon av homogene hPSC-avledet celler, genetisk manipulasjon og screening.